玉米ZmPsaH基因真核表达载体的构建及转化

【目的】PsaH是光合系统Ⅰ(PSI)中的一个亚基,在植物光合系统中起着重要的作用。为研究玉米ZmPsaH基因在抗逆中的作用提供基础。【方法】构建玉米ZmPsaH基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一。利用RT-PCR技术扩增得到大小约为420 bp的玉米ZmPsaH基因,经限制性内切酶SalI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒ZmPsaH-5N。【结果】通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒ZmPsaH-5N构建成功。制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功。【结论】成功构建了玉米ZmPsaH基因真核表达载体,并且成功转化了酵母。