滋膵通脉饮对糖尿病心肌病大鼠心肌微血管损伤的影响

目的:探讨滋膵通脉饮对糖尿病心肌病大鼠心肌微血管损伤的影响及其作用机制。方法:将51只SD雄性大鼠随机分为空白对照组(9只)和造模组(42只)。造模组大鼠采用长期高糖高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35 mg/kg)方法建立糖尿病心肌病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、滋膵通脉饮高剂量组、滋膵通脉饮低剂量组、特异性βⅡ-蛋白激酶C(PKC-βⅡ)抑制剂[Ruboxistaurin(LY333531)HCl,Rx抑制剂]组,每组9只。滋膵通脉饮高、低剂量组大鼠分别予相应剂量[60.84、15.21 g/(kg·d)]滋膵通脉饮灌胃,Rx抑制剂组大鼠予PKC-βⅡ抑制剂混悬液灌胃[1.00 mg/(kg·d)]。空白对照组和模型组大鼠均予蒸馏水灌胃[10 mL/(kg·d)]。2次/d,连续给药4周。给药结束后测量体质量、空腹血糖及糖化血清蛋白;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测心肌组织PKC-βⅡ、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及血管内皮细胞钙粘连蛋白(VE-cadherin)表达;定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测心肌组织PKC-βⅡmRNA、VE-cadherin m RNA、VEGF mRNA、VEGFR2 mRNA表达;透射电镜观察心肌微血管的超微结构。结果:模型组大鼠空腹血糖、糖化血清蛋白、心肌组织PKC-βⅡ、VEGF蛋白相对表达量及心肌组织PKC-βⅡmRNA、VEGF mRNA相对表达量均高于空白对照组(P<0.01),体质量、心肌组织VE-cadherin、VEGFR2蛋白相对表达量及心肌组织VE-cadherin mRNA、VEGFR2mRNA相对表达量均低于空白对照组(P<0.01)。滋膵通脉饮高、低剂量组大鼠空腹血糖、糖化血清蛋白均低于模型组(P<0.05或P<0.01),体质量均高于模型组(P<0.01);Rx抑制剂组大鼠空腹血糖、糖化血清蛋白、体质量与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05);滋膵通脉饮低剂量组、Rx抑制剂组大鼠心肌组织PKC-βⅡ、VEGF蛋白相对表达量及心肌组织PKC-βⅡmRNA、VEGF mRNA相对表达量均低于模型组(P<0.01),VE-cadherin、VEGFR2蛋白相对表达量及VE-cadherin mRNA、VEGFR2 mRNA相对表达量均高于模型组(P<0.01);滋膵通脉饮高剂量组大鼠心肌组织VE-cadherin、VEGFR2蛋白相对表达量及VE-cadherin mRNA、VEGFR2 m RNA相对表达量高于模型组(P<0.05或P<0.01),心肌组织PKC-βⅡmRNA、VEGF mRNA相对表达量低于模型组(P<0.01)。透射电镜显示空白对照组大鼠微血管管腔圆滑规整,内皮细胞附着在基底膜内,基底膜均匀连续,胞间紧密连接完整;模型组大鼠心肌微血管损伤明显,基底膜及胞间连接断裂,细胞间隙增宽,管腔通透性增加;Rx抑制剂组、滋膵通脉饮高剂量组、滋膵通脉饮低剂量组大鼠微血管损伤均有不同程度改善,基底膜及胞间连接断裂改善或消失,细胞间隙轻微增宽或不明显。结论:滋膵通脉饮可抑制糖尿病心肌病大鼠PKC-βⅡ激活,影响VEGF的表达,从而调节心肌微血管细胞间正常连接,改善心肌微血管损伤。这可能是其治疗糖尿病心肌病的机制之一。

滋膵通脉饮对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞自噬和凋亡的影响及机制

目的 探讨滋膵通脉饮对高糖诱导的大鼠H9c2心肌细胞自噬和凋亡的影响及机制。方法 将20只无特定病原级Sprague Dawley大鼠按随机数字表法分为空白血浆组和滋膵通脉饮组,每组10只。滋膵通脉饮组大鼠每天给予10 mL·kg^(-1)滋膵通脉饮灌胃,空白血浆组大鼠给予等剂量灭菌超纯水灌胃,连续灌胃7 d,采集腹主动脉血,分离血浆备用。取对数生长期H9c2心肌细胞,按随机数字表法分为正常对照组、空白对照组和滋膵通脉饮组,分别加入稀释后的胎牛血清、空白血浆组血浆及滋膵通脉饮组血浆,每组设置体积分数5%、10%、15%的浓度梯度,应用细胞计数试剂盒-8法检测各组H9c2心肌细胞增殖情况,筛选最佳含药血浆浓度。取对数生长H9c2细胞,按随机数字表法分为正常对照组、高糖诱导组、高糖诱导+中药含药血浆组、高糖诱导+恩格列净组,正常对照组细胞不加任何药物干预,高糖诱导组细胞加33.3 mmol·L^(-1) D-葡萄糖和体积分数10%空白血浆组血浆,高糖诱导+中药含药血浆组细胞加33.3 mmol·L^(-1) D-葡萄糖和体积分数10%滋膵通脉饮组血浆,高糖诱导+恩格列净组细胞加33.3 mmol·L^(-1)的D-葡萄糖和0.01μmol·L^(-1)恩格列净;给药24 h后,使用细胞毒性比色法检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中自噬和凋亡相关蛋白p62、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅰ、LC3-Ⅱ和Bcl-2的表达。结果 体积分数5%、15%浓度时,滋膵通脉饮组H9c2细胞增殖能力显著低于正常对照组和空白对照组(P<0.05);正常对照组与空白对照组H9c2细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。体积分数10%浓度时,正常对照组、空白对照组和滋膵通脉饮组H9c2细胞增殖能力比较差异无统计学意义(F=0.110,P>0.05)。正常对照组、高糖诱导+中药含药血浆组和高糖诱导+恩格列净组H9c2细胞凋亡率显著低于高糖诱导组(t=43.527、23.836、21.617,P<0.01);高糖诱导+恩格列净组和高糖诱导+中药含药血浆组H9c2细胞凋亡率显著高于正常对照组(t=14.933、11.723,P<0.05);高糖诱导+中药含药血浆组与高糖诱导+恩格列净组H9c2细胞凋亡率比较差异无统计学意义(t=1.995,P>0.05)。正常对照组、高糖诱导+中药含药血浆组和高糖诱导+恩格列净组H9c2细胞LDH释放率显著低于高糖诱导组(t=58.660、31.408、26.557,P<0.01);高糖诱导+恩格列净组和高糖诱导+中药含药血浆组H9c2细胞LDH释放率显著高于正常对照组(t=14.167、11.740,P<0.05);高糖诱导+中药含药血浆组与高糖诱导+恩格列净组H9c2细胞LDH释放率比较差异无统计学意义(t=1.801,P>0.05)。正常对照组、高糖诱导+中药含药血浆组和高糖诱导+恩格列净组H9c2细胞中p62、Bax表达水平显著低于高糖诱导组,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Bcl-2表达水平显著高于高糖诱导组(P<0.05);高糖诱导组H9c2细胞中Bcl-2/Bax显著低于正常对照组和高糖诱导+中药含药血浆组(P<0.05);高糖诱导组与高糖诱导+恩格列净组H9c2细胞中Bcl-2/Bax比较差异无统计学意义(P>0.05);高糖诱导+恩格列净组和高糖诱导+中药含药血浆组H9c2细胞中p62、Bax显著高于正常对照组,Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Bcl-2/Bax显著低于正常对照组(P<0.05)。高糖诱导+中药含药血浆组与高糖诱导+恩格列净组p62、Bax、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Bcl-2表达水平及Bcl-2/Bax比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 滋膵通脉饮可激活高糖诱导H9c2心肌细胞自噬,抑制H9c2细胞凋亡,减轻心肌细胞损伤。

加味滋膵饮联合盐酸吡格列酮对气阴两虚型2型糖尿病患者的临床疗效

目的探讨加味滋膵饮联合盐酸吡格列酮对气阴两虚型2型糖尿病患者的临床疗效。方法 88例患者随机分为对照组和观察组,每组44例,对照组给予盐酸吡格列酮,观察组在对照组基础上加用加味滋膵饮,疗程4周。然后,检测中医证候评分、临床疗效、血糖指标[空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)]、炎症因子[白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)]、胰岛β细胞功能指标[空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)]、氧化应激相关因子[丙二醛(MDA)、脂质过氧化氢(LHP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧簇(ROS)]变化。结果治疗后,观察组中医证候评分显著低于对照组(P<0.05),临床疗效显著更优(P<0.05);血糖指标、炎症因子、FINS、HOMA-IR、MDA、LHP、ROS显著更低(P<0.05),HOMA-β、GSP-Px、T-AOC、SOD显著更高(P<0.05)。结论加味滋膵饮联合盐酸吡格列酮可改善胰岛β细胞功能,抑制炎症和氧化应激反应,从而缓解气阴两虚型2型糖尿病患者临床症状。

滋膵通脉饮对糖尿病心肌病大鼠糖脂代谢及氧化应激的影响

目的:探讨滋膵通脉饮对糖尿病心肌病大鼠糖脂代谢及氧化应激的影响。方法:从51只SD大鼠中随机抽取9只为空白对照组,其余大鼠复制2型糖尿病模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、Rx抑制剂组、滋膵通脉饮高剂量组、滋膵通脉饮低剂量组,每组9只。各给药组大鼠予以相应药物灌胃,空白对照组和模型组均灌服等体积蒸馏水,2次/d,共4周。检测各组大鼠体质量、空腹血糖(FPG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)、低密度脂蛋白(LDL-C)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、糖化血红蛋白(HbAlc)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛酸(MDA),同时应用蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织蛋白激酶C-βⅡ(PKC-βⅡ)表达情况,苏木精-伊红(HE)染色法观察心肌组织的病理变化。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠体质量及SOD活性均明显降低(P<0.05),FPG、FINS、HOMA-IR、TG、T-CHO、LDL-C、HbAlc及MDA指标均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,滋膵通脉饮高、低剂量组大鼠体质量、SOD活性均升高(P<0.05),FPG、FINS、HOMA-IR、TG、T-CHO、LDL-C、HbAlc及MDA指标均明显降低(P<0.05),Rx抑制剂组大鼠SOD活性升高(P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.05)。与Rx抑制剂组比较,滋膵通脉饮高、低剂量组大鼠体质量明显升高(P<0.05),FPG、FINS、HOMA-IR、HbAlc、TG、T-CHO及LDL-C指标均明显降低(P<0.05);滋膵通脉饮高、低剂量组大鼠SOD活性及MDA含量与Rx抑制剂组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠心肌纤维与心肌细胞排列紊乱,纤维间隙明显增宽,心肌细胞肥大变形、可见炎症细胞浸润、间质纤维化明显。与模型组比较,滋膵通脉饮高、低剂量组及Rx抑制剂组心肌细胞排列、心肌细胞形态及心肌纤维间隙改善。与空白对照组比较,模型组大鼠心肌组织PKC-βⅡ蛋白相对表达量明显升高(P<0.01);与模型组比较,滋膵通脉饮低剂量组及Rx抑制剂组大鼠心肌组织PKC-βⅡ蛋白相对表达量明显降低(P<0.01);滋膵通脉饮高剂量组大鼠心肌组织PKC-βⅡ蛋白相对表达量与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:滋膵通脉饮能改善糖尿病心肌病大鼠糖脂代谢及氧化应激,同时可抑制PKC-βII表达抗心肌纤维化。

滋膵饮对2型糖尿病模型大鼠的降糖作用及机制研究

目的:研究滋膵饮对2型糖尿病模型大鼠的降糖作用及其机制,为其临床应用提供理论基础。方法:将80只雄性大鼠高糖高脂饲料喂养4周后,单次腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg复制2型糖尿病大鼠模型,另取10只大鼠作为正常组。将糖尿病模型大鼠随机分为二甲双胍组(阳性对照,0.2 g/kg)、模型组(等体积蒸馏水)和滋膵饮高、中、低剂量组(14.0、7.0、3.5 g/kg),每组10只。连续灌胃给药2周后,采用全自动血糖仪测定各组大鼠空腹血糖值;采用酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清胰岛素水平;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组大鼠胰腺组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、蛋白激酶B(Akt)和胰岛素受体底物1(IRS-1)mRNA表达水平;Western blot法检测各组大鼠胰腺组织中JNK、Akt、IRS-1蛋白的磷酸化程度。结果:与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖、胰腺组织中JNK mRNA的表达水平和JNK、IRS-1蛋白的磷酸化程度均显著升高(P<0.05或P<0.01),血清胰岛素含量、Akt mRNA、IRS-1 mRNA的表达水平和Akt蛋白的磷酸化程度均显著降低(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组和滋膵饮高、中剂量组大鼠空腹血糖均显著降低(P<0.05),二甲双胍组和滋膵饮高剂量组大鼠血清胰岛素含量均显著升高(P<0.01),二甲双胍组和滋膵饮各剂量组大鼠胰腺组织中JNK mRNA的表达水平均显著降低(P<0.01)、Akt mRNA、IRS-1 mRNA的表达水平均显著升高(P<0.01);二甲双胍组和滋膵饮高剂量组大鼠的JNK、IRS-1蛋白的磷酸化程度均显著降低(P<0.01)、Akt蛋白的磷酸化程度均显著升高(P<0.01)。结论:滋膵饮具有明显的降糖作用,其作用机制与降低胰岛组织中JNK和IRS-1蛋白磷酸化程度和升高Akt蛋白磷酸化程度有关。

滋膵饮对2型糖尿病大鼠胰岛病理结构的影响

目的:研究滋膵饮对2型糖尿病大鼠血糖、血脂、胰腺病理结构的影响,探讨其降糖作用机制。方法:雄性Wistar大鼠饲以高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ),建立2型糖尿病模型,连续给药8周,检测血糖、血清胰岛素(Ins)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),光学显微镜观察胰腺病理结构。结果:滋膵饮低、中、高剂量组均能不同程度地降低糖尿病大鼠TC、TG、LDL-C,升高Ins、HDL-C,改善OGTT。HE染色结果显示滋膵饮可修复胰岛组织病理结构,使胰岛形态更规则。结论:滋膵饮可降低血糖,改善血脂紊乱,其作用机制与促进胰岛素分泌、修复胰岛组织有关。

滋膵通脉饮联合瑞格列奈治疗2型糖尿病的临床效果分析

目的:探讨滋膵通脉饮联合瑞格列奈治疗2型糖尿病患者的临床疗效。方法:收集我院于2019年10月-2020年3月收治的84例2型糖尿病患者,随机分为观察组和对照组,观察组给予滋膵通脉饮联合瑞格列奈,对照组给予瑞格列奈,两组疗程均为3个月。比较两组临床的疗效,治疗前后的空腹血糖(Glucose,GLU)、餐后2 h血糖(2 hours Postprandial Blood Glucose,2 h PBG)及糖化血红蛋白(Hemoglobin A1c,HbA1c)、空腹C肽、空腹胰岛素水平(Fasting Insulin,FINS)、胰岛β细胞功能(β-cell Function,HOMA-β指数)。结果:治疗3个月后,观察组临床总有效率高于对照组,两组治疗后GLU、2 h PBG及HbA1c均较治疗前明显减低(P<0.05);治疗后,观察组的GLU、2 h PBG及HbA1c水平较对照组明显减低(P<0.05);治疗后,观察组FINS较对照组显著降低,空腹C肽、HOMA-β指数较对照组显著升高(P<0.05)。观察组治疗后FINS较治疗前明显下降,空腹C肽、HOMA-β指数较治疗前显著上升(P<0.05)。结论:滋膵通脉饮联合瑞格列奈可降低2型糖尿病患者的血糖,改善胰岛β细胞功能,二者联合可能具有协同作用,值得临床推广。