朱砂安神片质量标准研究

目的建立朱砂安神片的质量标准。方法参考《中华人民共和国卫生部药品标准:中药成方制剂》,对10批样品进行性状鉴别;对样品粉末进行显微鉴别;采用薄层色谱法对样品中的黄连药材进行定性鉴别;采用滴定法对硫化汞进行含量测定;以盐酸小檗碱为参照峰,建立10批样品的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,确定共有峰,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)评价其相似度;采用HPLC法测定样品中盐酸小檗碱的含量,色谱柱为Welch ultimate XB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(1∶1,V/V,每1 mL混合液中含十二烷基硫酸钠4 mg)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为345 nm,柱温为30℃,进样量为10µL。结果10批样品均为红棕色,气微香,味苦。样品粉末纤维束呈鲜黄色,壁稍厚,纹孔明显;不规则细小颗粒呈暗红棕色,有光泽,边缘黑色;纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶,形成晶纤维。薄层色谱特征斑点清晰,分离度较好,且阴性对照无干扰。样品中硫化汞平均含量为22.78%。共确定9个共有峰,且相似度均不低于0.898。盐酸小檗碱质量浓度在0.00859~0.859 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=1.000,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均回收率为99.96%,RSD为1.29(n=6)。结论所建立的方法稳定、结果准确、专属性与重复性较好,可用于朱砂安神片的质量控制。

加味安神定志丸联合黄连阿胶汤治疗围绝经期失眠症的效果观察

目的:分析加味安神定志丸联合黄连阿胶汤治疗围绝经期失眠症的效果。方法:选取2019年3月—2022年6月北京市朝阳区管庄第二社区卫生服务中心收治的80例围绝经期失眠症患者作为研究对象,以随机数字表法分为参照组和试验组。参照组采用加味安神定志丸治疗,试验组在参照组基础上应用黄连阿胶汤治疗。比较两组治疗效果。结果:治疗前,两组Kupperman评分及匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,试验组Kupperman评分及PSQI评分均低于参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组治疗总有效率高于参照组,差异有统计学意义(P=0.035)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:加味安神定志丸联合黄连阿胶汤治疗围绝经期失眠症的效果显著,可改善患者临床症状及睡眠质量,且不良反应少,安全性高。

朱砂安神丸高效液相色谱数字化指纹图谱研究

目的建立朱砂安神丸（Zhusha Anshen Wan,ZSASW）HPLC数字化指纹图谱,作为其整体质量控制的一个判据标准。方法采用反相HPLC法,使用Century SIL C18BDS柱（200 mm×4.6 mm,5μm）,以0.2%H3PO4溶液（A）-0.1%H3PO4乙腈溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（010 min,0→15%B;1030 min,15%→30%B;3050 min,30%→70%B;5060 min,70%→85%B）,流速1.0 mL.min-1,检测波长203 nm,柱温（30±0.15）℃,进样量5μL。以色谱指纹图分离量指数（chromatographic fingerprint resolution index,RF）为目标函数优化试验条件,用＂中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0＂软件进行数字化评价。结果以盐酸小檗碱（berberine hydrochloride,BBR）为参照物峰,确定57个共有指纹峰,获得判别其质量的重要数字化信息,以系统指纹定量法鉴别出S1、S2、S3、S4、S9和S12质量极好,S5、S6和S10质量很好,S11质量好,S7和S8质量为劣。结论所建立的ZSASW-HPLC数字化指纹图谱可清晰反映ZSASW的局部和整体指纹的质量变异,用数字化指纹图谱控制中药质量准确可行。

朱砂和朱砂安神丸对小鼠肝组织金属硫蛋白表达的影响

目的探讨朱砂及朱砂安神丸中汞对肝组织金属硫蛋白(MT)表达的影响。方法健康小鼠分别ig给予生理盐水、Hg S 0.2 g·kg-1、朱砂0.2和2 g·kg-1、朱砂安神丸1.8 g·kg-1、氯化汞(Hg Cl2)0.032 g·kg-1、甲基汞0.026 g·kg-1,每天1次,连续30 d,取肝组织。用原子荧光光谱法检测肝汞蓄积量,HE染色法观察肝组织病理变化,实时荧光定量PCR法检测肝组织Mt-1基因的表达,免疫组织化学和Western蛋白印迹法检测肝组织MT蛋白的表达,并分析肝汞蓄积量与肝组织Mt-1基因和MT蛋白表达的相关性。结果与正常对照组比较,Hg S、朱砂0.2 g·kg-1和朱砂安神丸组小鼠肝组织汞蓄积量未见明显增高,肝组织Mt-1基因和MT蛋白表达无明显变化,且未见明显病理改变。朱砂2 g·kg-1,Hg Cl2和甲基汞组小鼠肝汞蓄积量明显增高(P<0.05,P<0.01),分别为正常对照组的6.9,82.2和173.1倍;肝组织Mt-1mRNA表达明显增加(P<0.01),分别为正常对照组的3,11和45倍,同时MT蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01);肝组织可见肝细胞水肿,淋巴细胞浸润。肝汞蓄积量与Mt-1基因和MT蛋白表达水平具有正相关性。结论对比不同形式的汞,ig给予小鼠Hg S、朱砂和朱砂安神丸后肝组织汞蓄积量远低于氯化汞和甲基汞;朱砂0.2 g·kg-1和朱砂安神丸未导致肝组织Mt-1基因和MT蛋白表达水平的变化,肝组织亦未出现病理变化。

朱砂及其复方对小鼠肝脏细胞色素P450酶基因表达的影响

目的研究朱砂及其复方朱砂安神丸对小鼠肝脏的急性毒性,并在此基础上探讨其对肝脏细胞色素P450酶基因表达的影响。方法小鼠随机分为空白对照组,朱砂安神丸高剂量组(20 g·kg-1ig)、朱砂安神丸低剂量组(10 g·kg-1ig)和朱砂组(0.3 g·kg-1ig),各组小鼠均早晨给药1次,8 h后断头处死小鼠,分别检测肝中汞蓄积量,肝功能,肝指数,并应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)的方法检测其对细胞色素P450酶基因表达的影响。结果与空白对照组相比,朱砂和朱砂安神丸组小鼠肝脏ALT和AST均有所增高,但差异无统计学意义;给药三组小鼠肝脏中汞蓄积量均有所增高,并呈现一定的剂量相关性,但无统计学意义;在对基因表达的影响方面,单次给药后,与空白对照组相比,朱砂组Cyp2 a4、Cyp2b9、Cyp 2 f2、Cyp8b的基因表达下降,Cyp3 a11和Cyp3 a44的基因表达增高:朱砂安神丸低剂量组Cyp2b9和Cyp2 f2的基因表达下降;各组对其他基因的表达情况无统计学意义。结论单次给药后,汞在小鼠肝脏中蓄积很少,对肝脏未造成明显损伤,但朱砂和朱砂安神丸对细胞色素P450酶的基因表达具有一定的诱导和抑制作用。

朱砂安神丸毛细管电泳指纹图谱研究

目的建立朱砂安神丸(ZSASW)毛细管电泳指纹图谱(capillary electrophoresis fingerprint,CEFP),以系统指纹定量法鉴定其质量,并针对ZSASW-HPCE对照指纹图谱进行不确定度和可靠度评价。方法采用未涂层毛细管(75 cm×75μm,有效长度62 cm),以50 mmol.L-1硼砂-150 mmol.L-1磷酸二氢钠-50 mmol.L-1磷酸氢二钠(体积比为4∶1∶1,pH9.0)为背景电解质(BGE),运行电压12 kV,紫外检测波长203 nm,重力进样20 s。通过对12批样品聚类分析确定用其中9批生成对照CEFP(RCEFP),计算其不确定度和可靠度。以此RCEFP为标准鉴别12批样品质量。结果以小檗碱(BBR)为参照物峰,确定21个共有峰,用系统指纹定量法鉴别出S1、S2、S6、S10和S11质量很好,S5和S9质量好,S12质量良好,S3质量中等,S4、S7和S8质量劣。RCEFP的宏定性宏定量可靠度均>0.96。结论所建立的CEFP稳定可靠,可为ZSASW质量控制提供新参考。

安神定志丸安神作用研究

目的:探讨安神定志丸的安神作用。方法:测定药物对小鼠自发活动和睡眠时间的影响。结果:安神定志丸能显著减少小鼠自发活动次数,明显延长戊巴比妥钠致小鼠的睡眠时间。结论:安神定志丸具有较强的镇静安神作用。

朱砂安神丸水煎剂对失眠大鼠睡眠时相的影响

目的探讨朱砂安神丸水煎剂对失眠大鼠睡眠时相的影响。方法在恒温、恒湿、自动光控及电磁屏蔽条件下,采用电刺激所致大鼠失眠模型和慢性电极埋植技术,描记其自由活动情况下皮层脑电图。给予实验动物不同剂量的朱砂安神丸水煎剂,分析给药前后失眠大鼠脑电图的变化,探讨朱砂安神丸水煎剂对失眠大鼠睡眠时相的影响。结果中、高剂量的朱砂安神丸水煎剂可明显减少失眠大鼠的觉醒耐间,延长失眠大鼠总睡眠时间。并且中剂量对失眠大鼠睡眠周期中的慢波睡眠1期(SWS_1期),高剂量对慢波睡眠2期(SWS_2期)有明显的延长作用。低剂量虽不能减少失眠大鼠的觉醒时间,但对SWS_2期有延长作用。结论朱砂安神丸水煎剂对失眠大鼠的睡眠有明显改善作用。

安神益脑丸的质量标准研究

建立了安神益脑丸的质量标准。运用薄层色谱法定性鉴别安神益脑丸中的当归、何首乌、女贞子、墨旱莲。用高效液相色谱法定量测定安神益脑丸中二苯乙烯苷的含量。结果表明二苯乙烯苷在 0 .6～ 3μg线性关系良好 ,r=0 .9999。所建立的方法准确、可靠 。

朱砂安神丸定量指纹图谱可靠度研究

目的建立中药指纹谱不确定度和可靠度评价方法并应用于朱砂安神丸(朱砂、黄连、地黄、当归和甘草)HPLC指纹谱评价。方法采用RP-HPLC法,建立了指纹图谱并用系统指纹定量法综合评价12批样品的不确定度和可靠度。结果确定55个共有峰,朱砂安神丸的宏定性宏定量可靠度均大于0.97,其余10批样品的宏定性宏定量可靠度均大于0.96。结论所建立不确定度和可靠度评价方法能准确反映朱砂安神丸指纹谱变动性以及定性和定量信息的可靠程度。

中西医结合治疗抑郁症伴心脏神经症临床研究

目的:观察中西医结合治疗抑郁症伴有心脏神经症患者的临床疗效。方法:60例抑郁症患者随机分为中药加帕罗西汀组和帕罗西汀组治疗,观察6个月,观察治疗6个月前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD)减分率及有效率。结果:中药加帕罗西汀组HAMD减分的幅度明显较帕罗西汀组大,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中西医结合治疗抑郁症伴心脏神经症疗效较好。

色谱系统显著变动对定量指纹图谱评价中成药质量的影响

目的考察在色谱系统显著变动条件下用系统指纹定量法（SQFM）对中成药进行评价产生的误差,并进行t检验。方法在理论上阐述SQFM 3个指标Sm、Pm和α间的关联性,在洗脱程序EP1条件下用HPLC测定12批朱砂安神丸（ZSASPs）在228、286和326 nm指纹图谱,分别以均值法整合三波长下定量指纹图谱的鉴定结果;11个月后在显著变动的洗脱程序EP2条件下同法试验和评价指纹图谱。对2次获得指纹图谱群的评价结果进行误差对比和t检验,并讨论质量鉴定等级和宏定量相似度变化。结果以小檗碱为参照物峰,EP1确定53（228 nm）、50（286 nm）和52（326 nm）个共有指纹峰,EP2确定50（228 nm）、40（286 nm）和35（326 nm）个共有指纹峰。经SQFM评价后的三波长指纹图谱结果按照均值法整合后对S4、S6~S8、S10~S12等7批样品鉴定结果一致,对余下5批样品鉴定结果波动仅1级,排除S7和S8,EP2下各样品的定性相似度平均降低0.03,定量相似度误差基本在±5%之内,对2次获得鉴定结果进行T检验证明无显著性差异。对EP1和EP2三波长HPLC-FPs鉴定数据取平均,最终鉴定S1~S4和S9质量极好（1级）,S5、S6、S10和S12质量很好（2级）,S11质量好（3级）,S7和S8质量劣（8级）。结论在有效期内SQFM对同一总体样品以定量指纹图谱进行评价时,色谱条件的显著变化不影响鉴定结果,SQFM对中成药进行质量评判时具有包容性和耐用性。

朱砂安神丸治疗血液透析睡眠障碍患者临床观察

目的:观察朱砂安神丸治疗维持性血液透析(MHD)患者睡眠障碍临床疗效。方法:将纳入病例的40例MHD睡眠障碍患者按自评睡眠障碍量表分级分为轻度失眠组和中重度失眠组,均予以朱砂安神丸治疗,疗程均为15 d。对两组治疗前后临床症状评分进行比较。结果:轻度失眠组治疗后临床症状评分方面明显优于中重度失眠组(P<0.01)。结论:朱砂安神丸能明显改善轻度失眠MHD患者的临床症状,对中重度失眠MHD患者效果欠佳。

安肾丸质量标准研究

目的:为了更好地控制安肾丸质量,建立了新的安肾丸质量标准。方法:采用HPLC测定安肾丸中苦杏仁苷的含量。采用TLC对制剂中的肉苁蓉、补骨脂、白术分别进行定性鉴别。结果:苦杏仁苷在10.25～512.5μg线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.91%,RSD=0.48%。TLC可以鉴别出肉苁蓉、补骨脂、白术的特征斑点。结论:实验方法专属性强、重复性好、准确、简便,可有效地控制安肾丸的质量。

基于柱效指数监测的双波长定量比率指纹图谱评价朱砂安神丸

目的建立色谱指纹图谱柱效指数模型,用以检测定量指纹图谱的变化。方法用高效液相色谱二极管阵列检测器同时测定12批朱砂安神丸(ZSASP)在203 nm和286 nm指纹谱(NFP)和比率指纹图谱(ROFP),分别以均值法整合同波长下指纹图谱,最后进行双波长指纹图谱的二次均值整合,计算双波长指纹图谱柱效指数并进行比较。结果以小檗碱(BBR)为参照物峰,确定57(203 nm)和50(286 nm)个共有指纹峰,建立了双波长ZSASP-HPLC指纹图谱和比率指纹图谱。首先将同波长下的NFP和ROFP进行均值整合,之后进行双波长二次均值整合鉴定出S1、S4、S5、S6、S9和S10质量极好(1级),S2、S3、S11和S12质量很好(2级),S7和S8质量次(7级)。在203 nm,S4、S5、S6、S9柱效指数较高,而在286 nm下四者柱效指数较低造成两者差值很大,S8呈现上述反变化过程造成较大差异值。结论色谱指纹图谱柱效指数能监测中药定量指纹图谱的柱效关联分离度后的变化情况,因此柱效指数标志着信号均化性和分离度均化性以及峰宽变动情况。

安神补心六味丸中原儿茶酸的含量测定

目的建立安神补心六味丸中原儿茶酸含量的测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱：Kromasil菲罗门C18;流动相：甲醇-0.1%冰乙酸（10∶90）;检测波长：260nm;柱温：25℃;流速：1.0mL.min^-1。结果原儿茶酸在2.26-11.30μg.mL^-1范围内线性关系良好,r=0.9998,平均回收率为99.26%,RSD=1.29%。结论该方法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制。

HPLC法测定安肾丸中苦杏仁苷含量

目的为了更好地控制安肾丸质量,对安肾丸中苦杏仁苷的含量进行测定。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定安肾丸中苦杏仁苷的含量。结果苦杏仁苷在10.25～512.5μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.91%,RSD=0.48%。结论实验方法专属性强、重复性好,准确简便,可有效地控制安肾丸的质量。

朱砂安神丸拮抗大鼠条件性恐惧及其睡眠障碍的作用

目的探究朱砂安神丸拮抗大鼠条件性恐惧及其睡眠障碍的作用。方法通过条件性恐惧实验监测系统观察各组实验动物的僵直反应时间,考察朱砂安神丸对条件性恐惧记忆习得、条件性恐惧记忆消退,以及在此过程中觉醒-睡眠时间及睡眠时相变化的影响。结果条件性恐惧记忆习得测试结果显示,在第1~5个周期,模型组僵直反应时间比空白组明显增加(P<0.01),给药组僵直反应时间较模型组无明显差异;脑电描记结果显示,在第1~2个周期,与模型组相比,给药组Wake时间缩短,百分比降低(P<0.05);第1~3个周期睡眠总时间延长,百分比增加(P<0.05);REMS时间延长(P<0.05);NREM时间差异无统计学意义;REMS与NREM的睡眠时间百分比无明显变化。条件性恐惧记忆消退测试结果显示,与模型组相比,给药组在第4、5天僵直反应时间减少(P<0.05);脑电描记结果显示,与模型组相比,给药组在第4、5天Wake时间缩短,百分比降低(P<0.05);睡眠总时间延长,百分比增加(P<0.05);NREM时间增加(P<0.05)。第4天REM时间增加(P<0.05);REMS与NREM的睡眠时间百分比无明显变化。结论朱砂安神丸能够促进条件性恐惧消退,并能拮抗由条件性恐惧引起的睡眠障碍。

朱砂安神丸对条件性恐惧大鼠海马突触可塑性的影响

目的探讨朱砂安神丸对条件性恐惧大鼠恐惧记忆的影响及作用机制。方法将90只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、给药组,每组30只;给药组大鼠灌胃给予朱砂安神丸混悬液(给药体积为每100 g大鼠体质量0.9 m L),空白组、模型组大鼠给予等量的双蒸水,各组大鼠均连续干预7 d。末次给药后复制条件性恐惧模型。通过条件性恐惧实验监测系统观察各组大鼠的僵直反应时间,考察朱砂安神丸对恐惧记忆的影响;通过电生理实验和透射电镜技术,考察朱砂安神丸对海马功能结构可塑性的影响。结果与模型组比较,给药组(朱砂安神丸)能有效促进条件性恐惧大鼠恐惧记忆消退,恐惧记忆习得阶段及消退阶段僵直反应时间明显减少,运动时间、运动距离明显增加,诱发海马部位LTP其PS幅值明显减少(P<0.05,P<0.01);海马神经元突触数目较多,突触各部分结构完好、界限清晰,海马突触活性区长度及PSD厚度明显增大,突触间隙宽度明显减小(P<0.05,P<0.01);海马神经元细胞各结构完整清晰,细胞核大,细胞浆内细胞器较多、形态较好。结论朱砂安神丸具有促进恐惧记忆消退的作用,其作用机制与保护海马神经元、调节海马突触结构和功能可塑性有关。

朱砂安神汤加减联合艾司唑仑片治疗原发性失眠的临床疗效及对相关实验室指标的影响

目的观察朱砂安神汤加减联合艾司唑仑片治疗原发性失眠的临床疗效及对相关实验室指标的影响。方法将158例原发性失眠患者按照随机数字表法分为2组,对照组79例予艾司唑仑片治疗,治疗组79例在对照组治疗基础上加用朱砂安神汤加减治疗,2组均治疗4周。比较2组疗效;比较2组治疗前后血清脑源性神经营养因子(BDNF)、γ-氨基丁酸(GABA)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)水平变化;比较2组治疗前后匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分及中医证候评分变化。结果治疗组总有效率94.94%(75/79),对照组总有效率82.28%(65/79),治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。2组治疗后BDNF、GABA及5-HT水平均较本组治疗前升高(P<0.05),DA水平较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组治疗后BDNF、GABA及5-HT水平均高于对照组(P<0.05),DA水平低于对照组(P<0.05)。2组治疗后PSQI各项评分及总评分均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组降低更明显(P<0.05)。2组治疗后中医证候各项评分及总评分均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组降低更明显(P<0.05)。结论朱砂安神汤加减联合艾司唑仑片治疗原发性失眠,可提高临床效果,其作用机制可能与改善BDNF、GABA、5-HT、DA水平有关。