人胃癌细胞BGC823中miR-200c靶基因产物波形蛋白的检测及功能研究

目的:采用RNA靶向干扰技术,研究人胃癌细胞BGC823中微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-200c的靶点锌指E盒增强子结合蛋白2(zinc finger E-box enhancer binding protein 2,ZEB2)基因的表达情况,并检测相关的波形蛋白基因表达情况,观察miR-200c对胃癌BGC823细胞功能的影响。方法:构建ZEB2基因表达的干扰质粒shZEB2,用Lipofectamine 2000转染胃癌BGC823细胞,用G418筛选稳定转染细胞株,进行实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测人BCG823细胞中ZEB2 mRNA、miR-200c及波形蛋白基因的表达水平,并用蛋白印迹法检测ZEB2蛋白、波形蛋白表达水平,噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果:干扰ZEB2分子表达后,miR-200c表达水平增高,而BGC823细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显下降。结论:ZEB2是miR-200c的检测靶点,干扰ZEB2后,胃癌细胞BGC823的增殖、迁移及侵袭能力明显降低。

HNF1A、HNF1B、C/EBPA和ZHX2基因多态性与血清AFP水平相关性研究

目的探讨HNF1A-rs1169288(A/C)和rs2464196(G/A)、HNF1B-rs4430796(A/G)、C/EBPA-rs34529039(C/A)和ZHX2-rs7844465(G/T)基因多态性与中国健康成人血清甲胎蛋白(AFP)水平的相关性。方法纳入笔者医院2017年1~11月1010例年龄在25~65岁的汉族健康体检人员,采用等位基因特异性引物结合荧光定量PCR的方法(ARMS-TaqMan法)进行等位基因分型检测。血清AFP采用美国雅培公司i2000免疫分析仪测定。结果1010例研究对象的rs2464196最小等位基因A的频率为0.479。AFP水平在rs2464196-AA型(247例)最低,为3.60±1.59ng/ml,AG型(473例)为3.92±1.78ng/ml,GG型(290例)最高,为4.21±2.10ng/ml(P<0.001)。线性回归分析显示在控制影响AFP水平的各临床指标后,rs2464196基因多态性仍与血清AFP水平显著相关(P=0.000)。而HNF1A-rs1169288,HNF1B-rs4430796,C/EBPA-rs34529039和ZHX2-rs7844465多态性与血清AFP水平无显著相关。结论在表观健康成年人中,HNF1A-rs2464196A等位基因与血清AFP水平降低具有显著相关性,该发现为血清AFP水平变化提供了新的遗传决定因子。