滋肾清肝方及其有效成分对二肽基肽酶-4抑制作用的实验研究

目的:研究滋肾清肝方及其有效成分(2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,1-脱氧野尻霉素和决明子苷、红镰霉素龙胆二糖苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素、白藜芦醇)对二肽基肽酶4(DPP-4)活性的影响,研究其发挥降糖作用的可能机制。方法:建立DPP-4抑制剂的体外筛选模型,对酶量、底物浓度、最适p H和反应时间进行优化,选择磷酸西格列汀片作为阳性对照药,通过建立的筛选模型对以上成分进行筛选,计算抑制率及IC50。结果:红镰霉素龙胆二糖苷、决明子苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素对DPP-4的抑制率<10%,白藜芦醇、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、1-脱氧野尻霉素、滋肾清肝方提取物、磷酸西格列汀对DPP-4的IC50值分别为(48.805±12.874)、(2.845±0.428)、(0.305±0.002)、(1.628±0.324)、(0.003±0.0005)mmol/L。结论:滋肾清肝方及其有效成分具有不同程度的DPP-4抑制作用,抑制DPP-4可能为其调节血糖的作用机制。

滋肾清肝代平方化学成分初步研究

目的:研究滋肾清肝代平方(桑叶、桑椹、制首乌、决明子)的化学成分,为其有效成分研究提供基础。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱法进行分离、纯化,根据化合物的理化性质和波谱学数据鉴定其结构。结果:从滋肾清肝代平方各提取物中分离得到19个化合物,分别为:大黄素甲醚(1)、钝叶素(2)、大黄素(3)、甲基钝叶决明素(4)、决明子苷(5)、决明子苷B(6)、红镰霉素龙胆二糖苷(7)、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(8)、淫羊藿素(9)、白藜芦醇(10)、羽扇豆醇(11)、β-谷甾醇(12)、乌发醇(13)、齐墩果酸(14)、熊果酸(15)、β-胡萝卜苷(16)、芦丁(17)、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(18)、l-脱氧野尻霉素(19)。结论:19个化合物均为首次从该复方中分离得到的已知化合物,这些化合物能部分反映出该复方的有效成分。

滋肾清肝方对原发性高血压患者动脉功能及炎症因子的影响

目的通过观察滋肾清肝方对原发性高血压患者动脉功能及血清炎症因子的影响,评价滋肾清肝方的临床疗效。方法选择符合纳入标准的原发性高血压患者100例,随机分为治疗组及对照组各50例,治疗组予ACEI/ARB+CCB类药物标准治疗基础上联用滋肾清肝方,对照组予ACEI/ARB+CCB类药物,疗程为8周,对比患者治疗前后中医证候积分、颈动脉内膜中层厚度、极速成像脉搏波传导速度、阻力指数、炎症因子、安全性指标的变化。结果 (1)2组中医证候积分治疗后均有改善(P<0.01),且治疗组优于对照组(P<0.01);(2)双侧颈动脉极速脉搏波传导速度、阻力指数(RI)2组治疗后均有改善(P<0.01),其中治疗组优于对照组(P<0.05),双侧颈动脉内膜中层厚度(IMT)2组治疗前后无明显差异(P>0.05);(3)2组治疗后血清CRP、IL-6、TNF-α水平均有改善(P<0.05),治疗组优于对照组(P<0.05);(4)2组治疗前后肝肾功能均无统计学意义(P>0.05)。结论西药ACEI/ARB+CCB基础治疗联合滋肾清肝方对原发性高血压患者动脉弹性功能及炎症因子的改善优于单用ACEI/ARB+CCB基础治疗。

清肝滋肾方调节肥胖型高血压Irisin水平及改善代谢紊乱的临床研究

目的 观察清肝滋肾方联合常规降压西药治疗对肥胖型高血压患者的鸢尾素(Irisin)表达水平及代谢指标的影响。方法 选择符合纳入标准的肥胖型高血压阴虚阳亢证患者80例,随机分为观察组及对照组各40例。对照组给予生活方式干预及持续常规西医治疗,观察组在对照组治疗基础上加用清肝滋肾方,疗程均为8周,观察2组患者治疗前后中医证候积分、临床疗效、人体测量学指标[收缩压(Systolic blood pressure,SBP)、舒张压(Diastolic blood pressure,DBP)、体质量(Weight,WT)、腰围(Waist circumference,WC)]、代谢特征指标[空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)]、鸢尾素(Irisin)、血清脂肪因子[脂联素(Adiponectin,ADP)及瘦素(Leptin,LEP)]以及安全性指标的变化情况。结果 治疗后,2组中医证候积分明显下降(P<0.05,P<0.01),且观察组在改善头痛眩晕、急躁易怒、潮热盗汗、腰膝酸软、口燥咽干、五心烦热、便秘尿黄症状及总积分方面优于对照组(P<0.05,P<0.01);观察组中医临床疗效优于对照组(P<0.05);观察组Irisin水平明显升高(P<0.01),优于对照组(P<0.01);观察组SBP、DBP明显下降(P<0.05),优于对照组(P<0.05);2组WT、WC、TC、TG、LDL-C、ADP、LEP水平均明显改善(P<0.05,P<0.01),观察组优于对照组(P<0.05)。治疗期间2组均未出现明显不良反应。结论 清肝滋肾方联合常规降压西药能调节肥胖型高血压阴虚阳亢证患者Irisin表达,改善代谢紊乱。

滋肾清肝方改善GK大鼠胰岛素抵抗作用

目的:研究滋肾清肝方对非肥胖性2型糖尿病模型(Goto-Kakizaki,GK)大鼠血糖,糖化血红蛋白(Hb Alc),C-肽(C-P),胰高血糖素样肽-1(GLP-1)含量及α-葡萄糖苷酶活性的影响。方法:选取空腹血糖(FBG)>11.1 mmol·L^(-1) GK大鼠随机分为糖尿病模型组,滋肾清肝方低、中、高剂量(300,600,1 200 mg·kg^(-1)·d^(-1))组及二甲双胍(85 mg·kg^(-1)·d^(-1))组。持续ig给药28 d后测FBG,口服糖耐量实验(OGTT),糖化血红蛋白(Hb Alc),C-P,GLP-1含量及对α-葡萄糖苷酶活性的影响。结果:与正常组比较,模型组FBG,Hb Alc明显升高(P<0.01);与模型组比较,滋肾清肝方可显著降低GK大鼠FBG,Hb Alc,OGTT中糖负荷后120 min血糖水平(P<0.05,P<0.01),提高C-P水平及GLP-1含量(P<0.05,P<0.01),降低胰岛素抵抗指数(P<0.05),抑制α-葡萄糖苷酶活性。结论:滋肾清肝方可有效地降低GK大鼠的血糖,改善胰岛素抵抗,增加GLP-1含量及抑制α-葡萄糖苷酶活性可能为其作用机制。

滋肾清肝代平方中7种成分血药浓度的测定及其在大鼠体内的药代动力学分析

目的：建立UPLC-MS-MS同时测定大鼠血浆中2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,1-脱氧野尻霉素和决明子苷、红镰霉素龙胆二糖苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素、白藜芦醇的分析方法,研究大鼠服用滋肾清肝代平方后的药代动力学特征。方法：采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱,流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,采用电喷雾电离源,扫描方式为多反应离子监测。结果：7种成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率94.83%~106.58%,日内、日间精密度和准确度良好。7种成分在模型组大鼠中的药时曲线下面积、末端半衰期、达峰时间、清除率、表观分布容积、药峰浓度分别为（326.65±26.66）μg·L-1·h-1,（3.64±1.69）h,0.33 h,（60.56±5.32）L·h-1·kg-1,（325.13±167.18）L·kg-1,（169.25±18.02）μg·L-1。结论：该方法特异、快速、准确、灵敏,可用于滋肾清肝代平方在大鼠体内的药动学研究。

多中心随机对照评价中医药治疗特发性性早熟轻型疗效

目的:评价滋阴泻火方及滋肾清肝方治疗特发性性早熟轻型的临床疗效。方法:采用多中心、随机、单盲、阳性对照的试验设计。按照入选标准纳入154例女性研究对象,随机分到滋阴泻火组(77例)或滋肾清肝组(77例),进行为期6个月的干预。结果:(1)治疗3个月和6个月后,乳核指数组内前后比较,差异显著(滋阴泻火组:左侧P<0.001、P=0.003,右侧P=0.001、P=0.018;滋肾清肝组:左侧P<0.001、P<0.001,右侧P<0.001、P=0.001)。(2)治疗6个月后,子宫容积组内前后比较,差异有统计学意义(滋阴泻火组:P=0.028,滋肾清肝组P=0.029)。(3)治疗6个月后,卵巢容积组内前后比较,滋阴泻火组右侧卵巢容积差异有统计学意义(P=0.040)。(4)治疗3个月和6个月后,两组中医证候积分组内前后比较,差异有统计学意义(滋阴泻火组P<0.001,P<0.001;滋肾清肝组P<0.001,P<0.001)。结论:滋阴泻火颗粒剂及滋肾清肝颗粒剂均能控制特发性性早熟轻型女童的乳核大小和中医证候;其中,滋阴泻火颗粒在改善卵巢大小方面稍优于滋肾清肝颗粒。

UPLC-MS/MS同时测定滋肾清肝代平方中18个成分含量

目的：采用UPLC-ESI-MS/MS同时测定滋肾清肝代平方中18个成分的含量。方法：采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）,流动相0.1%甲酸-水-乙腈梯度洗脱,柱温50℃,进样量5μL,流速0.3 m L·min-1,采用电喷雾离子源进行正负离子模式监测,多反应监测模式（MRM）用于定量分析。结果：在16 min内,滋肾清肝代平方中18个成分（苹果酸、枸橼酸、没食子酸、齐墩果酸、熊果酸、2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、1-脱氧野尻霉素、决明子苷、红镰霉素龙胆二糖苷、决明子苷B、白藜芦醇、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素、钝叶素、大黄素、大黄酚、淫羊藿素）完全分离,峰面积与浓度有良好的线性关系,平均加样回收率为98.81%~100.80%,精密度RSD0.09%~2.9%。结论：该方法经方法学验证可用于滋肾清肝代平方中18种成分的含量测定和质量控制。