用DNA指纹技术研究Zmu-1:DHP豚鼠的群体遗传结构

为了鉴定Zm u-1∶DHP新品系豚鼠的遗传组成,试验以Jeffreys 33.6和33.15探针,分别与Zm u-1∶DHP和DHP 2个品系豚鼠基因组DNA的H in fⅠ和H aeⅢ酶切限制性片段进行Sou thern杂交,绘制豚鼠DNA指纹图,分析豚鼠基因组DNA限制性片段长度的多态性。结果显示,33.6探针与H in fⅠ酶组合应用,多态性程度较高,制图效果好;Zm u-1∶DHP豚鼠的DNA指纹图中,在6 kb和9 kb标记点出现特征性基因序列片段;Zm u-1∶DHP品系内的相似系数Fm=0.834±0.066,显著高于DHP品系内的Fm=0.653±0.158,也高于2个品系的Fm=0.670±0.115;Zm u-1∶DHP豚鼠2随机个体间遗传组成完全相同的机率Fmn=1.07×10-2,高于DHP豚鼠的Fmn=8.474×10-5。表明该方法用于豚鼠遗传质量检测和品系鉴定是可行的。Zm u-1∶DHP和DHP豚鼠都属远交系动物,但前者的遗传基因纯合性显著高于后者,结合性状可以看出,Zm u-1∶DHP豚鼠遗传分化形成了新的品系。

Zmu-1:DHP豚鼠部分生物学特性研究

为积累Zmu-1:DHP豚鼠的生物学特性资料,本研究使用肥大细胞抗原攻击、补体溶血CH50、流式细胞仪及病毒感染方法,测定了豚鼠致敏肥大细胞对抗原的敏感性、血清总补体的活性、血液多形核白细胞的吞噬和呼吸爆发功能及对口蹄疫病毒的敏感性。结果显示,Zmu-1:DHP豚鼠致敏肥大细胞的脱颗粒反应明显低于其它品系(P<0.01),血清补体含量大于其它品系(P<0.01),多形核白细胞的吞噬功能高于其它品系(P<0.05),而呼吸爆发功能低于其它品系(P<0.01),对口蹄疫病毒呈现100%的敏感性。表明Zmu-1:DHP豚鼠的生物学特征已不同于其它品系,形成独特的遗传组成和生物学性状,具有较高的应用优势及推广价值。

Zmu-1:DHP豚鼠的随机扩增多态性DNA分析

目的 研究Zmu 1:DHP豚鼠基因组DNA的遗传多态性及其遗传概貌 ,探讨随机引物PCR(RAPD PCR)在豚鼠遗传质量检测中运用的可行性。方法 用RAPD PCR法 ,对新培育的Zmu 1:DHP豚鼠和对照品系DHP豚鼠的基因组DNA进行PCR扩增。结果 从 4 0条随机引物中 ,筛选出 2条呈多态性的引物 ,分别是第S1 2 0 2 号和第S1 2 1 9号引物。Zmu 1:DHP品系的扩增产物无多态性变化 ,而且其条带与多数DHP品系的个体相同。少数DHP品系的个体呈多态性变化 ,并找到该品系增加和缺失的特征性条带各一种。结论 Zmu 1:DHP品系的基因纯合性及个体一致性较DHP品系高。二个品系的DNA序列存在较少差异 ,说明豚鼠品系间遗传结构比较接近。一旦选定具有多态性的引物 ,RAPD PCR法可以区分豚鼠品系 ,适用于豚鼠遗传质量检定。

Zmu─1:DHP豚鼠生化基因位点多态性研究

为了研究Zmu－1：DHP育成品系豚鼠的遗传特征，以该品系亲本DHP（暂定名Zmu－2：DHP）豚鼠作对照，采用生化电泳法测定了14个同工酶的遗传标记。结果显示了二个品系的部分生化遗传概貌。Zmu－1：DHP品系10个基因位点无多态性，而Zmu－2：DHP品系有9个。二个品系的G－3－PD，G－6－PD、ES－6和ES－8位点呈多态性，DPH品系还有GOT-1位点呈多态性。上述5个多态性位点均有a、b二个等位基因，除此之外，Zmu—2：DHP品系在Es－8位点还存在c等位基因。从结果还看出，G－6－PD位点的等位基因类型与豚鼠的性别有关，多数雄性豚鼠呈b基因，多数雌性豚鼠则呈a基因。此外，还计算了5个多态性位点各种等位基因的频率。

豚鼠血清IgG含量的研究

采用单向琼脂免疫扩散法，测定Ｚｍｕ－１：ＤＨＰ品系豚鼠的血清ＩｇＧ含量。从１５～７０日龄起，血清ＩｇＧ水平逐渐递增，７０日龄后趋于平稳或稍有下降。血清含量的变异系数随日龄增加而递减。该品系豚鼠常用日龄（３５ｄ）或体重（３００ｇ）的血清ＩｇＧ正常值为５．３７ｍｇ／ｍｌ。在不同日龄ＩｇＧ的含量与性别一般无关。Ｚｍｕ－１：ＤＨＰ品系豚鼠血清ＩｇＧ含量水平与其他品系比较，具有稳定的变化规律，个体间差异较小，说明该品系豚鼠的遗传性和免疫反应性较为一致。