运用血清药理学方法探讨滋肾降糖丸对小鼠MSC成骨分化的影响及其机制

目的:运用血清药理学方法研究滋肾降糖丸对小鼠骨髓基质干细胞(MSC)模型成骨分化的作用及其机制。方法:首先空腹6h后的小鼠口服滋肾降糖溶液,剂量为1.5g·kg-1,随后在0、0.5、1、2和4h不同时间段收集含药血清;随后用茜素红染色和碱性磷酸酶活性检测的方法调查上述含药血清对MSC成骨诱导分化的影响;最后用实时荧光定量PCR的方法进一步调查含药血清对MSC成骨诱导过程中相关关键基因骨形态发生蛋白(BMP2)及成骨特异性转录因子(RunX2)的表达。结果:含药血清可显著促进MSC的成骨分化,以2h后收集的血清效果最强。Q-RT-PCR实验结果显示,2h含药血清显著促进诱导后第3、6dMSC细胞BMP2及RunX2基因的表达。结论:滋肾降糖丸抗骨质疏松的作用可能与上调MSC上BMP2及RunX2的基因表达,从而促进MSC的成骨分化有关。

滋肾降糖丸治疗糖尿病骨质疏松的作用机制探索

目的通过网络药理学及分子对接的方法探讨滋肾降糖丸治疗糖尿病骨质疏松的作用机制。方法首先分别在TCMSP及BATMAN-TCM数据库中检索滋肾降糖丸(Zishen Jiangtang Pill,ZJP)的活性成分及作用靶点,GeneCards和OMIM数据库中检索DOP的相关靶点,并利用Venny系统获取ZJP作用于DOP的靶点;然后通过String数据库制作蛋白互作网络,运用Cytoscape软件构建“有效成分-靶点”网络图并利用插件CytoNCA获取网络核心靶点;再通过DAVID数据库对靶点进行GO功能及KEGG富集分析;最后通过PubChem数据库、PDB数据库、ChemOffice软件,进行分子对接,分析结合活性。结果ZJP中主要活性成分236个,关键活性成分5个,ZJP作用于DOP的靶点151个,核心靶点16个,GO富集条目66条,KEGG通路富集条目104条,分子对接良好。结论ZJP可能作用于TNF、IL-6、VEGF、mTOR、ESR1、PPARG等靶点,通过糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化信号通路、Wnt/β-catenin、RANKL/RANK等信号通路促进成骨细胞增殖分化和破骨细胞凋亡、抑制破骨细胞的生成,从而达到治疗DOP的作用。