突变的人铜、锌超氧化物歧化酶基因的克隆、测序及表达

目的：通过基因工程的方法将ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ ｃＤＮＡ基因改造以得到更加稳定的酶。方法：以本实验室构建的 ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ ｃＤＮＡ为模板，利用含有突变核苷酸的引物进行 ＰＣＲ扩增，将正确测定的含 ｒｈＣｕ， Ｚｎ－ＳＯＤ突变（ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＭＳＯＤ）基因的重组质粒重组到表达载体ＰＥＴ－２２ｂ（＋）中，重组质粒在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＭＳＯＤ。结果：表达产物占菌体总蛋白的３８％，具有特异性ＳＯＤ酶活性。结论：从基因突变的角度改善酶的性能不仅具有理论意义，又有一定的实用价值。