缓激肽对脑胶质瘤大鼠occludin和ZO-1 mRNA的调节和机制

目的研究缓激肽(BK)对血肿瘤屏障紧密连接相关蛋白occludin和zonula occluden-1(ZO-1)mRNA表达的影响,以及转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和磷酸化CREB(p-CREB)表达水平的变化,探讨CREB在缓激肽调节occludin和ZO-1转录中的作用。方法雌性Wistar大鼠112只,随机分为7组,即假手术组、模型组、BK5min组、BK10min组、BK15min组、BK30min组、BK60min组。每组16只。建立大鼠C6胶质瘤模型,颈动脉灌注BK,应用RT-PCR法检测肿瘤微血管上紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1mRNA表达水平的变化;应用Western blot法检测肿瘤微血管中CREB和p-CREB蛋白表达水平的变化。结果与假手术组和模型组相比,BK显著降低了紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1mRNA的表达水平,BK作用15min时降低最明显(P<0.01);同时发现BK作用后CREB的表达水平明显降低,BK作用15min时降低最显著(P<0.01);p-CREB的表达水平显著升高,在BK作用15min时达到峰值(P<0.01)。结论缓激肽可在转录水平上调节紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的表达;激活CREB可能是缓激肽调节occludin和ZO-1转录的机制之一。

血清ZO-1、aβ2-GP水平与脑梗死患者梗死病灶范围及颈动脉粥样硬化程度的相关性

目的探讨血清闭锁小带蛋白1(ZO-1)、抗β2糖蛋白1抗体(aβ2-GP1)水平与脑梗死患者梗死病灶范围及颈动脉粥样硬化程度的相关性。方法选取2020年1月至2023年1月于保定市第一中心医院进行治疗的脑梗死患者103例作为研究组,另选取同期该院的体检健康者51例作为对照组。依据梗死病灶范围将脑梗死患者分为大梗死组(梗死病灶>50 cm 2),中梗死组(梗死病灶在10~50 cm 2),小梗死组(梗死病灶<10 cm 2)。依据颈动脉彩超结果将脑梗死患者分为斑块期组、增厚期组、管壁正常组。采用酶联免疫吸附试验检测血清ZO-1、aβ2-GP1水平,并比较各组ZO-1、aβ2-GP1水平变化;采用Spearman相关分析脑梗死患者血清ZO-1、aβ2-GP1水平与梗死病灶范围及颈动脉粥样硬化程度的相关性。结果研究组血清ZO-1水平低于对照组,血清aβ2-GP1水平高于对照组(P<0.05)。在103例脑梗死患者中,大梗死组有32例,中梗死组有34例,小梗死组有37例,其中小梗死组ZO-1水平高于中梗死组和大梗死组,aβ2-GP1水平低于中梗死组和大梗死组(P<0.05);中梗死组ZO-1水平高于大梗死组,aβ2-GP1水平低于大梗死组(P<0.05)。在103例脑梗死患者中,斑块期组有29例,增厚期组有38例,管壁正常组有36例,其中斑块期组血清ZO-1水平低于增厚期组和管壁正常组,aβ2-GP1水平高于增厚期组和管壁正常组(P<0.05);增厚期组血清ZO-1水平低于管壁正常组,aβ2-GP1水平高于管壁正常组(P<0.05)。Spearman相关分析发现,脑梗死患者血清ZO-1水平与颈动脉粥样硬化程度和梗死病灶范围呈负相关(P<0.05),aβ2-GP1水平与颈动脉粥样硬化程度和梗死病灶范围呈正相关(P<0.05)。结论脑梗死患者血清ZO-1和aβ2-GP1水平与颈动脉粥样硬化程度和梗死病灶范围有着明显的相关性,在脑梗死患者的病情诊断、治疗和预后中具有潜在价值。

冠心病合并糖尿病患者血清CX43、ZO-1表达及其与冠状动脉病变的关系

目的 探讨连接蛋白43 (CX43)、闭锁小带蛋白-1 (ZO-1)在冠心病(CHD)合并糖尿病(DM)患者血清中的表达情况,并分析其与冠状动脉病变的关系。方法 选取2020年7月至2022年1月在延安市中医医院接受过冠状动脉造影并确诊为CHD的145例患者为研究对象。根据是否合并DM分为CHD组(未合并DM,n=59)、CHD合并DM组(n=86),同时选取60例健康体检者为对照组。收集研究对象的一般资料,采用Gensini评分评估冠状动脉病变程度,采用实时荧光定量PCR法检测血清中CX43 m RNA表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中ZO-1水平,采用Pearson相关性分析CX43、ZO-1表达与临床指标的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清CX43、ZO-1对CHD合并DM发生的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析影响CHD合并DM发生的危险因素。结果 CHD合并DM组患者血清中ZO-1的表达水平为(3.85±0.61) ng/m L,明显高于CHD组的(2.48±0.55) ng/m L和对照组的(1.16±0.39) ng/mL,而血清中CX43的表达水平为2.75±0.63,明显低于CHD组的4.89±0.85和对照组的10.68±1.83,差异均具有统计学意义(P<0.05);同时CHD合并DM组患者的舒张压、FPG、Hb A1c较对照组和CHD组均升高,LVEF较对照组和CHD组降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);CHD合并DM组患者病变支数和Gensini评分明显多(高)于CHD组,差异均具有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析结果显示,CHD合并DM患者血清中ZO-1表达与舒张压、病变支数、FPG、Hb A1c、Gensini评分均呈正相关(P<0.05),与LVEF呈负相关(P<0.05),CX43与舒张压、病变支数、FPG、Hb A1c、Gensini评分均呈负相关(P<0.05),与LVEF呈正相关(P<0.05);经ROC分析结果显示,CX43、ZO-1预测CHD合并DM患者的曲线下面积(AUC)分别为0.953 (95%CI:0.904~0.981)、0.955(95%CI:0.908~0.983),对应的敏感度分别为83.72%、94.19%,特异度分别为96.61%、88.14%,两者联合预测的AUC为0.994 (95%CI:0.963~0.999),敏感度为98.84%,特异度为93.22%;经多因素Logistic回归分析结果显示,CX43、ZO-1、病变支数、FPG、Hb A1c、LVEF、Gensini评分均是CHD合并DM发生的危险因素(P<0.05)。结论 CHD合并DM患者血清中ZO-1表达升高,CX43表达下降,两者表达与冠状动脉病变程度密切相关。

肺癌对肠黏膜屏障的损伤机制

目的探讨肺癌对肠黏膜屏障的损伤机制。方法利用小鼠肺癌模型,检测血清丙二醛(MAD)水平;采用HE染色法在光镜下观察小鼠小肠组织的病理形态;采用免疫组织法(SABC法)分析肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1、Occluden-1的表达。结果小鼠肺部HE提示B组肺癌小鼠模型造模成功。B组小鼠肠黏膜厚度、绒毛高度低于A组,血清MDA的含量明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),表明肺癌小鼠肠黏膜通透性增加。B组小鼠肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1、Occluden-1的表达均低于A组,提示小鼠肠黏膜紧密连接的完整性是维持肠黏膜屏障功能的关键。结论肺癌小鼠存在肠黏膜损伤。肺癌小鼠缺氧后,机体存在氧化-抗氧化系统紊乱,加重肠黏膜功能损伤。