瓜蒌薤白三方防治冠心病的研究现状

通过阐述前人在动物实验方面所做的相关研究来对《金匮要略》中所载瓜蒌薤白三方进行梳理,并揭示其治疗机理,为临床治疗冠心病打开思路,也为临床更为广泛的应用瓜蒌薤白三方开辟空间。

HPLC测定枳实薤白桂枝汤颗粒中辛弗林的含量

目的建立枳实薤白桂枝汤颗粒中辛弗林含量测定方法。方法采用Agela Technologies Promosil C_(18)色谱柱(5μm,100 A,4.6×250 mm);以甲醇-磷酸二氢钾溶液(0.6 g磷酸二氢钾,1.0 g十二烷基磺酸钠,1 mL冰醋酸用1000 mL水定容)50∶50为流动相;柱温34℃;检测波长275 nm;流速0.84 mL·min^(-1);进样量10μL。结果在上述色谱条件下,辛弗林在7.7~154.0μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好r=0.9997;精密度、重现性、稳定性均良好RSD<2%;平均回收率为95.21%,RSD=2.26%;分别将流动相配比、检测波长、温度、流速以及乙酸含量等因素在小范围内波动,每次实验测得的辛弗林含量的RSD<2%,表明此方法耐用性良好。结论HPLC法测定枳实薤白桂枝颗粒中辛弗林含量简单、快捷、结果准确、重复性好,方法可行。

基于TRPA1调控泡沫细胞胆固醇代谢作用探讨枳实薤白桂枝汤治疗AS的作用机制

目的:基于主动脉瞬时受体电位通道锚蛋白1(TRPA1)调控泡沫细胞胆固醇代谢作用探讨枳实薤白桂枝汤对动脉粥样硬化(AS)小鼠疾病进展的影响与作用机制。方法:采用高脂饲料在载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠上建立AS模型,随机分为枳实薤白桂枝汤低、中、高剂量组(2.97、5.94、11.88 g·kg^(-1))与辛伐他汀组(0.002 g·kg^(-1)),每组织喂食高脂饲料同时给药,C57BL/6J小鼠作为正常组使用普通饲料喂养,每组10只。上述过程结束后,取小鼠主动脉与血清。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察主动脉根部病理变化;大体油红观察主动脉脂质斑块情况;检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)与免疫组化分析TRPA1、三磷酸腺苷(ATP)结合盒转运体A1(ABCA1)、ATP结合盒转运体G1(ABCG1)及甘露糖受体(CD206)表达情况。结果:从药效上看,与正常组比较,模型组主动脉出现斑块、大量泡沫细胞与胆固醇晶体等病理变化,血清TC、LDL-C、IL-1β、IL-18水平均显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著下降(P<0.01),主动脉组织CD206水平显著下降(P<0.01);与模型组比较,各给药组均能改善主动脉上的脂质沉积状况,并且除枳实薤白桂枝汤高剂量组外,各给药组均能显著降低TC、LDL-C水平(P<0.01),炎症方面,除枳实薤白桂枝汤中剂量组外,各给药组的IL-1β、IL-18水平均明显降低(P<0.05),此外,枳实薤白桂枝汤可上调CD206水平,且枳实薤白桂枝汤中、高剂量组差异明显(P<0.05)。从作用机制上看,与正常组比较,模型组的主动脉TRPA1、ABCA1、ABCG1表达水平均明显降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组均明显提高了主动脉TRPA1表达量(P<0.05),可提高ABCA1、ABCG1的表达量,其中枳实薤白桂枝汤中、高剂量组和辛伐他汀组差异明显(P<0.05),免疫组化结果的趋势与其基本一致。结论:枳实薤白桂枝汤可有效降低血脂与炎症水平,抑制主动脉斑块的形成,其作用机制可能是通过TRPA1引发下游的ABCA1、ABCG1表达升高,促进泡沫细胞中胆固醇流出,从而调控胆固醇代谢并在一定程度上干预炎症水平,最终达到治疗AS的作用。

枳实薤白桂枝汤现代药理作用研究进展

枳实薤白桂枝汤是体现温阳法治疗胸痹的经典方剂,收录于国家中医药管理局颁布的古代经典名方目录(第一批),具有通阳散结,行气化痰的功效,主治症状包括胸满而痛,甚或胸痛彻背,喘息咳唾,短气,气从胁下冲逆等。现代中医临床将其用于心血管系统、消化系统和呼吸系统等多种疾病的治疗,其中对冠心病、不稳定性心绞痛、心肌梗死、窦性心动过缓等心血管疾病的疗效尤为显著。笔者主要对近10年来关于枳实薤白桂枝汤的药理学研究进行梳理和评述,结果显示,该方各单味药与整方均对上述心血管疾病有一定改善作用,药理作用涉及改善血管内环境、改善心肌缺血、改善心肌缺血再灌注损伤、改善心肌缺氧、抗炎、稳定斑块等方面;其作用机制涉及调节体内相关活性物质、调节相关信号通路与离子通道等,具体主要包括血清血栓烷素B2(TXB2)、血清前列环素I2(PGI2)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)信号途径、三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾通道等。此外,部分单味药的药理作用与瞬时受体电位通道锚蛋白1(TRPA1)的关系已有报道,其中TRPA1是认识该方作用机制与治疗心血管疾病的关键之一,值得深入。

基于TNF/NF-κB信号通路探讨枳实薤白桂枝汤减轻心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制

目的:从肿瘤坏死因子/核转录因子-κB(TNF/NF-κB)信号通路探讨枳实薤白桂枝汤(ZXGT)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌梗死(MI)的影响。方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、培哚普利组(4 mg·kg^(-1))、ZXGT组(24.4 g·kg^(-1))、ZXGT+抑制剂组(ZXGT,24.4 g·kg^(-1);TNF-α受体抑制剂R7050,5 mg·kg^(-1))、抑制剂组(R7050,5 mg·kg^(-1)),每组8只;各组大鼠预防性灌胃给药7 d,且ZXGT+抑制剂组、抑制剂组在第6、第7天给予腹腔注射抑制剂R70505 mg·kg^(-1),除空白组外其余各组腹腔注射ISO,连续2 d,诱导大鼠MI模型;于实验第7天注射ISO 30 min后麻醉大鼠,检测心电图(ECG)观察ST段抬高值;采用小动物超声心动图检测大鼠心脏整体轴向应变(GLS)和心脏同步性;腹主动脉取血测定血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平及炎症因子TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理变化;免疫组化(IHC)法检测心脏组织TNF-α、NF-κB p65、磷酸化(p)-NF-κB p65蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心脏组织肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、转化生长因子激酶1(TAK1)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、p-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠ECG ST段显著抬高(P<0.01),超声心动图中GLS增大及同步性显著降低(P<0.01),病理组织学显示心肌大面积坏死,血清cTnT、CK-MB、LDH、TNF-α、IL-1β水平显著升高(P<0.01),心肌组织中的TNF-α、TNFR1、TRAF2、TAK1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平显著升高(P<0.01),IκBα蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组大鼠的ECG ST段抬高值明显降低(P<0.05,P<0.01),GLS和心脏同步性改善(P<0.05,P<0.01),心肌坏死面积减小,血清cTnT、CK-MB、LDH、TNF-α、IL-1β水平均下调(P<0.01),且ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组均下调模型大鼠升高的TNF-α、TNFR1、TRAF2、TAK1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平和上调IκBα的表达水平(P<0.05,P<0.01);与ZXGT组比较,ZXGT+抑制剂组和抑制剂组差异无统计学意义。结论:ZXGT能保护ISO诱导的大鼠MI损伤,改善心脏功能,其作用机制可能与调控TNF/NF-κB信号通路有关。

基于枳实薤白桂枝汤阐释“胃络通心”理论及其潜在分子作用机制

中医理论内涵的科学阐释是中医学自身发展的重要内容,将中医经典理论与现代科学技术有机结合是有效途径之一。在系统梳理中医"胃络通心"理论的基础上,笔者选择经典名方枳实薤白桂枝汤为例,借助中医药整合药理学研究平台V2.0(TCMIP V2.0)的分子挖掘技术,分析枳实薤白桂枝汤防治胃心痛的作用机制,得到了枳实薤白桂枝汤的220种化学成分,涉及674个靶标,其中直接作用于心绞痛和胃食管反流病的核心靶标有12个,包括胰岛素(INS),甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH),丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1),肿瘤蛋白p53(TP53),白蛋白(Alb),丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3),白细胞介素-6(IL-6),90 kDa热休克蛋白αA1(HSP90AA1),cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1),雌激素受体1(ESR1),肿瘤坏死因子(TNF),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),涉及相关疾病的TNF信号通路,磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路,IL-17信号通路,低氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路等125条通路,这些均是"胃络通心"理论的生物学基础。中医经典理论的梳理结合代表方药的分子机制挖掘,可为中医理论的科学内涵研究提供示范和借鉴。