胡桃醌F127/TPGS混合胶束的制备及其对溃疡性结肠炎的治疗作用

目的优化胡桃醌普郎尼克F127(F127)/聚乙二醇琥珀酸酯(D-alpha tocopheryl polythylene glycol succinate,TPGS)混合胶束的制备工艺,并对该混合胶束进行表征和体内药效学研究。方法用薄膜分散法制备胡桃醌F127/TPGS混合胶束,以包封率为指标,用单因素和3因素3水平响应面实验优化胡桃醌混合胶束的制备工艺。用透射电镜和马尔文粒度仪对混合胶束进行表征。用透析袋研究其体外释放度。通过疾病活动指数(DAI)和结肠HE切片研究胡桃醌F127/TPGS混合胶束体内抗溃疡性结肠炎作用。结果胡桃醌F127/TPGS混合胶束的最佳制备工艺:药物∶载体=1∶50、F127∶FPGS=4∶5、水化体积为10 mL、水化时间为1 h、乙醇体积为1 mL。对最优处方进行验证,得到胡桃醌的平均包封率为90.53%,与预测值(85.32%)偏差较小。透射电镜下混合胶束呈球形,形态完整且分布均匀。平均电位为(−3.86±3.05)mV,平均粒径为(13.91±0.15)nm,PDI为(0.092±0.009)。体外释放度实验结果显示,胡桃醌F127/TPGS混合胶束的累积释放度大于胡桃醌混悬液。胡桃醌F127/TPGS混合胶束干预后,小鼠DAI值下降,结肠组织病理损伤得到缓解。结论经响应面优化的胡桃醌F127/TPGS混合胶束制备工艺条件稳定,且可增加胡桃醌溶解度,增强胡桃醌抗溃疡性结肠炎的作用。

PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞外泌体来源miR-132诱导成骨分化修复牙槽骨缺损

目的:探究PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞外泌体来源miR-132诱导成骨分化对牙槽骨缺损的修复作用。方法:培养骨髓间充质干细胞,(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),并转染anti-miR-132、anti-miR-NC质粒。制备BMSCs来源外泌体(bone mesenchymal stem cells-exosomes,BMSCs-exo),蛋白质印迹法鉴定表达标志物。制备PF-127水凝胶和BMSCs-Exo复合物,PKH67标记法检测BMSCs的摄取;茜素红染色检测BMSCs的成骨能力;逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测细胞中miR-132表达和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)mRNA表达。建立牙槽骨缺损大鼠模型,将大鼠随机分为PF-127水凝胶组、PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-NC组和PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组。微型计算机断层扫描(Micro-computed tomography,micro-CT)评估牙槽骨缺损情况;蛋白质印迹法检测牙槽骨组织中ALP、OCN、Runx2蛋白表达。结果:anti-miR-132组BMSCs中miR-132表达明显低于anti-miR-NC组(P<0.05),提示anti-miR-132成功转染至BMSCs中。BMSCs-exo-anti-miR-NC组和BMSCs-exo-anti-miR-132组中外泌体标志物CD9和CD63显著表达。和BMSCs-exo-anti-miR-NC组相比,BMSCs-exo-anti-miR-132组中miR-132表达明显降低(P<0.05)。和PF127水凝胶组相比,BMSC-exo-anti-miR-NC组、PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-NC组、PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-132组中miR-132表达均明显降低,茜素红染色相对活性、细胞中Runx2、ALP和OCN mRNA表达均明显增加,且PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-132组变化最显著(P<0.05)。和Control组相比,PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-NC组和PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组BV/TV比值、BMD、Tb.N和Tb.Th及细胞中Runx2、ALP、OCN蛋白表达均明显升高,Tb.Sp明显降低(P<0.05),且PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组变化最显著。结论:PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞来源外泌体来源干扰miR-132表达可促进骨髓间充质干细胞的成骨分化,从而促进牙槽骨缺损大鼠的修复。

miR-127-3p靶向调节SETD8对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨微小RNA(miR)-127-3p对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法采用qRT-聚合酶链反应(PCR)检测150例胃癌患者胃癌组织、癌旁组织及人胃上皮细胞GES1、人胃癌细胞SGC7901、AGS、MKN-45、MGC-803中miR-127-3p表达水平。双荧光素酶报告基因检测miR-127-3p与含SET结构域赖氨酸甲基转移酶(SETD)8的靶向调控关系。将SGC7901细胞分为对照(Control)组、miR-127-3p模拟物(miR-127-3p mimics)组及miR-NC组、沉默SETD8表达(si-SETD8)组、si-NC组、miR-127-3p mimics+SETD8过表达(miR-127-3p mimics+SETD8)组及空载质粒(miR-127-3p mimics+pcDNA)组。噻唑蓝(MTT)法、划痕愈合实验、Transwell小室实验分别检测SGC7901细胞增殖、迁移与侵袭;Western印迹检测SGC7901细胞SETD8、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达;裸鼠成瘤实验检测过表达miR-127-3p对裸鼠胃癌移植瘤生长的影响。结果miR-127-3p在胃癌组织与细胞中较癌旁组织和正常细胞显著下调(P<0.05),SETD8 mRNA在胃癌组织中较癌旁组织显著上调(P<0.05);胃癌组织中miR-127-3p、SETD8 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.553,P<0.05);双荧光素酶实验证实miR-127-3p与SETD8存在靶向调控关系(P<0.05);过表达miR-127-3p或抑制SETD8表达显著抑制SGC7901细胞增殖、迁移与侵袭(P<0.05);过表达SETD8可部分逆转过表达miR-127-3p对SGC7901细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用(P<0.05);裸鼠成瘤实验表明过表达miR-127-3p可显著抑制胃癌移植瘤生长(P<0.05)。结论miR-127-3p在胃癌组织与细胞中表达下调,过表达miR-127-3p可靶向抑制SETD8表达而抑制胃癌肿瘤生长。

微小RNA-127-3p在乙型肝炎病毒相关性肝癌中的表达意义及对HBV阳性肝癌细胞增殖迁移侵袭的影响

目的:探讨微小RNA-127-3p(miR-127-3p)在乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝癌中的表达意义及其对HBV阳性肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RTFQ-PCR)检测2018年12月至2020年12月在医院手术切除的64例HBV相关性肝癌患者肝癌组织和癌旁组织中miR-127-3p表达量。将对数生长期肝癌HepG2细胞分别以10、20、50 pmol的miR-127-3p mimic进行转染,同时设置对照组(以0 pmol mimic进行转染),培养48 h后采用RTFQ-PCR检测各转染组细胞中miR-127-3p表达量,MTT法检测各转染组细胞增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果:肝癌组织miR-127-3p表达量(0.26±0.03)低于癌旁组织(0.53±0.06)(P<0.05)。miR-127-3p mimic转染组(10、20、50 pmol)与对照组肝癌HepG2细胞中miR-127-3p表达量分别为(0.87±0.09)、(1.23±0.13)、(1.51±0.16)、(0.28±0.04),总体比较差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,miR-127-3p mimic(10、20、50 pmol)转染组miR-127-3p表达量更高(P<0.05);miR-127-3p mimic转染组中miR-127-3p表达量随转染浓度的升高而升高(P<0.05)。miR-127-3p mimic转染组(10、20、50 pmol)与对照组肝癌HepG2细胞增殖率分别为[(51.58±5.24)%、(25.42±2.55)%、(16.23±1.65)%、(78.67±7.88)%],细胞迁移距离分别为[(28.26±2.84)mm、(23.17±2.25)mm、(18.32±1.83)mm、(33.87±3.41)mm],穿膜细胞数分别为[(122.54±12.26)个、(101.26±10.45)个、(46.15±4.78)个、(131.23±13.24)个],总体比较差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,miR-127-3p mimic(10、20、50 pmol)转染组细胞增殖率更低,细胞迁移距离更短,穿膜细胞数更少(P<0.05);miR-127-3p mimic转染组细胞增殖率随转染浓度的升高而降低,细胞迁移距离随转染浓度的升高而变短,穿膜细胞数随转染浓度的升高而减少(P<0.05)。结论:miR-127-3p在HBV相关性肝癌患者中呈低表达,其可抑制HBV阳性肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭。

miR-127-3p靶向KIF3B缓解卵巢癌对紫杉醇的耐药性

目的 探究miR-127-3p通过调控KIF3B对卵巢癌SKOV3细胞和紫杉醇(paclitaxel, TAX)敏感性及SKOV3/TAX细胞对紫杉醇耐药性的影响。方法 采用qRT-PCR检测SKOV3和SKOV3/TAX细胞中miR-127-3p的表达水平;MTT法检测SKOV3和SKOV3/TAX细胞增殖活力;Transwell检测SKOV3和SKOV3/TAX细胞侵袭和迁移能力;Western blotting检测SKOV3和SKOV3/TAX细胞中KIF3B的表达水平;双荧光素酶报告基因系统检测miR-127-3p和KIF3B之间的靶向关系。结果 miR-127-3p SKOV3/TAX细胞中表达低于SKOV3细胞,TAX可上调SKOV3和SKOV3/TAX细胞中miR-127-3p的表达,降低SKOV3和SKOV3/TAX细胞中KIF3B的表达;过表达miR-127-3p能显著促进紫杉醇对SKOV3和SKOV3/TAX细胞增殖活力、侵袭和迁移能力的抑制作用;miR-127-3p靶向下调KIF3B表达。进一步研究发现,过表达miR-127-3p能通过下调KIF3B表达,促进紫杉醇对SKOV3和SKOV3/TAX细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用。结论 过表达miR-127-3p通过抑制KIF3B表达,促进SKOV3细胞对紫杉醇的敏感性,缓解卵巢癌细胞对紫杉醇的耐药性。

LncRNA FOXD3-AS1靶向miR-127-3p对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)叉头盒转录基因D3反义RNA1(FOXD3-AS1)对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用0.001 mol/L的AngⅡ处理人主动脉VSMCs。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测FOXD3-AS1和miR-127-3p的表达水平。CCK-8、流式细胞术、Transwell、Western印迹检测细胞活力、凋亡、迁移、侵袭及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证FOXD3-AS1和miR-127-3p的靶向调控关系。结果AngⅡ诱导后VSMCs细胞存活率、迁移和侵袭细胞数、FOXD3-AS1、p-PI3K和p-AKT表达显著升高,凋亡率、miR-127-3p表达显著降低(P<0.05)。抑制FOXD3-AS1表达或过表达miR-127-3p后,AngⅡ处理的VSMCs细胞存活率、迁移和侵袭细胞数、p-PI3K和p-AKT表达显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。FOXD3-AS1靶向负性调控miR-127-3p表达。抑制FOXD3-AS1能够逆转抑制miR-127-3p对AngⅡ处理的VSMCs细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及p-PI3K和p-AKT表达的影响(P<0.05)。结论抑制FOXD3-AS1能够降低AngⅡ诱导的VSMCs细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与上调miR-127-3p和抑制PI3K/AKT信号通路有关。

miR-127、miR-221、miR-223在新生儿肺炎中的表达及临床意义

目的探讨miR-127、miR-221、miR-223在新生儿肺炎中的表达及临床意义。方法收集2022年3~10月入住我院诊断新生儿肺炎的患儿10例设为肺炎组,以未罹患肺部疾病或感染性疾病的新生儿10例设为对照组。在治疗前分别采集肺炎组及对照组血液标本,待肺炎组治疗7天后再次采集肺炎组血液标本。比较两组治疗前后血液中miR-127、miR-221、miR-223的表达水平。结果肺炎组(治疗前)miR-127、miR-221及miR-223的表达水平高于对照组(P<0.05);肺炎组治疗前后miR-127、miR-221及miR-223的表达水平明显下降(P<0.05);肺炎组(治疗后)与对照组比较,miR-127、miR-221及miR-223的表达水平差异没有统计学意义(P>0.05)。结论miR-127、miR-221、miR-223可能在新生儿肺炎发病中发挥关键作用,具有临床意义。

RGD和泊洛沙姆F127共修饰载多西紫杉醇脂质体的制备及体外抗卵巢癌的初步研究

目的制备精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列(RGD)和泊洛沙姆F127共修饰载多西紫杉醇脂质体(DTX-F127-RGD-LP)并研究其对卵巢癌体外抗肿瘤效应。方法采用薄膜水化法制备DTX-F127-RGD-LP,通过电镜测定其形态,并进行粒径、电位、包封率、载药量等表征的测定及体外稳定性的考察;以香豆素6为荧光探针考察SKOV3细胞对修饰的脂质体的摄取情况,通过加入不同的内吞抑制剂研究修饰的脂质体的摄取机制;采用MTT法及结晶紫染色法考察修饰的脂质体对SKOV3细胞的毒性。结果DTX-F127-RGD-LP粒径为(107.2±0.67)nm,电位为-(19.7±0.4)mV,包封率为86.4%,载药量为2.7%,体外稳定性良好。RGD和泊洛沙姆F127修饰后显著增加SKOV3细胞对脂质体的摄取量,DTX-F127-RGD-LP的内吞主要通过小窝蛋白、巨胞饮以及整合素蛋白途径摄取进入细胞。与未修饰的脂质体相比,DTX-F127-RGD-LP对SKOV3细胞毒性最大,结晶紫染色法的结果与MTT结果一致,经计算DTX-F127-RGD-LP的IC50值为0.039μg·mL^(-1)。结论DTX-F127-RGD-LP能显著增强体外卵巢癌细胞的摄取,提高体外抗卵巢癌效应。

微小RNA-127-3p对乳头状甲状腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的 探讨微小RNA-127-3p(miR-127-3p)对乳头状甲状腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响,并明确miR-127-3p与肿瘤细胞侵袭抑制因子(SCAI)基因的靶向关系。方法 选取乳头状甲状腺癌细胞株TPC1、正常人甲状腺细胞株Nthy-ori 3-1为研究对象。将生长良好的TPC1细胞株根据转染方式的不同分为空白组(NC组,未进行任何处理)、miR-NC组(转染miR-127-3p过表达的空载体)、miR-127-3p组(转染miR-127-3p-mimics)、si-NC组(转染SCAI敲低空载体)和si-SCAI组(转染si-SCAI)。采用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR-127-3p、SCAI mRNA的表达水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞SCAI蛋白表达水平。采用生物信息预测miR-127-3p与SCAI的靶向作用关系,并使用荧光素酶报告实验进行验证。结果 TPC1细胞中的miR-127-3p表达水平低于Nthy-ori 3-1细胞,SCAI蛋白、SCAI mRNA表达水平高于Nthy-ori 3-1细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。与NC组、miR-NC组比较,miR-127-3p组细胞48、72 h时的增殖能力、细胞迁移和侵袭能力降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与NC组、si-NC组比较,si-SCAI组细胞48、72 h时的增殖能力、细胞迁移和侵袭能力升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与NC组和miR-NC组比较,miR-127-3p组SCAI蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。转载WT-SCAI的miR-127-3p组细胞荧光素酶活性高于转载WT-SCAI的NC组细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 乳头状甲状腺癌细胞中的miR-127-3p、SCAI呈低表达,过表达miR-127-3p可能通过促进SCAI的表达抑制乳头状甲状腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

哌拉西林通过调控miR-127-5p影响重症肺炎大鼠炎症因子的分子机制

目的探讨哌拉西林对重症肺炎大鼠炎症因子的影响及分子机制。方法用肺炎克雷伯菌构建重症肺炎大鼠模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组(50 mg/kg哌拉西林)、中剂量组(100 mg/kg哌拉西林)、高剂量组(200 mg/kg哌拉西林)、anti-miR-con+模型组、anti-miR-127-5p+模型组、anti-miR-con+高剂量组、anti-miR-127-5p+高剂量组。酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β水平;髓过氧化物酶(MPO)活性测定试剂盒检测MPO活性;Western印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、p-p65蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-127-5p表达水平。结果重症肺炎大鼠模型中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平升高,MPO活性升高,MMP2、MMP9、p-p65蛋白的相对表达水平升高,miR-127-5p相对表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同剂量哌拉西林处理后,重症肺炎大鼠中IL-6、TNF-α、IL-1β水平降低,MPO活性降低,MMP2、MMP9、p-p65蛋白的相对表达水平降低,miR-127-5p相对表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染miR-127-5p抑制载体质粒后,重症肺炎大鼠中IL-6、TNF-α、IL-1β水平升高,MPO活性升高,MMP2、MMP9、p-p65蛋白的相对表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。抑制miR-127-5p表达逆转了哌拉西林对重症肺炎大鼠模型组炎症因子和MMP2、MMP9、p-p65的蛋白表达的影响。结论哌拉西林可降低重症肺炎大鼠炎症因子水平,其可能与上调miR-127-5p表达及抑制NF-κB信号通路有关。

MXene/F127直写式导电墨水及其在电子皮肤传感器中的应用

为了规避目前金属导电墨水价格高昂、书写性能不够流畅、容易导致信号延迟的问题,在此制备了高性能的MXene和聚醚F127混合导电墨水。实验结果显示,该墨水具有流畅书写的特性,即使在界面受到应变时,其也能保持完整,确保了电信号的可靠性。此外,通过改变笔尖直径或注射直径,可以设计不同规模的电路,以适应各种应用场景。最后,成功利用这种导电墨水设计了一种电子皮肤传感器,用于监测人体的生理活动。这项研究为未来在柔性电子和生物传感器领域的应用提供了新的可能性,同时降低了成本并提高了性能。

子宫动脉栓塞术联合超声引导下清宫术治疗子宫瘢痕妊娠的临床疗效及对血清miR-382-3p和miR-127-3p水平的影响

目的探讨子宫动脉栓塞术(UAE)联合超声引导下清宫术治疗子宫瘢痕妊娠(CSP)的疗效及其对血清miR-382-3p和miR-127-3p水平的影响。方法回顾性分析2020年6月至2021年6月就诊于同济大学附属第一妇婴保健院的CSP患者92例。按照治疗方法不同进行分组,其中UAE联合阴式子宫瘢痕妊娠病灶清除术+瘢痕修补术的患者43例,将其作为UAE+修补术组;经UAE联合超声引导下清宫患者49例,作为UAE+清宫组。比较两组患者的临床资料[CSPⅠ型/Ⅱ型例数、年龄、孕次、产次、剖宫产次数、停经天数、人流次数、子宫下段肌层厚度、孕囊最大径线以及术前血β-绒毛膜促性腺激素(β-hCG)水平]和手术相关指标(手术时间、术中出血量、住院费用、住院时间、血β-HCG水平、血β-HCG转阴时间和月经复潮时间),及比较两组患者血清miR-382-3p和miR-127-3p的相对表达水平,观察两组患者术后的并发症发生情况,比较两组CSP患者输卵管通畅情况、再妊娠活产率和CSP复发情况。结果两组患者的CSPⅠ型/Ⅱ型、年龄、孕次、产次、剖宫产次数、停经天数、人流次数、肌层厚度、术前血β-HCG水平以及孕囊最大径线比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。UAE+清宫组患者的手术时间、术中出血量、住院费用、住院时间、血β-HCG水平均明显低于UAE+修补术组,差异均有统计学意义(P<0.05),两组患者血β-HCG转阴时间和月经复潮时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。术后3 d,UAE+清宫组患者的血清miR-382-3p和miR-127-3p的相对表达水平均明显高于UAE+修补术组,差异均有统计学意义(P<0.05)。UAE+清宫组患者总并发症发生率为8.16%,明显低于UAE+修补术组(20.93%),差异有统计学意义(P<0.05)。术后随访6个月,UAE+清宫组患者的输卵管通畅率为87.76%,明显高于UAE+修补术组(72.09%),差异有统计学意义(P<0.05)。术后随访12~24个月,UAE+清宫组患者的再妊娠活产率为73.47%,与UAE+修补术组(67.44%)相比,差异无统计学意义(P>0.05);UAE+清宫组患者的CSP复发率为4.08%,与UAE+修补术组(4.65%)相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论常规UAE联合超声引导下清宫术治疗CSP有利于降低术中出血量、缩短手术时间,促进恢复,提高输卵管通畅率,提高血清miR-382-3p和miR-127-3p相对表达水平,并减少并发症的发生。

circRNA_0031269调控miR-127-3p影响宫颈癌细胞的增殖及迁移

目的 探讨circRNA_0031269调控mi R-127-3p影响宫颈癌细胞的增殖及迁移。方法 选取深圳市南山区前海蛇口自贸区医院2020年3月—2021年4月妇科肿瘤专科收治的40例宫颈癌患者,经手术治疗切除的癌组织和癌旁组织。采用实时荧光定量聚合酶联反应(quantitativereal-time PCR,q RT-PCR)检测不同组织中circ RNA_0031269和mi R-127-3p的相对表达;双荧光素酶报告基因检测观察circRNA_0031269和miR-127-3p的靶向关系。采用MTT、Transwell细胞实验检测宫颈癌细胞增殖、迁移能力。结果 癌组织中circ RNA_0031269表达高于癌旁组织,mi R-127-3p表达低于癌旁组织(P<0.05);miR-127-3p过表达可降低WT-circ RNA0031269的荧光酶活性,与anti-miR-NC组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);anti-miR-127-3p过表达可抑制He La细胞增殖、迁移,与anti-miR-NC组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);抑制circ RNA_0031269表达可抑制He La细胞增殖、迁移,上调miR-127-3p表达,与si-NC组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 circ RNA0031269可通过上调miR-127-3p表达降低宫颈癌He La细胞的增殖和迁移。

Pulmonary delivery of mucus-traversing PF127-modified silk fibroin nanoparticles loading with quercetin for lung cancer therapy

The mucosal barrier remains a major barrier in the pulmonary drug delivery system,as mucociliary clearance in the airway accelerates the removal of inhaled nanoparticles(NPs).Herein,we designed and developed the inhalable Pluronic F127-modified silk fibroin NPs loading with quercetin(marked as QR-SF(PF127)NPs),aiming to solve the airway mucus barrier and improve the cancer therapeutic effect of QR.The PF127 coating on the SF NPs could attenuate the interaction between NPs and mucin proteins,thus facilitating the diffusion of SF(PF127)NPs in the mucus layer.The QR-SF(PF127)NPs had particle sizes of approximately 200 nm with negatively charged surfaces and showed constant drug release properties.Fluorescence recovery after photobleaching(FRAP)assay and transepithelial transport test showed that QR-SF(PF127)NPs exhibited superior mucus-penetrating ability in artificial mucus and monolayer Calu-3 cell model.Notably,a large amount of QR-SF(PF127)NPs distributed uniformly in the mice airway section,indicating the good retention of NPs in the respiratory tract.Themicemelanoma lungmetastasismodel was established,and the therapeutic effect of QR-SF(PF127)NPs was significantly improved in vivo.PF127-modified SF NPs may be a promising strategy to attenuate the interaction with mucin proteins and enhancemucus penetration efficiency in the pulmonary drug delivery system.

杜仲调控miR-127-5p对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎症因子的影响

目的探讨杜仲对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡、炎症因子的影响及其对miR-127-5p的调控作用。方法采用白细胞介素(IL)-1β诱导骨关节炎软骨细胞(HC)-OA建立细胞损伤模型,常规培养的HC-OA细胞标记为Con组,加入不同浓度(0.01、0.10、1.00 mg/mL)杜仲处理细胞,设为IL-1β+杜仲低剂量组、IL-1β+杜仲中剂量组、IL-1β+杜仲高剂量组。anti-miR-NC、miR-127-5p inhibitor转染至HC-OA细胞后加入1 mg/ml杜仲处理细胞,设为杜仲高剂量+anti-miR-NC组、杜仲高剂量+miR-127-5p组,单独IL-1β处理的细胞设为IL-1β组,噻唑蓝(MTT)、流式细胞术分别检测细胞增殖、细胞周期及胞凋亡率;实时荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)法检测miR-127-5p的表达量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-6、IL-1β的水平。结果与IL-1β组相比,IL-1β+杜仲中剂量组、IL-1β+杜仲高剂量组细胞增殖抑制率、凋亡率及miR-127-5p表达增高,IL-6、IL-1β水平下降,细胞周期阻滞于G0-G1期,差异均有统计学意义(P<0.05);与杜仲高剂量+anti-miR-NC组比较,杜仲高剂量+miR-127-5p inhibitor组细胞增殖抑制率及凋亡率降低,G0-G1期细胞比例降低(P<0.05),S期细胞比例升高,IL-6、IL-1β的水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论杜仲通过上调miR-127-5p的表达而抑制骨关节炎软骨细胞增殖、炎症反应,并可诱导细胞周期阻滞于G0-G1期及促进细胞凋亡。

略論YH127坑賓組龜腹甲鑽鑿布局與占卜形式的關係

本文梳理了YH127坑賓組龜腹甲的密集型、稀疏型、稀疏密集混合型鑽鑿布局的特色占卜形式,占卜多用一辭/貞多卜,即占卜預設時便確定了按行、按列或分區使用鑽鑿來進行占卜。同時指出YH127坑賓組龜腹甲存在跨鑽鑿布局的占卜形式。

肖斯塔科维奇声乐套曲《亚历山大·布洛克的七首浪漫诗》作品127号作品赏析

肖斯塔科维奇被誉为20世纪最杰出的俄罗斯作曲家之一,他的晚期代表作《亚历山大·布洛克七首浪漫诗》充分展示了他作为作曲家的卓越技艺和音乐创作的独特魅力。在这部声乐套曲中,肖斯塔科维奇的音乐表现出了极高的复杂性和深度,将听众带入了复杂情感和多彩音乐的梦幻世界。通过深入研究这一作品,我们能够更加深刻地领略肖斯塔科维奇声乐作品的魅力。

MiR-127-3p靶向MAPK4对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

[目的]探讨miR-127-3p对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。[方法]通过RT-qPCR检测人葡萄膜黑色素瘤组织及细胞、正常组织及细胞中miR-127-3p与MAPK4mRNA的表达;通过Lipofectamine2000说明书将mimic-NC、miR-127-3pmimic、pc-MAPK4质粒分别或联合转染进入SP6.5或OM431细胞;通过双荧光素酶报告检测miR-127-3p与MAPK4复染靶向关系;通过CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白印迹法检测AKT/mTOR通路蛋白相对表达水平。[结果]在葡萄膜黑色素瘤组织和细胞系中,miR-127-3p表达明显下调(P<0.01),而MAPK4表达明显上调(P<0.01);miR-127-3p与MAPK43′UTR区存在结合位点,miR-127-3p高表达明显抑制了含有野生型MAPK4质粒的荧光素酶活性(P<0.01),但对突变型MAPK4质粒的荧光素酶活性无影响;与Control组相比,miR-127-3pmimic组SP6.5细胞和OM431细胞增殖均明显下降(P<0.01),凋亡率均明显增加(P<0.01),划痕闭合率均明显降低(P<0.01),每视野侵袭细胞数目均明显减少(P<0.01),p-AKT(T308)/AKT、p-mTORr(S473)/mTOR蛋白表达均明显下调(P<0.01),共转染pc-MAPK4逆转上述变化。[结论]M iR-127-3p通过靶向下调MAPK4来抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,这可能与抑制AKT/mTOR通路激活有关。

Hsa-miR-127-3p在宫颈癌组织中的表达及对宫颈癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的:研究hsa-mi R-127-3p(mi R-127)在宫颈癌组织中的表达水平及其与临床病理特征之间的相关性,探讨mi R-127对宫颈癌细胞株Hela及Siha迁移和侵袭的影响。方法:Real-time PCR法检测50对宫颈癌及癌旁组织中mi R-127表达水平,分析mi R-127表达与临床病理特征的相关性。细胞转染mi R-127 mimics及mimics negative control,采用划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力。结果:mi R-127在宫颈癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.05)。mi R-127表达与淋巴脉管间隙浸润相关(P=0.048),而与年龄、FIGO分期、病理类型、分化程度、病灶大小、浸润深度、有无淋巴结转移无关(P>0.05)。过表达mi R-127可抑制Hela及Siha细胞的迁移和侵袭能力。结论:mi R127在宫颈癌组织中低表达,并且抑制宫颈癌细胞株Hela及Siha的迁移和侵袭,可能与宫颈癌的发生发展密切相关。

Pluronic F-127表面修饰生物衍生骨的体外实验研究

目的 探讨成骨细胞复合 Pluronic F- 12 7表面修饰生物衍生骨的三维培养 ,对成骨细胞活力及功能表达的影响。 方法 将新鲜猪肋骨加工制成生物衍生骨 ,应用 Pluronic F- 12 7对生物衍生骨进行表面修饰 ,然后体外复合第 3代成骨细胞三维培养。实验为 A、B和 C组。A组为单纯生物衍生骨复合成骨细胞组 ,B组为 Pluronic F- 12 7表面修饰生物衍生骨复合成骨细胞组 ,C组为单纯成骨细胞组。应用倒置相差显微镜和扫描电镜对各组成骨细胞生长及黏附进行观察 ,并对其细胞活力和碱性磷酸酶 (AL P)活性进行检测。 结果 B组成骨细胞在支架材料上黏附、伸展及生长良好 ,成骨细胞活力和 AL P活性表达与 A组成骨细胞比较均无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;A、B组与 C组比较 ,成骨细胞活力和 AL P活性均明显降低 ,有统计学意义 (P<0 .0 1)。 结论 生物衍生骨经 Pluronic F- 12 7表面修饰后具有良好的细胞相容性 ,可作为负载生物活性分子的载体修饰生物衍生骨。