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KLF10在多发性骨髓瘤患者中的表达及与预后的关系
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作者 李慧 张吴霞 熊烨 《西部医学》 2024年第4期549-553,共5页
目的探究多发性骨髓瘤患者中锌指蛋白转录因子10(KLF10)的表达及其与预后的关系。方法选取2015年1月—2017年1月我院收治的多发性骨髓瘤患者126例作为观察组,选取同期在我院健康体检的健康者120例作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA... 目的探究多发性骨髓瘤患者中锌指蛋白转录因子10(KLF10)的表达及其与预后的关系。方法选取2015年1月—2017年1月我院收治的多发性骨髓瘤患者126例作为观察组,选取同期在我院健康体检的健康者120例作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测受试者血清KLF10水平;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测受试者血清miR-21表达水平;采用Pearson相关性分析法进行多发性骨髓瘤患者血清KLF10、miR-21水平的相关性分析;采用Kaplan-Meier法分析患者血清KLF10、miR-21水平与多发性骨髓瘤患者预后的关系;采用多因素COX回归分析影响多发性骨髓瘤患者预后的危险因素。结果观察组血清KLF10水平低于对照组,血清miR-21水平高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,观察组血清KLF10、miR-21水平呈负相关(r=-0.447,P<0.05);多发性骨髓瘤患者血清KLF10、miR-21水平与患者性别、年龄、免疫球蛋白分型无关(P>0.05),与患者DS分期、是否重度贫血、ECOG评分以及骨髓浆细胞比例有关(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线分析表明,多发性骨髓瘤患者血清KLF10低表达组生存率低于高表达组(χ^(2)=9.651,P=0.032);血清miR-21高表达组生存率低于低表达组(χ^(2)=12.056,P=0.0024);多因素COX回归分析显示,血清KLF10低表达、血清miR-21高表达、DS分期Ⅲ期、重度贫血、ECOG评分>3分和骨髓浆细胞比例>30%是影响多发性骨髓瘤患者发生不良预后的危险因素(P<0.05)。结论多发性骨髓瘤患者血清KLF10表达下调,其表达水平与患者临床病理特征相关,是多发性骨髓瘤患者发生不良预后的危险因素。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 锌指蛋白转录因子10 预后 MIR-21
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含MYND结构域的锌指蛋白10的原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 王磊 张亚平 +4 位作者 杨海杰 谢云飞 丁琼琼 张彬彬 冯志伟 《新乡医学院学报》 CAS 2015年第9期821-825,共5页
目的表达纯化含MYND结构域的锌指蛋白10(ZMYND10)的重组蛋白并制备其大鼠多克隆抗体。方法全基因合成ZMYND10基因的开放阅读框,构建原核表达载体p ET-28m-ZMYND10。在大肠杆菌中诱导表达HisZMYND10,利用His标签镍柱纯化His-ZMYND10重组... 目的表达纯化含MYND结构域的锌指蛋白10(ZMYND10)的重组蛋白并制备其大鼠多克隆抗体。方法全基因合成ZMYND10基因的开放阅读框,构建原核表达载体p ET-28m-ZMYND10。在大肠杆菌中诱导表达HisZMYND10,利用His标签镍柱纯化His-ZMYND10重组蛋白,并用泛素样蛋白酶1除去重组蛋白的His标签。用纯化蛋白免疫大鼠,蛋白A/G混合琼脂糖纯化血清得到抗体。通过Western blot和免疫沉淀方法鉴定抗体的特异性。结果成功构建原核表达载体p ET-28m-ZMYND10,并获得可溶性表达。利用His柱得到高纯度的重组ZMYND10抗原,免疫大鼠后纯化得到的ZMYND10多克隆抗体可以检测到B16F10细胞中过表达及内源性表达的ZMYND10蛋白,并可用于免疫沉淀实验。结论本实验成功制备了ZMYND10的多克隆抗体,为后续探索ZMYND10在肿瘤细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 锌指蛋白10 多克隆抗体 纯化
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锌指蛋白A20干预人单核细胞炎症因子TNF-α、IL-12以及IL-10表达的实验研究 被引量:5
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作者 徐丹 曲鹏 +2 位作者 牛楠 崔影 陈海英 《岭南心血管病杂志》 2013年第2期226-230,共5页
目的通过阳离子脂质体将A20基因转染入单核细胞,观察A20过表达对促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-12及抗炎因子IL-10表达的调节以及对促炎因子/抗炎因子比率即TNF-α/IL-10和IL-... 目的通过阳离子脂质体将A20基因转染入单核细胞,观察A20过表达对促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-12及抗炎因子IL-10表达的调节以及对促炎因子/抗炎因子比率即TNF-α/IL-10和IL-12/IL-10比率的影响,探讨锌脂蛋白A20对单核细胞炎症反应的保护作用及可能的调节机制。方法用Ficoll细胞分离液分离人外周血单核细胞,随机分为A组(空白对照组);B组[脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组];C组(A20转染组);D组(LPS加A20转染组)。荧光显微镜检测GFP报告基因,反转录聚合酶链反应检测内源性A20、外源性A20的mRNA表达;免疫组化检测A20蛋白的表达;双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测上清液TNF-α、IL-12及IL-10表达水平。结果单核细胞受到LPS(1 mg/L)刺激后,其内源性A20的mRNA和蛋白表达以及TNF-α、IL-12和IL-10表达较对照组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);TNF-α/IL-10和IL-12/IL-10的比率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。转染A20基因的单核细胞,在无LPS刺激的条件下,其内源性A20的mRNA和蛋白表达以及TNF-α、IL-12和IL-10的表达与对照组比较,差异均无统计意义(P>0.05);TNF-α/IL-10和IL-12/IL-10的比率与对照组比较,差异也无统计意义(P>0.05)。而转染A20基因的单核细胞在受到LPS(1 mg/L)刺激后,其促炎因子TNF-α、IL-12的表达均显著低于LPS组,而抗炎因子IL-10的表达明显上调,高于对照组和LPS组;而TNF-α/IL-10和IL-12/IL-10的比率明显下降,低于LPS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 A20的表达具有炎症活化依赖性;A20过表达可抑制TNF-α、IL-12的表达,而上调抗炎因子IL-10表达,并通过改善促炎因子/抗炎因子的平衡关系,从而达到抑制炎症反应的作用。 展开更多
关键词 单核细胞 锌指蛋白A20 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-12 白细胞介素-10
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锌指蛋白A20抑制Toll样受体4介导的人单核细胞炎症反应的实验研究
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作者 徐丹 曲鹏 +3 位作者 牛楠 王虹艳 崔影 陈海英 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期711-714,共4页
目的:观察锌指蛋白A20过度表达对人单核细胞膜Toll样受体(TLR4),下游促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素(IL)-12,以及抗炎因子IL-10表达的影响,探讨锌指蛋白A20对单核细胞炎症反应的抑制作用及可能的调节机制。方法:Ficoll细... 目的:观察锌指蛋白A20过度表达对人单核细胞膜Toll样受体(TLR4),下游促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素(IL)-12,以及抗炎因子IL-10表达的影响,探讨锌指蛋白A20对单核细胞炎症反应的抑制作用及可能的调节机制。方法:Ficoll细胞分离液分离人外周血单核细胞,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、A20转染组与LPS+A20转染组。荧光显微镜检测GFP报告基因,免疫组织化学检测A20蛋白的表达,RT-PCR检测A20及TLR4的mRNA表达,流式细胞检测技术检测TLR4的蛋白表达,ELISA方法检测上清液TNF-α、IL-12及IL-10表达水平。结果:LPS刺激后,单核细胞TLR4和内源性A20的mRNA和蛋白、TNF-α、IL-12和IL-10表达较对照组均明显升高(均P<0.01);TNF-α/IL-10和IL-12/IL-10均明显高于对照组(均P<0.01);转染A20基因的单核细胞,在无LPS刺激的条件下,上述指标与对照组相比均差异无统计学意义;转染A20基因的单核细胞在LPS刺激后,TLR4mRNA和蛋白、TNF-α、IL-12的表达以及TNF-α/IL-10和IL-12/IL-10均显著低于LPS组,而IL-10的表达明显高于对照组和LPS组(均P<0.01)。结论:TLR4激活介导单核细胞的炎症反应,且正反馈调节其自身受体TLR4和内源性A20的表达;A20参与单核细胞TLR4激活所介导的炎症反应,其表达增加与TLR4表达的增加有关;单纯提高A20表达对未被激活的单核细胞TLR4及其信号通路影响不大;A20过表达可抑制TLR4激活所介导的单核细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 炎症反应 单核细胞 TOLL样受体4 锌指蛋白A20 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-12 白细胞介素-10
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A Xanthomonas transcription activator-like effector is trapped in nonhost plants for immunity 被引量:1
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作者 Fazal Haq Xiameng Xu +5 位作者 Wenxiu Ma Syed Mashab Ali Shah Linlin Liu Bo Zhu Lifang Zou Gongyou Chen 《Plant Communications》 SCIE 2022年第1期71-84,共14页
Xanthomonas oryzae pv.oryzae(Xoo),the causal agent of bacterial leaf blight in rice,delivers transcription activator-like effector(TALE)proteins into host cells to activate susceptibility or resistance(R)genes that pr... Xanthomonas oryzae pv.oryzae(Xoo),the causal agent of bacterial leaf blight in rice,delivers transcription activator-like effector(TALE)proteins into host cells to activate susceptibility or resistance(R)genes that promote disease or immunity,respectively.Nonhost plants serve as potential reservoirs of R genes;consequently,nonhost R genes may trap TALEs to trigger an immune response.In this study,we screened 17 Xoo TALEs for their ability to induce a hypersensitive response(HR)in the nonhost plant Nicotiana benthamiana(Nb);only AvrXa10 elicited an HR when transiently expressed in Nb.The HR generated by AvrXa10 required both the central repeat region and the activation domain,suggesting a specific interaction between AvrXa10 and a potential R-like gene in nonhost plants.Evans blue staining and ion leakage measurements confirmed that the AvrXa10-triggered HR was a form of cell death,and the transient expression of AvrXa10 in Nb induced immune responses.Genes targeted by AvrXa10 in the Nb genome were identified by transcriptome profiling and prediction of effector binding sites.Using several approaches(in vivo reporter assays,electrophoretic mobility-shift assays,targeted designer TALEs,and on-spot gene silencing),we confirmed that AvrXa10 targets NbZnFP1,a C2H2-type zinc finger protein that resides in the nucleus.Functional analysis indicated that overexpression of NbZnFP1 and its rice orthologs triggered cell death in rice protoplasts.An NbZnFP1 ortholog was also identified in tomato and was specifically activated by AvrXa10.These results demonstrate that NbZnFP1 is a nonhost R gene that traps AvrXa10 to promote plant immunity in Nb. 展开更多
关键词 Xanthomonas oryzae pv.oryzae AvrXa10 hypersensitive response nonhost plant zinc finger protein
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