左归降糖舒心方调控自噬对糖尿病转基因MKR鼠心肌损伤的影响

目的 通过观察左归降糖舒心方对骨骼肌胰岛素样生长因子1及胰岛素双受体功能缺失(mouse overexpressing a dominant-negative IGF-I receptor specifically in muscle,MKR)糖尿病心肌病小鼠的自噬标志蛋白Beclin-1表达的影响,研究调控自噬水平对糖尿病心肌损伤的保护作用机制。方法 C57 BL小鼠设作正常组,普通饲料喂养,MKR小鼠采用高脂饲养(high-fat diet,HFD)联合多次链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射造模后,随机分为模型组、左归降糖舒心方组(中药组)、雷帕霉素组、3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)组、盐酸二甲双胍片+马来酸依那普利片组(西药组),药物干预28 d。记录小鼠一般情况及空腹血糖(fasting blood glucose,FBG);ELISA检测肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)和肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CKMB)以评价心肌损伤程度;透射电镜观察心肌形态结构的改变及自噬体;免疫组化检测心肌胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ以评估心肌纤维化程度;免疫荧光检测自噬标志蛋白Beclin-1表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠多饮多食多尿,FBG升高明显(P<0.01),cTnI、CK-MB水平及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的阳性表达均显著升高(P<0.01),Beclin-1蛋白表达明显下降(P<0.01);电镜下心肌细胞紊乱,各细胞器形态显著改变。与模型组比较,中药组小鼠FBG降低(P<0.01),cTnI、CK-MB水平与胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ表达均下降(P<0.01),Beclin-1蛋白表达增强(P<0.01);心肌细胞形态明显改善。中药组小鼠胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达显著低于西药组(P<0.01)。与模型组比较,3-MA组小鼠Beclin-1蛋白表达减弱(P<0.01), cTnI、CK-MB水平及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,雷帕霉素组小鼠Beclin-1蛋白表达增强(P<0.01), cTn I、CK-MB水平及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达水平下降(P<0.01)。结论 左归降糖舒心方可能通过上调自噬水平,减轻MKR糖尿病心肌病小鼠的心肌纤维化、改善心肌损伤,延缓糖尿病心肌病的进展。

左归降糖舒心方对转基因2型糖尿病MKR鼠心肌损伤的保护作用

目的研究左归降糖舒心方对转基因2型糖尿病MKR鼠心肌损伤的保护作用。方法以MKR鼠为研究对象,ig左归降糖舒心方对其进行30 d治疗,设野生C57BL/6鼠同期对照。用透射电镜观察小鼠心肌形态学改变;比色法测定心肌中丙二醛(MDA)的量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;全自动生化分析仪检测心功能指标肌酸激酶同工酶(CKMB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果经左归降糖舒心方治疗后,MKR鼠心肌组织形态学病变减轻,心肌细胞线粒体嵴部分消失,肌纤维排列较整齐;心肌组织MDA量下降(P<0.05、0.01),SOD活性升高(P<0.01),且呈剂量依赖性;血清CKMB和LDH活性下降(P<0.05、0.01),且呈剂量依赖性。结论左归降糖舒心方可通过抗脂质过氧化,对MKR转基因2型糖尿病MKR鼠心肌产生保护作用。

左归降糖舒心方对高脂饮食MKR小鼠糖脂代谢及炎症反应的影响

目的探讨左归降糖舒心方对高脂饮食转基因2型糖尿病MKR小鼠糖脂代谢及炎症反应的影响。方法用左归降糖舒心方干预治疗高脂饮食转基因2型糖尿病MKR小鼠,采用电化学法测定空腹血糖浓度,采用全自动生化分析仪检测血脂和炎症因子超敏C反应蛋白(hs-CRP),采用ELISA法检测血清胰岛素与肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果高脂饲料喂养的MKR小鼠空腹血糖高于MKR组,但无统计学意义(P>0.05);血清胰岛素、血脂(TC、LDL-C、HDL-C)、血清hs-CRP和TNF-α水平高于MKR组(P<0.01),而三酰甘油(TG)下降,低于MKR组(P<0.01)。经左归降糖舒心方或文迪雅干预治疗后,除左归降糖舒心方低剂量组血糖和hs-CRP下降不显著(P>0.05),其他各组MKR小鼠血糖、血清胰岛素、TG、血清hs-CRP和TNF-α水平显著下降(P<0.05、0.01),TC和LDL-C下降无统计学意义(P>0.05);左归降糖舒心方高剂量组HDL-C显著上升(P<0.01),而文迪雅组升高不显著(P>0.05)。左归降糖舒心方作用呈剂量依赖性。结论左归降糖舒心方能调节高脂饮食MKR小鼠糖脂代谢、减少炎症因子的产生、保护血管、降低糖尿病并发血管病变的风险。