梓葛冻干粉针对脑缺血／再灌注损伤大鼠脑微血管通透性的影响及其机制研究

本文探讨梓葛冻干粉针对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑微血管通透性的影响及其作用机制。选择雄性SD大鼠320只,随机分为假手术组、模型组、葛根素注射液组、尼莫地平组和梓葛冻干粉针3个剂量组。线栓法复制大鼠缺血再灌注模型,分别缺血2 h,于再灌注1、4、7和14 d给药后,取脑提取微血管,分别用Western blot法测定脑微血管中闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-5(Claudin-5)、闭合小带蛋白-1(ZO-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白表达。结果表明,与模型组相比,再灌注4、7和14 d,梓葛冻干粉针16.40、32.70和65.40 mg·kg-1能抑制脑缺血/再灌注大鼠缺血侧脑皮质层微血管中MMP-9蛋白表达的升高;并促进微血管中Claudin-5、Occludin、ZO-1蛋白表达。说明梓葛冻干粉针影响脑缺血/再灌注损伤大鼠脑微血管通透性的机制可能是通过抑制MMP-9蛋白表达,并促进Claudin-5、Occludin、ZO-1蛋白表达,进而保护和改善脑微血管通透性。

梓葛冻干粉针对脑微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

探讨梓葛冻干粉针对脑微血管内皮细胞(BMECs)缺氧/复氧损伤的保护作用。取新生10 d的SD大鼠乳鼠,分离、培养脑皮层微血管原代内皮细胞,并利用DMEM无糖培养基、三气培养箱缺氧容器(缺糖缺氧2 h)及5%CO2培养箱复氧培养24 h复制缺氧/复氧模型,MTT法BMECs细胞活力,Western blot法检测MMP-9的蛋白表达。结果显示,与模型组相比,梓葛冻干粉针(49.00、98.00μg·m L^(-1))能促进缺氧/复氧模型中BMECs增殖;梓葛冻干粉针(24.50、49.00、98.00μg·m L^(-1))能显著抑制BMECs细胞中MMP-9蛋白表达升高(p<0.05);提示梓葛冻干粉针对脑微血管内皮细胞损伤的保护作用可能与降低MMP-9蛋白表达有关。

梓葛冻干粉针对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑微血管舒缩功能异常的改善作用

探讨梓葛冻干粉针对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑微血管舒缩功能异常的改善作用.用线栓法复制大鼠缺血/再灌注模型,分别缺血2h,于再灌注1d,4d,7d和14d给药后,取脑,按照相应试剂盒测定脑组织NOS,ET-1,TXB2和6-Ke-to-PGF1α质量分数.结果表明,与模型组相比,再灌注4d,7d和14d,梓葛冻干粉针16.40mg/kg,32.70mg/kg和65.40mg/kg能显著降低TNOS,iNOS活力,ET-1质量分数,TXB2质量分数及TXB2/6-Ke-toPGF1α的比值(p<0.01),且也能显著升高cNOS活力和6-Ke-to-PGF1α质量分数(p<0.01).得出梓葛冻干粉针有改善脑缺血/再灌注损伤大鼠微血管舒缩功能异常的作用.

梓葛冻干粉针对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑微血管通透性的保护作用

本文探讨梓葛冻干粉针对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑微血管通透性的影响。选择雄性SD大鼠272只,随机分为假手术组、模型组、葛根素注射液组和梓葛冻干粉针3个剂量组。线栓法复制大鼠缺血再灌注模型,分别缺血2 h,于再灌注1、4、7、14 d给药后,取脑提取微血管,用RT-PCR法测定脑微血管中闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-5(Claudin-5)、闭合小带蛋白-1(ZO-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的mRNA表达。结果表明,与模型组相比,再灌注4、7、14 d,梓葛冻干粉针16.40、32.70、65.40 mg·kg^(-1)能抑制脑缺血/再灌注大鼠缺血侧脑皮质层微血管中MMP-9mRNA表达的升高(p<0.01);并促进微血管中Claudin-5、Occludin、ZO-1 mRNA表达(p<0.05)。说明梓葛冻干粉针通过抑制MMP-9基因表达,并促进Claudin-5、Occludin、ZO-1基因表达,进而保护和改善脑微血管通透性。

梓葛冻干粉针对大鼠急性脑微循环障碍的改善作用

目的:探讨梓葛冻干粉针对大鼠急性脑微循环障碍的改善作用。方法:大鼠给药14 d后开颅窗,利用高分子葡聚糖复制实验性微循环障碍模型,生物显微镜下观察记录给药后各组大鼠不同时间点软脑膜微动静脉直径,激光多普勒血流仪监测血流量,电阻法测红细胞压积,全自动血液流变仪测流变学指标。结果:梓葛冻干粉针(16.40,32.70,65.40 mg·kg^(-1))能显著扩张软脑膜的微动静脉内径、改善血流量下降的趋势和降低血液流变学各项指标。结论:梓葛冻干粉针具有改善脑部微循环的作用。

梓葛冻干粉针中葛根素在大鼠肝肾的分布

目的:考察梓葛冻干粉针中葛根素在大鼠肝、肾的分布过程,探讨梓葛冻干粉针的安全性。方法:设梓葛冻干粉针药物组和葛根素冻干粉针对照组,按葛根素剂量26.7 mg.kg-1,经大鼠尾静脉给药。采用高效液相色谱法测定给药后5,10,20,30,45,60,120 min,大鼠肝、肾组织中葛根素的浓度。结果:药物组中葛根素在肾脏的峰浓度Cmax为58.12μg.g-1,药-时曲线下面积AUC0-2 h为26.24μg.h.g-1,平均滞留时间MRT0-2 h为0.39 h;对照组中葛根素在肾脏的Cmax71.28μg.g-1,AUC0-2 h35.24μg.h.g-1,MRT0-2 h0.42 h。与对照组相比,药物组大鼠肾脏中的葛根素Cmax和AUC0-2 h明显降低(P<0.05),达峰时间tmax和MRT0-2 h无显著性差异。2组中葛根素在肝脏的tmax,Cmax,AUC0-2 h和MRT0-2 h均无显著性差异。结论:与葛根素冻干粉针相比,梓葛冻干粉针中葛根素在肾脏的分布明显降低,消除无明显变化;在肝脏的分布与消除均无明显变化。说明梓醇可降低葛根素在肾脏中的分布,梓葛冻干粉针比葛根素粉针对于肾脏安全性更高。