基于网络药理学和分子对接探究壮骨止痛方治疗绝经后骨质疏松症的作用机制

目的:探究壮骨止痛方治疗绝经后骨质疏松症的潜在作用靶点与机制。方法:利用STRING数据库建立基于BATMAN-TCM数据库筛选出的药物作用靶点与GeneCards、TTD和OMIM数据库中PMOP疾病靶点交集的PPI网络,并借助Cytoscape软件,将该网络可视化处理,得到“药物-活性成分-靶点-疾病”网络,同时,分子对接验证核心活性成分与关键靶点间的结合能力。实验建立绝经后骨质疏松的动物模型,采用mirco-CT和HE染色技术研究壮骨止痛方对绝经后骨质疏松症的治疗作用,并通过RT-PCR技术评估关键靶点mRNA的表达情况。结果:获得壮骨止痛方活性成分与疾病共同靶点69个。其中关键靶点为PPARG、PTGS2、ESR1等。药物-活性成分-靶点-疾病网络揭示核心活性成分为豆甾醇、异补骨脂素、熊果酸、齐墩果酸等。分子对接结果显示两者有较强结合能力。GO功能分析得到主要生物功能为对激素的反应等。KEGG富集主要相关通路为癌症的发病途径、雌激素信号通路等。CT扫描、HE染色可得壮骨止痛方能有效缓解绝经后骨质疏松症,RT-PCR显示壮骨止痛方组PTGS2mRNA表达显著升高,PPARG表达明显降低(P<0.05)。结论:壮骨止痛方通过多成分、多靶点、多通路治疗PMOP,其成分主要为豆甾醇、异补骨脂素、熊果酸、齐墩果酸,并通过代谢途径、雌激素信号通路等作用于人体INS、AKT1、PPARG、PTGS2、ESR1发挥疗效。

中频电联合中药导入治疗非小细胞肺癌椎骨转移所致疼痛临床研究

目的:观察中频电联合中药导入治疗非小细胞肺癌(NSCLC)椎骨转移所致疼痛的临床疗效及安全性,并探索其治疗机制。方法:选取70例NSCLC椎骨转移疼痛患者,按照随机数字表法分为对照组与观察组各35例,对照组仅采用基础治疗,观察组在基础治疗同时给予中频电联合补肾壮骨止痛方导入治疗。6 d为1个疗程,连续治疗2个疗程。分别在治疗前、治疗后6 d、治疗后12 d对两组患者数字评定量表(NRS)评分、卡氏功能状态(KPS)评分、吗啡使用总剂量、血清钙(Ca)、骨唾液酸蛋白(BSP)、碱性磷酸酶(ALP)进行监测评估,同时记录不良事件发生情况。结果:治疗后6 d、治疗后12 d观察组NRS评分、KPS评分均较治疗前明显改善,且观察组改善优于对照组(P<0.05)。观察组治疗后6 d、治疗后12 d吗啡使用总剂量均较治疗前明显减少,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后6 d、治疗后12 d两组患者Ca水平均较治疗前降低,且同时期观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后6 d、治疗后12 d两组BSP、ALP水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组稳效率81.25%,观察组稳效率93.75%,观察组临床疗效优于对照组(P<0.05)。两组不良事件发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中频电联合中药导入可提高NSCLC椎骨转移所致疼痛患者的临床疗效,改善患者生活状态,减少吗啡使用量,纠正骨代谢相关化验指标异常,不良反应小,安全性高。

从蛋白质组学探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松症的作用机理

目的:用蛋白质组学的方法研究壮骨止痛方治疗骨质疏松的作用机理。方法:建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,分为壮骨止痛方组、模型组、假手术组,13周后骨质疏松症模型成功,提取股骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组股骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,分析各组间差异蛋白质点,MAlDI-TOF-MS质谱分析,结合蛋白质生物信息库(Marx science Ltd database),对各蛋白质初步鉴定。结论:鉴定了2个差异蛋白,分别P1为膜联蛋白A1,P2为蛋白质二硫键异构酶A3,初步认为这两种蛋白质在壮骨止痛方治疗该病过程中发挥着重要调控作用。

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路的影响

目的探讨壮骨止痛方对骨质疏松雌鼠Wnt/β-链蛋白(Wnt/β-catenin)、核因子κB受体活化因子配体/核因子κB受体活化因子/骨保护蛋白(RANKL/RANK/OPG)信号通路的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量组、壮骨止痛方低剂量组、雌二醇组,用酶联免疫法测定大鼠血清中β-catenin、OPG、RANKL的水平。结果模型组大鼠血清β-catenin明显降低,RANKL/OPG比值升高,经壮骨止痛方药物干预后,β-catenin水平明显升高,RANKL/OPG比值明显下降。结论壮骨止痛方可能通过提升大鼠血清β-catenin的含量,降低RANKL/OPG的比值,从而激活Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路,起到防治骨质疏松的作用。

从蛋白质组学研究壮骨止痛方治疗骨质疏松症作用机理

目的:用蛋白质组学的方法研究壮骨止痛方治疗骨质疏松的作用机理。方法:建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,分为壮骨止痛方组、模型组、假手术组,13周后骨质疏松症模型成功,提取股骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组股骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,分析各组间差异蛋白质点,MAlDI-TOF-MS质谱分析,结合蛋白质生物信息库(Marx science Ltd database),对各蛋白质初步鉴定。结果:鉴定了2个差异蛋白,分别X1为糖原磷酸化酶,X2为线粒体ATP合酶β基。结论:在壮骨止痛方治疗骨质疏松的过程中,X1、X2这两种蛋白发挥着重要的分子调控作用。

壮骨止痛解郁方对RAD模型大鼠行为学及FKN/CX3CR1信号通路的影响

目的:探讨壮骨止痛解郁方对类风湿性关节炎伴发抑郁症(RAD)模型大鼠行为学和趋化因子Fractalkine(FKN)及其受体CX3CR1的影响。方法:40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和中药组,除空白组外,其余各组采用Ⅱ型胶原蛋白-弗氏完全佐剂和慢性不可预知的应激加孤养建立RAD模型,应激造模的同时,西药组灌胃甲氨蝶呤和氟西汀,中药组灌胃壮骨止痛解郁方,模型组灌胃蒸馏水。给药28 d后,采用糖水偏好和旷场实验评价各组大鼠的行为学情况,ELISA法检测血清中TNF-α、FKN含量,免疫组化法观察脑内CX3CR1的阳性表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠糖水偏好率和自主活动得分降低(P<0.01),血清TNF-α、FKN含量增加(P<0.01),脑内海马区域CX3CR1免疫阳性表达升高(P<0.01);与模型组比较,中药组大鼠糖水偏好率和自主活动得分升高(P<0.01),血清TNF-α、FKN含量减少(P<0.01),脑内CX3CR1免疫阳性表达降低(P<0.01)。结论:壮骨止痛解郁方能明显改善RAD模型大鼠的快感缺失和自主活动行为,其机制可能与调节FKN/CX3CR1信号通路的作用密切相关。