Effect of Zibu Shenjing Fang(滋补肾精方) on Growth and Development of the Mouse with Kidney-essence Insufficiency and Study on the Mechanism

Objective:To investigate effects of Zibu Shenjing Fang(滋补肾精方) on growth and development of the mouse with insufficiency of kidney-essence and the mechanism.Methods:Total 50 mice were randomly divided into a normal group,a model group,a Jingui Shenqi Wan(金匮肾气丸) group,a Zibu Shenjing Fang high dose group and a Zibu Shenjing Fang low dose group,10 mice in each group.The kidney-essence insufficiency mouse model was established by use of threat-injuring the kidney combined with over-fatigue.At the same time of modeling,the mice in the model group were intragastrically administrated with saline 20 mL·kg-1·d-1,in the Jingui Shenqi Wan group with suspension of the Jingui Shenqi Wan 2.7 g·kg-1·d-1,in the Zibu Shenjing Fang high dose group with Zibu Shenjing Fang 20 g·kg-1·d-1 and in the Zibu Shenjing Fang low dose group with Zibu Shenjing Fang 10 g·kg-1·d-1,for 21 consecutive days.The general state was observed,the body weight was weighted,and serum growth hormone(GH) and insulin-like growth factor-1(IGF-1) contents were detected.Results:Compared with model group,Zibu Shenjing Fang groups and Jingui Shenqi Wan group could improve manifestation of the mouse with kidney-essence insufficiency,increase body weight of the mouse and serum GH and IGF-1 contents,especially in the high dose group.Conclusion:Zibu Shenjing Fang gives play to the function of tonifying the kidney and replenishing essence through regulating GH and IGF-1 levels,so as to influence growth and development of the mouse.

滋补肾精方对肾精不足证治疗机制的实验研究

目的观察滋补肾精方对肾精不足证的治疗作用并探讨补肾填精的机理。方法将50只小鼠随机分为正常组、模型组、金匮肾气丸组以及滋补肾精方高剂量组、低剂量组。用恐伤肾联合劳倦过度建造肾精不足证动物模型。造模同时,金匮肾气丸组灌胃金匮肾气丸混悬液2.7 g/(kg.d),滋补肾精方高、低剂量组分别以滋补肾精方20、10 g/(kg.d)灌胃,连续21 d。观察小鼠一般状况,体质量、胸腺、脾脏指数及血清总抗氧化力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果滋补肾精方能够改善小鼠肾精不足证表现,增加小鼠体质量,升高胸腺、脾脏指数,调节血清T-AOC、GSH-Px、LDH活性。结论滋补肾精方通过调节肾精不足证小鼠的体质量、胸腺和脾脏指数以及抗氧化能力发挥补肾填精作用。

滋补肾精方对肾精亏虚证小鼠IGF-1、IGFBP-3影响研究

目的:观察滋补肾精方对肾精亏虚证小鼠IGF-1、IGFBP-3表达影响,并探讨其补肾填精作用机理。方法 :将50只小鼠随机分为正常组、模型组、金匮肾气丸组以及滋补肾精方高、低剂量组。除正常组外,其余4组造模同时模型组灌胃生理盐水(0.02 mL.g-1)、金匮肾气丸组灌胃金匮肾气丸混悬液(2.7 g.kg-1.d-1),滋补肾精方高、低剂量组分别灌胃滋补肾精方(20、10 g.kg-1.d-1),连续21 d。观察小鼠一般情况,称量小鼠体重,实验结束测定肝组织胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)含量。结果 :滋补肾精方能够改善小鼠肾精亏虚症状,提高小鼠体质量、肝组织IGF-1和血清IGFBP-3水平。结论 :滋补肾精方可能通过调节机体IGF-1、IGFBP-3,发挥对肾精亏虚证的治疗作用。

滋补肾精方对肾精不足证小鼠Leptin、Ob-R和NPY表达的影响

目的:观察滋补肾精方对肾精不足证小鼠瘦素(Leptin)及瘦素受体(Ob-R)和神经肽Y(NPY)水平的影响,并探讨脾肾相互影响机制。方法:将50只小鼠随机分为正常组、模型组、金匮肾气丸组及滋补肾精方高、低剂量组。造模同时,模型组灌胃0.9%氯化钠溶液(0.02mL/g)、金匮肾气丸组灌胃金匮肾气丸混悬液(2.7g.kg-1.d-1)、滋补肾精方高、低剂量组分别以滋补肾精方(20g.kg-1.d-1、10g.kg-1.d-1)灌胃,连续21d。观察小鼠一般状况,血清Leptin、脑组织Ob-R和NPY表达水平。结果:滋补肾精方能够改善小鼠肾精不足证表现。与模型组比较,滋补肾精方高、低剂量组可明显降低Leptin及Ob-R活性,升高NPY活性(P<0.05,P<0.01)。结论:滋补肾精方可能通过调节Leptin及Ob-R与NPY水平的途径发挥补肾填精作用,脾肾相互影响是通过Leptin-Ob-R-NPY轴实现的。

滋补脾阴方药对糖尿病认知功能障碍大鼠海马乳酸及乳酸化修饰的影响

目的:探讨滋补脾阴方药对糖尿病认知功能障碍(DACD)大鼠学习记忆能力及海马中糖酵解产物乳酸及乳酸化修饰(Kla)的影响。方法:18只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、滋补脾阴方药34.6 g/kg组,每组6只。除正常对照组外,其余大鼠以高脂喂养联合链脲佐菌素(STZ)建立DACD模型,大鼠灌胃给予相应药物。行为学实验分析大鼠学习记忆能力;全自动生化分析仪测定血脂含量;ELISA法测定海马中β-淀粉样多肽(Aβ)1-40、Aβ_(1-42)含量;比色法测定海马乳酸含量;Western blot法测定海马糖酵解过程中的关键酶己糖激酶2(HK2)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、丙酮酸脱氢酶Α(PDHA1)、组蛋白赖氨酸乳酸酰化(Kla)的蛋白表达;通过免疫荧光分析大鼠海马Kla的水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组的大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、逃避潜伏期明显增加(P<0.05或P<0.01),血清TG和LDL-c明显升高(P<0.05或P<0.01),海马Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量显著升高(P<0.01);跨越平台次数显著减少(P<0.01),HDL-c含量明显降低(P<0.05),海马HK2、PKM2、LDHA、PDHA1、Kla蛋白表达显著下调(P<0.01),乳酸含量明显降低(P<0.05);与模型对照组比较,滋补脾阴方药34.6 g/kg组能够显著增加大鼠跨越平台次数(P<0.01),明显升高血清HDL-c含量(P<0.05),上调海马HK2、PKM2、LDHA、PDHA1、Kla蛋白表达,明显升高乳酸含量(P<0.05或P<0.01),明显降低血糖、血清TG、TC和LDL-c含量(P<0.05);显著降低海马Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量(P<0.01)。结论:滋补脾阴方药有利于改善DACD大鼠的糖脂代谢紊乱及学习记忆能力。其机制可能是通过激活糖酵解通路,上调乳酸水平调控蛋白乳酸化,改善大鼠的记忆功能。

滋补肝肾方调控B16黑素细胞氧化损伤的分子机制

目的:探讨滋补肝肾方组方配伍抑制B16黑素细胞氧化损伤的分子机制。方法:研究共分6组:正常对照组、模型组、祛风组、养血组、补肝肾组、全方组。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst 33342观察凋亡细胞的核变化,激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位,底物荧光法检测Caspase-3/9的活性,Western Blot法测定细胞凋亡B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、细胞色素c(Cyt-c)蛋白的表达。结果:(1)与正常对照组比较,模型组凋亡率、Caspase-3/9活性显著增高(P<0.01),线粒体膜电位、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),Cyt-c蛋白表达量升高(P<0.01)。(2)与模型组比较,滋补肝肾含药血清各组凋亡率显著降低(P<0.01,P<0.05),线粒体膜电位降低得到改善,Caspase-3/9活性降低(P<0.01),可使Cyt-c蛋白表达量降低,Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.01)。结论:线粒体信号转导通路可能是滋补肝肾含药血清干预氧化应激诱导B16黑素细胞凋亡的调控机制之一,全方组抑制氧化应激效果最好,体现了中医治疗白癜风、综合作用的优势。

神经复原方预防轻型缺血性卒中复发的多中心随机双盲对照研究

目的:观察神经复原方预防轻型缺血性卒中(IS)复发的临床疗效。方法:采用多中心、随机、双盲、安慰剂对照的研究方法,纳入气阴不足、痰瘀阻滞型轻型IS患者180例,随机分为治疗组和对照组,每组各90例。两组患者均给予西医常规治疗,在此基础上,治疗组患者给予神经复原方颗粒剂口服,对照组患者给予神经复原方颗粒安慰剂口服,两组治疗周期均为270 d。治疗90、180、270 d后,记录IS、短暂脑缺血发作(TIA)及其他缺血性疾病(包括心肌梗死、急性冠脉综合征等)的发生情况,统计并比较两组患者的IS复发率、TIA发生率等。结果:研究过程中,治疗组10例患者、对照组10例患者剔除或脱落,最终纳入统计分析者治疗组80例、对照组80例。(1)治疗90、180、270 d后,治疗组患者的IS复发率分别为3.75%、3.75%、5.00%,对照组患者的IS复发率分别为2.50%、13.75%、16.25%,治疗180、270 d后治疗组患者的IS复发率明显低于对照组(P<0.05);(2)治疗90、180、270 d后,治疗组患者的TIA发生率分别为5.00%、6.25%、6.25%,对照组患者的TIA发生率分别为6.25%、16.25%、17.50%,治疗180、270 d后治疗组患者的TIA发生率明显低于对照组(P<0.05);(3)治疗过程中,对照组2例患者发生新发急性心肌缺血,治疗组无其他缺血性疾病发生;(4)治疗90、180、270 d后,治疗组患者的总体缺血性事件发生率分别为8.75%、10.00%、11.25%,对照组患者的总体缺血性事件发生率分别为10.00%、28.75%、31.25%,治疗180、270 d后治疗组患者的总体缺血性事件发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论:神经复原方能够有效预防轻型IS复发及TIA发生,降低总体缺血性事件的发生率,且随着治疗时间延长,治疗效果更明显。