基于“脾为本虚”理论探讨左归复方对2型糖尿病小鼠肠道炎症及黏膜屏障的影响

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)“脾为本虚”的理论机制及左归复方对T2DM肠道炎症及黏膜屏障的影响及作用机制。方法:采用2型糖尿病MKR模型鼠,连续给予左归复方4周,ELISA法检测胰岛素、炎症相关因子及内毒素浓度,HE染色观察肠道病理形态,RT-qPCR和Western blot检测肠道TLR4/NF-κB通路和紧密连接蛋白的基因和蛋白表达。结果:左归复方可明显降低MKR鼠血糖水平,改善胰岛素抵抗;左归复方可明显抑制炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)分泌,降低血液中内毒素浓度;左归复方还能上调肠道紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达,下调TLR4/NF-κB信号通路的mRNA和蛋白表达。结论:左归复方可通过减轻肠道慢性低度炎症和恢复肠道屏障功能从而改善MKR鼠胰岛素抵抗。

针灸联合复方左归胶囊对卵巢储备功能低下的影响及其作用机制

目的:分析针灸联合复方左归胶囊治疗卵巢储备功能低下(DOR)的临床疗效。方法:选取2018年3月至2018年10月广东省第二中医院收治的DOR患者50例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组25例。对照组采用戊酸雌二醇+黄体酮胶丸治疗,观察组采用针灸联合复方左归胶囊治疗。2组患者均连续治疗3个月。比较2组治疗后3个月、6个月、9个月的中医症状积分变化,临床疗效、血清促卵泡成熟激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)、生命质量评分(SF-36)以及药物不良反应比较。结果:2组患者治疗后中医症状积分、FSH、L均较治疗前下降,观察组下降趋势较对照组明显,差异有统计学意义(P<0.05);观察组临床治疗有效率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后9个月2组患者E2、SF-36各维度评分均较治疗前升高,且观察组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗过程中均无严重药物不良反应,观察组患者一般不良反应率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针灸联合复方左归胶囊可有效治疗DOR,且不良反应少,明显提升患者生命质量。

应用复方左归胶囊治疗卵巢储备功能下降致不孕的有效性分析

目的研究分析应用复方左归胶囊治疗卵巢储备功能下降致不孕的有效性。方法根据研究要求,在本院接收的卵巢储备功能下降致不孕患者中抽选70例,所有患者均知情本次研究的目的,按照随机原则等分为观察组与对照组,对照组35例患者采取常规西药治疗,即使用戊酸雌二醇片与黄体酮胶囊进行治疗,基于此,观察组35例患者使用复方左归胶囊进行治疗,就两组治疗效果进行对比分析。结果通过治疗,对照组总有效率为74.3%,观察组总有效率为91.4%,组间各指标比较差异明显,具有统计学意义,即P<0.05。结论应用复方左归胶囊对卵巢储备功能下降致不孕患者进行治疗,可使患者卵巢储备情况得到明显的改善,提高妊娠情况。

复方左归胶囊联合穴位贴敷治疗肾虚肝郁型卵巢储备功能下降患者的临床观察

【目的】探讨复方左归胶囊联合穴位贴敷治疗肾虚肝郁型卵巢储备功能下降(DOR)患者的临床疗效。【方法】将60例肾虚肝郁型DOR患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。对照组给予戊酸雌二醇和地屈孕酮的人工周期疗法治疗,治疗组在对照组的基础上给予复方左归胶囊联合穴位贴敷治疗,疗程为3个月经周期。观察2组患者治疗前后各项血清性激素水平、双侧卵巢窦卵泡数(AFC)及中医证候评分的变化情况,并评价2组患者的临床疗效。【结果】(1)治疗3个月经周期后,治疗组的治愈率和总有效率分别为20.0%(6/30)和93.3%(28/30),对照组分别为6.7%(2/30)和76.7%(23/30);组间比较,治疗组的治愈率和总有效率均优于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)治疗后,2组患者血清促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)水平均较治疗前明显降低(P<0.01),抗缪勒氏管激素(AMH)水平均较治疗前明显升高(P<0.01),而2组患者血清雌二醇(E2)虽较治疗前升高,但差异均无统计学意义(P>0.05);组间比较,治疗组对血清FSH、LH水平的降低作用均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(3)治疗后,2组患者的左侧、右侧和双侧AFC均较治疗前明显升高(P<0.01),且治疗组的升高作用均明显优于对照组,组间治疗后及差值比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。(4)治疗后,2组患者的月经积分、肾虚肝郁积分及中医证候总积分均较治疗前明显降低(P<0.01),且治疗组的降低作用均明显优于对照组,组间治疗后及差值比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。【结论】在人工周期疗法基础上使用复方左归胶囊联合穴位贴敷治疗肾虚肝郁型DOR的疗效优于单纯人工周期疗法,可有效提高患者的AFC,改善患者的性激素水平、月经情况和相关临床症状。

复方左归胶囊联合针灸序贯疗法对DOR患者卵泡液BDNF、TAC水平及生命质量的影响

目的:探讨自制复方左归胶囊联合针灸序贯疗法治疗DOR患者的疗效及对卵泡液BDNF、TAC水平及生命质量的影响。方法:选取2017年8月至2017年8月武汉科技大学附属普仁医院收治的DOR患者124例作为研究对象。按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组62例。所有患者均给予戊酸雌二醇+醋酸甲羟孕酮治疗,对照组在此基础上给予自制复方左归胶囊治疗,观察组在对照组基础上给予针灸序贯疗法治疗,比较2组临床疗效以及治疗前后FSH、E2、BDNF、TAC、生命质量变化情况。结果:2组治疗前FSH、E2、BDNF、TAC等水平及生命质量比较,差异无统计学意义(P>0.05);2组治疗后FSH、E2、BDNF、TAC等水平均显著降低,躯体、角色、情绪及社会功能评分均显著升高,差异均有统计学意义(P>0.05),观察组治疗后FSH、E2、BDNF、TAC等水平均低于对照组,躯体、角色、情绪及社会功能评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治愈率40.32%(25/62)、总有效率93.55%(58/62)均明显高于对照组治愈率22.58%(14/62)及总有效率79.03%(49/62),差异均有统计学意义(P<0.05)。2组临床不良反应发生率比较(11.29%:9.68%)差异无统计学意义(P>0.05)。结论:复方左归囊联合针灸序贯疗法可显著改善DOR患者血清FSH、E2,卵泡液BDNF、TAC水平,提高生命质量,临床疗效显著,值得进一步推广应用。

芪芎左归复方干预骨髓间充质干细胞外泌体对缺血性脑卒中大鼠血脑屏障通透性的影响及抗衰老作用

探讨芪芎左归复方干预骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)外泌体对衰老大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的修复作用及抗衰老的作用机制。采用D-半乳糖致衰老法联合线栓法建立衰老MCAO复合模型,实验设青年假手术组、衰老假手术组、模型组、外泌体组、中药干预的外泌体组,使用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色联合TTC染色评估模型的建立情况,术后2 h及脑缺血再灌注后48、96 h外泌体组及中药干预的外泌体组分别于尾静脉注射相应的外泌体。造模成功后2 h、3 d、7 d进行神经功能缺损评分;第7天通过新物体识别实验检测认知功能、磁共振观察脑梗死体积;伊文思蓝染色评价BBB通透性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2水平;SA-β-gal染色检测衰老细胞情况;反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测p21 mRNA的表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测端粒相对长度。结果显示,芪芎左归复方干预BMSCs外泌体能显著降低衰老MCAO大鼠脑梗死体积,改善神经功能缺损评分,提高认知功能;并能抑制MMP-2、MMP-9表达,促进紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达,降低BBB的通透性;同时还能降低p21 mRNA的表达,延长端粒长度,延缓细胞衰老。综上,芪芎左归复方干预BMSCs外泌体可能通过降低MMP-2、MMP-9含量,提高ZO-1、Occludin表达水平来修复BBB,同时其抗衰老机制可能与降低p21 mRNA的表达、限制端粒缩短有关。

基于转录组学筛选左归丸促进MC3T3-E1细胞成骨细胞增殖分化的关键基因

目的探讨左归丸治疗骨质疏松(OP)多靶点的分子机制。方法采用0、100、200、400、1000μg/mL浓度的左归丸溶液干预MC3T3-E1细胞,Western Blot检测总β-连环蛋白(β-catenin)、活性β-catenin、成骨细胞特异性转录因子2(Runx2)、成骨细胞特异性转录因子(Osx)蛋白表达,qPCR检测Runx2、Osx、Ⅱ型α胶原蛋白基因(Col2a1)、骨钙蛋白(Ocn)、β-catenin mRNA表达,CCK-8检测MC3T3-E1细胞增殖活力,碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红染色(ARS)检测MC3T3-E1细胞成骨细胞分化能力,RNA-Seq筛选左归丸促进MC3T3-E1细胞成骨细胞增殖分化的差异基因并进行qPCR验证。结果不同浓度左归丸溶液(100、200、400、1000μg/mL)干预MC3T3-E1细胞48 h,成骨标志基因(Runx2、Osx、Col2A1、Ocn、β-catenin)表达水平明显升高(P<0.05),MC3T3-E1细胞增殖率明显升高(P<0.05),ALP、ARS染色明显增强(P<0.05),其中以400μg/mL左归丸溶液干预效果最明显。当左归丸溶液干预浓度达到1000μg/mL,MC3T3-E1细胞成骨分化能力显著下降(P<0.05)。采用400μg/mL左归丸溶液干预MC3T3-E1细胞48 h,RNA-seq筛选出10个差异最大基因,其中6个上调基因和4个下调基因,qPCR验证发现,EF-Hand钙结合域9(Efcab9)、叉头框蛋白J1(Foxj1)mRNA表达水平升高(P<0.05),Ras蛋白特异性鸟嘌呤核苷酸释放因子1(RasGRF1)、生长分化因子-9(GDF9)、Ⅳ型胶原蛋白α-3链(Col4a3)mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论左归丸溶液(400μg/mL)能够调节Efcab9、FOXj1、RasGRF1、GDF-9、Col4a3 mRNA表达水平,促进MC3T3-E1细胞成骨细胞增殖分化。

参草通脉复方对慢性心力衰竭大鼠心肾功能的影响研究

背景慢性心力衰竭(CHF)是多种疾病的终末期临床综合征,治疗与干预方式有限,因而探讨一种有效、安全的药物具有重要的临床意义。目的 探讨参草通脉复方对CHF大鼠心肾功能的影响,以期为该药的临床应用提供参考。方法 2019年9月至2020年1月,选取60只SPF级12周龄雄性大鼠,采用随机数字表法将其分为空白对照组、假手术组、模型组、西药组、中药1组、中药2组、中药3组,每组8只。除空白对照组、假手术组外,其他组大鼠均制备CHF模型,模型制备成功后空白对照组、假手术组、模型组大鼠仅常规予以等容积的蒸馏水进行灌胃,西药组大鼠采用福辛普利钠片治疗,中药1组大鼠采用左归饮治疗,中药2组大鼠采用人参养荣汤治疗,中药3组大鼠采用参草通脉复方治疗,均持续干预28 d。比较七组大鼠干预前心功能指标〔心率、左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室舒张末期容积(LVEDV)〕、肾功能指标〔血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)〕及干预前后心、肾功能指标的差值。结果 七组大鼠干预前心率、LVEF、LVESV、LVEDV及BUN、Scr水平比较,差异有统计学意义(P <0.05)。中药3组大鼠干预前后心率的差值小于假手术组、模型组、西药组、中药1组、中药2组;干预前后LVEF的差值小于空白对照组,但大于假手术组、模型组、中药1组、中药2组;干预前后LVESV的差值小于假手术组、模型组、中药1组、中药2组;干预前后LVEDV的差值大于空白对照组,但小于假手术组、模型组、西药组、中药1组、中药2组;干预前后BUN水平的差值大于空白对照组、假手术组,但小于模型组、西药组、中药1组、中药2组;干预前后Scr水平的差值大于空白对照组,但小于模型组、西药组、中药1组、中药2组(P <0.05)。结论 与福辛普利钠片、左归饮、人参养荣汤相比,参草通脉复方可更有效地改善CHF大鼠的心肾功能。

左归复方对2型糖尿病妊娠大鼠胰腺CD4、TGF-β1的影响

目的:通过构建2型糖尿病(T2DM)大鼠妊娠模型,探讨左归复方对2型糖尿病妊娠大鼠模型胰腺组织CD4、TGF-β1表达的影响。方法:将40只雌性SD大鼠随机分为5组,其中4组以高糖高脂饮食并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型组,采用电化学法对各组大鼠按照血糖水平排序,随机将40只雌性SD大鼠分为正常组、中药低剂量组、中药高剂量组、达美康组、模型组,2∶1雌雄比例合笼,建立2型糖尿病大鼠妊娠模型。观察大鼠一般情况,妊娠第0.5天开始对以上5组分别予等容量0.9%氯化钠注射液、低剂量左归复方、高剂量左归复方、达美康混悬液、蒸馏水灌胃21d,观察各组大鼠胰腺组织病理形态学的变化,免疫组化法检测胰腺CD4、TGF-β1蛋白的表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组胰腺CD4水平显著升高,TGF-β1水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,中药低、高剂量组胰腺CD4水平显著降低,达美康组TGFβ1水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);中药低剂量组较达美康组CD4、TGFβ1水平低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:左归复方能够改善2型糖尿病大鼠CD4、TGF-β1蛋白的表达。