基于PGC-1α通路探索珍龙醒脑胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护机制

目的:基于过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α)通路探索珍龙醒脑胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组(Sham)组、模型组(I/R)组、珍龙醒脑低、中、高剂量组(ZLXNl、ZLXNm、ZLXNh)组。每组12只。除Sham外采用改良的Longa 法复制缺血性脑损伤大鼠模型,造模后除I/R外,3组大鼠分别灌胃给予珍龙醒脑50、100及200mg/(kg·d),I/R组和Sham组同步给予0.9%氯化钠溶液,疗程1周。造模后第6,12,24h进行神经功能缺陷评分;治疗干预1周后采用ELISA法检测海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6含量,Western blot 检测核转录因子κB(NF-κB)、PGC-1α、核呼吸因子-1(NRF1)、线粒体转录因子 A(TFAM)的mRNA表达。结果:与I/R组比较,ZLXNm、ZLXNh组各时间点神经功能缺陷评分明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);珍龙醒脑胶囊各剂量组的 白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α和丙二醛水平显著降低,而谷胱甘肽过氧化物酶显著升高,差异有统计学意义(P< 0.05)。ZLXNl组SOD活性与I/R组比较,差异无统计学意义(P>0.05),ZLXNm、ZLXNh组SOD显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。珍龙醒脑各剂量组海马组织PGC-1α和 TFAMmRNA 表达显著升高(P<0.05),NF-κB蛋白表达在ZLXNm、ZLXNh组显著降低(P<0.05),NRF1蛋白表达在ZLXNm、ZLXNh组显著升高(P<0.05)。结论:珍龙醒脑胶囊可以促进脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能恢复,并抑制氧化应激和炎性反应从而发挥神经保护作用。其机制可能与 NF-κB表达的下调和 PGC-1α 信号通路激活有关。

珍龙醒脑胶囊治疗脑梗死恢复早期肢体运动障碍的临床研究

目的:探索珍龙醒脑胶囊治疗脑梗死恢复早期肢体运动障碍的临床疗效和作用机制。方法:对29例脑梗死恢复早期肢体运动障碍的患者,给予4周的藏药珍龙醒脑胶囊口服治疗。治疗4周后,观察患者《中风病证候要素评价量表》、Fugl-Meyer运动功能评定量表(Fugl-Meyer Assessment,FMA)和美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分的改变及不良反应发生情况,并在治疗前后对患者进行磁共振扩散张量成像,采用基于纤维束示踪的空间统计方法获取治疗前后各向异性分数值差异的脑区进行分析。结果:治疗后患者的内火、痰湿、血瘀证候的积分较治疗前降低(P<0.05);FMA总分和NIHSS总分较治疗前改善(P<0.05);胼胝体体部、胼胝体压部、胼胝体毯、丘脑后辐射、放射冠、左侧上纵束、左侧外囊、右侧内囊前肢等脑区的各向异性分数值较治疗前升高(P<0.05)。治疗期间,受试者无不良反应发生。结论:珍龙醒脑胶囊治疗脑梗死恢复早期肢体运动障碍的患者,用药4周是有效且安全的。珍龙醒脑胶囊能有效改善脑梗死恢复期患者的肢体运动功能障碍,其作用机制可能与胼胝体、放射冠等脑区受损白质纤维束的修复与重组相关。

珍龙醒脑胶囊治疗脑梗死临床观察

目的:观察珍龙醒脑胶囊治疗脑梗死的临床疗效。方法:采用基础治疗,同时将患者随机分为治疗组43例采用珍龙醒脑胶囊治疗,对照组31例采用步长脑心通胶囊治疗,疗程为28d,然后对疗效进行比较。结果:两组疗效差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用珍龙醒脑胶囊治疗脑梗死疗效更好。

珍龙醒脑对血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬相关蛋白表达的影响

目的:探讨珍龙醒脑对血管性痴呆大鼠海马CAI区自噬相关蛋白mTOR、Beclin1表达和自噬活性微管相关蛋白1轻链3 (LC3)Ⅱ与Ⅰ的比值的影响。方法:72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、珍龙醒脑组,每组又分为造模术后1周、2周、4周和8周4个亚组,每组6只。采用双侧颈总动脉夹闭法制备血管性痴呆模型,术后珍龙醒脑200 mg/kg灌胃,1次/d,各亚组分别给药1周、2周、4周和8周。免疫组化法检测各组大鼠海马CAI区mTOR与Beclin1表达变化,Westernblot法检测自噬活性微管相关蛋白1轻链3 (LC3)Ⅱ与Ⅰ的比值。结果:与假手术组比较,模型组和珍龙醒脑组各时间段海马CA1区mTOR与Beclin1表达均上调(P均<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高(P均<0.01),且在术后第4周达到高峰值。与模型组比较,珍龙醒脑组各时间段大鼠海马组织mTOR蛋白表达均上调(P均<0.01),Beclin1蛋白表达减少(P均<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下降(P<0.05或P<0.01)。结论:珍龙醒脑通过激活mTOR信号通路,抑制自噬相关蛋白LC3、Beclin1表达,减轻自噬性损伤,发挥对血管性痴呆治疗作用。

HPLC测定珍龙醒脑胶囊中胡椒碱的含量

目的建立珍龙醒脑胶囊荜茇中胡椒碱的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法（HPLC）,以甲醇-水（70：30）为流动相,检测波长为343 nm。结果胡椒碱的含量在4.02~40.15μg/m L范围内线性关系良好,相关系数R=0.9997,平均回收率98.8%。结论该方法简单、准确,可用于珍龙醒脑胶囊的质量控制。

珍龙醒脑胶囊对脑缺血-再灌注损伤大鼠线粒体功能的保护作用

目的探讨珍龙醒脑胶囊对脑缺血-再灌注损伤大鼠线粒体功能的保护作用。方法100只SD大鼠随机均分为五组,A组制备大鼠脑缺血-再灌注损伤模型,B、C、D组在A组基础上,分别给予珍龙醒脑胶囊50、100、200mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃连续1周,假手术(S)组和A组给予等体积生理盐水灌胃连续1周。免疫组化染色检测过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)蛋白表达,Clark氧电极法检测线粒体呼吸功能,比色法测定线粒体ATP含量,无机磷法测定线粒体Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性。结果B、C、D组PGC-1α蛋白表达的阳性细胞数量多于A组(P<0.05或P<0.01)。与A组比较,B、C、D组线粒体呼吸功能改善,且线粒体ATP含量、Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性升高,且C、D组优于B组(P<0.05或P<0.01)。结论珍龙醒脑胶囊具有调节线粒体呼吸功能和改善线粒体能量代谢,其神经保护机制可能与促进PGC-1α蛋白表达有关。

珍龙醒脑胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究珍龙醒脑胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 120只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平(37 mg/kg)组,珍龙醒脑胶囊低、高剂量(125、250 mg/kg)组。利用大鼠可逆性右侧脑中动脉闭塞线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,用Longa's法、TTC染色法评价大鼠的神经功能评分和脑梗死体积;检测左右半脑组织中谷胱甘肽(GSH)、总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)的量;Western blotting法检测脑组织中P38、NF-κB、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能症状评分、脑梗死体积显著增高,T-AOC、T-SOD水平降低,同时促进P38和Caspase-3蛋白表达。与模型组比较,珍龙醒脑胶囊低、高剂量组及尼莫地平组可显著降低脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分,减少脑梗死体积,提高T-AOC、T-SOD水平,珍龙醒脑胶囊高剂量组可抑制P38和Caspase-3的蛋白表达。结论珍龙醒脑胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与改善神经功能、减少自由基损伤和抑制炎症因子表达和细胞凋亡有关。

UPLC-DAD法同时测定珍龙醒脑胶囊中的9种成分

目的 建立同时测定珍龙醒脑胶囊中没食子酸、肉桂酸、甘草苷、西红花苷I、西红花苷II、桂皮醛、丁香酚、甘草次酸、麝香酮等9种成分的UPLC-DAD方法。方法 采用RP-UPLC法,Agilent Zorbax C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,体积流量0.3 m L/min,梯度洗脱,柱温35℃,进样量为1μL。分别对待测物考察其提取溶剂、线性范围、精密度、重复性、稳定性、加样回收率等方法学内容。结果 9种指标成分没食子酸在0.2-20.0mg/L（r=0.999 0）、西红花苷I在0.022-2.200 mg/L（r=0.999 3）、西红花苷II在0.02-2.00 mg/L（r=0.999 6）、甘草苷在0.093-1.860 mg/L（r=0.999 4）、肉桂酸在0.020 4-2.040 0 mg/L（r=0.999 9）、桂皮醛在0.042-4.200 mg/L（r=0.999 9）、丁香酚在0.95-95.00 mg/L（r=0.999 9）、甘草次酸在0.012 9-1.290 0 mg/L（r=0.998 9）、麝香酮在0.073 8-7.380 0 mg/L（r=0.999 0）线性关系良好;精密度RSD≤1.02%;重复性良好,RSD≤1.13%;加样回收率在93.8%-112.1%,RSD≤1.28%。供试品溶液在室温条件下24 h内稳定。3批次供试品中没食子酸、西红花苷I和II、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛、丁香酚、甘草次酸、麝香酮质量分数分别为0.422-0.448、0.093-0.105、0.096-0.112、0.026 8-0.028 5、0.142-0.153、0.140-0.158、1.519-1.547、0.007 55-0.008 04、0.117-0.121 mg/g。结论 本法快速、灵敏度高、准确度高、专属性好,为珍龙醒脑胶囊的质量控制提供依据。

珍龙醒脑胶囊联合丁苯酞治疗急性脑梗死的临床研究

目的探讨珍龙醒脑胶囊联合丁苯酞治疗急性脑梗死的临床疗效。方法选取2018年10月—2020年12月河南科技大学第二附属医院治疗的86例急性脑梗死患者,根据随机数字法将所有患者分为对照组和治疗组,每组各43例。对照组静脉滴注丁苯酞氯化钠注射液,100 mL/次,2次/d。治疗组在对照组治疗基础上口服珍龙醒脑胶囊,2粒/次,2次/d。两组用药治疗14 d。观察两组的临床疗效和症状缓解时间,比较两组神经功能缺损程度(NIHSS)评分、同型半胱氨酸(Hcy)、N末端前脑钠肽(NT-proBNP)、D-二聚体(D-D)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化情况。结果治疗后,治疗组总有效率是97.67%,显著高于对照组的79.07%(P<0.05)。治疗后,治疗组出现眩晕、头痛、中枢性面瘫、肢体无力缓解时间均短于对照组(P<0.05)。治疗后,两组NIHSS评分均较治疗前显著降低(P<0.05);治疗后,治疗组患者NIHSS评分低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组血清因子Hcy、NT-proBNP、D-D、hs-CRP水平均显著降低(P<0.05);治疗后,治疗组血清因子水平低于对照组(P<0.05)。治疗组不良反应发生率是6.98%,显著低于对照组的16.28%(P<0.05)。结论珍龙醒脑胶囊联合丁苯酞治疗急性脑梗死具有较好的临床疗效,可明显改善患者症状,有效改善患者神经功能缺损程度,并能降低机体炎性反应,且安全有效。