不同补肾方剂对老年前期小鼠不同脏器细胞核体外RNA转录和无细胞提取液蛋白质合成活性的影响

目的 :探讨补肾阴方左归饮和补肾阳方益肾宝对老年前期小鼠抗衰老的机制。方法 :用 1 4月龄雄性小白鼠为肾虚模型 ,观察左归饮及益肾宝对其肝、脑、肾、睾丸的细胞核体外RNA转录活性及无细胞提取液蛋白质合成活性的影响。结果 :老年前期对照组小鼠 4种脏器的细胞核体外RNA转录活性及无细胞提取液蛋白质合成活性明显低于青年组 (3月龄 )小鼠。经灌服左归饮和益肾宝 2个月后 ,两给药组小鼠 4种脏器的细胞核体外RNA转录活性及无细胞提取液蛋白质合成活性均明显高于老年前期对照组小鼠 ,而两给药组间无明显差异。结论

左归饮对围绝经期大鼠卵巢Bcl-2及Bax表达的影响

目的观察中药左归饮对围绝经期大鼠卵巢细胞凋亡指数及Bcl-2、Bax表达的影响。方法采用围绝经期大鼠动物模型,分别给予低、中、高剂量左归饮灌胃处理8 w。用TUNEL染色观察卵巢细胞凋亡指数(AI);用RT-PCR和免疫组化法检测卵巢Bcl-2、Bax mRNA及蛋白的表达。结果围绝经期大鼠卵巢细胞AI明显高于青年组(P<0.01),各剂量左归饮可使其显著降低(P<0.01或P<0.05)。与青年组相比,围绝经期大鼠卵巢Bcl-2的表达明显降低,Bax表达显著升高(P<0.01);低、中剂量左归饮可有效改善这种表达异常。结论左归饮可通过抑制围绝经期大鼠卵巢细胞过度凋亡,改善卵巢功能。不同剂量的作用机制不同,低、中剂量左归饮可通过上调Bcl-2、下调Bax的表达起作用。

左归饮对围绝经期大鼠卵巢促卵泡激素受体表达的影响及机制

目的探讨左归饮对围绝经期大鼠卵巢促卵泡激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)表达的影响及机制。方法采用围绝经期大鼠动物模型,分别给予低、中、高剂量左归饮灌胃处理8周,用RT-PCR和免疫组化法检测卵巢FSHR mRNA及蛋白的表达。未成年大鼠注射孕马血清后收集培养卵巢颗粒细胞,用RT-PCR方法检测给予不同处理因素后FSHR mRNA的表达水平。结果(1)围绝经期大鼠卵巢FSHR的表达明显低于青年组(P<0.01),给予不同剂量左归饮处理后,FSHR表达均显著升高(P<0.01)。(2)培养颗粒细胞给予不同处理因素,结果显示,与对照组相比,左归饮提取物可促进FSHR mRNA表达(P<0.01);与单纯加入左归饮提取物相比,同时加入左归饮提取物和福司考林(Forskolin)可进一步促进FSHR mRNA的表达(P<0.01),同时加入左归饮提取物和酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein则能明显削弱左归饮的促进作用。结论左归饮可通过上调围绝经期大鼠卵巢FSHR的表达,提高卵巢对卵泡刺激素的反应性,改善围绝经期卵巢功能。左归饮对FSHR mRNA表达的促进作用可能是通过激活腺苷酸环化酶-蛋白激酶A(cAMP-PKA)及酪氨酸蛋白激酶途径实现的。

补肾益精方药对老年大鼠不同组织DNA TOPOⅡ活性的影响

目的 :研究补肾益精方药对老龄大鼠肝、肾、睾丸、脾DNATOPOⅡ活性的影响 ,初步探讨补肾益精方药抗衰老的机理。方法 :用雄性老年大鼠为肾虚模型 ,观察左归饮、益肾宝对TOPOⅡ活性的影响。结果 :老年大鼠TOPOⅡ的活性明显低于青年大鼠 ,经灌喂左归饮、益肾宝后 ,老年大鼠TOPOⅡ的活性显著提高。结论 :补肾益精方药能提高老年大鼠TOPOⅡ的活性 ,起到延缓衰老的作用。

左归饮与肾阴虚证方证相应机理的蛋白质组学研究

目的:采用蛋白质组学技术在蛋白质表达水平探讨左归饮与肾阴虚证方证相应的机理。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、肾阴虚证模型组与左归饮组3组,对其肝、肾组织蛋白质提取液及血清分别进行蛋白质双向电泳并对电泳图谱进行分析,找出左归饮调节纠正的蛋白质,并进行质谱分析鉴定。结果:找出左归饮调节纠正的蛋白质点21个,质谱鉴定出18种蛋白质。结论:左归饮可以调节纠正肾阴虚证模型动物有关的糖代谢、脂肪代谢、信号传导等酶类非正常表达的蛋白质。

左归饮对围绝经期大鼠卵巢NO生成的影响及机制

目的观察左归饮对围绝经期大鼠卵巢一氧化氮(nitric oxide,NO)生成的影响及机制。方法对围绝经期大鼠动物模型,分别给予低、中、高剂量左归饮及尼尔雌醇灌胃8周,模型组及青年对照组(对照组)予生理盐水灌胃。用硝酸酶还原法、化学比色法分别检测卵巢NO含量、总一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性;用RT-PCR和免疫组化法检测卵巢诱导型NOS(inducible NOS,iNOS)、内皮型NOS(en-dothelial NOS,eNOS)及神经型NOS(neuronal NOS,nNOS)mRNA及蛋白的表达。结果 (1)模型组大鼠卵巢NO含量、总NOS活性显著低于对照组(P<0.01),中、高剂量左归饮可使其明显增高(P<0.01,P<0.05);(2)模型组大鼠卵巢中eNOS、iNOS、nNOS表达均明显低于对照组(P<0.01),中剂量左归饮可显著促进初老大鼠卵巢此3种NOS表达(P<0.01),高剂量可使iNOS、eNOS表达增高(P<0.01),而低剂量仅使iNOS表达增强(P<0.01)。结论卵巢局部eNOS、iNOS、nNOS表达的下调,导致的NOS活性降低、NO生成减少,均与围绝经期大鼠卵巢微循环血管功能受损密切相关;左归饮可通过上调eNOS、iNOS、nNOS表达,增加围绝经期大鼠卵巢NOS活性、NO生成,对衰老卵巢微循环发挥保护作用。

基于方证相应学说探寻肾阴虚证的标志蛋白质

目的:基于方证相应学说,运用蛋白质组学技术探寻肾阴虚证的标志蛋白,以期在蛋白质表达水平找到肾阴虚证的物质基础,进而阐述肾阴虚证的发生机理。方法:将昆明系雄性小鼠随机分为老年肾虚证模型组、左归饮组与青年正常对照组3组,对其肝、肾、睾丸组织蛋白质提取液及血清分别进行蛋白质双向电泳并对电泳图谱进行分析,找出左归饮调节纠正的蛋白质进行质谱分析鉴定和Wstern-blot验证。结果:找出左归饮调节纠正的蛋白质点24个,质谱鉴定出20个蛋白质。结论:找到并鉴定了一组肾阴虚证标志蛋白质,根据蛋白质的功能在蛋白质表达水平初步探讨了肾阴虚证的发生机理。

左归饮及其部分组方对老年小鼠细胞免疫功能的影响

目的:探讨左归饮及其部分组方对老年小鼠细胞免疫功能的作用。方法:将ICR健康雄性老年小鼠随机分为老年对照组(Old contrast group,OC)、左归饮组(Zuoguiyin group,ZGY)、单味熟地组(Prepared rhizome of rehmannia group,PROR)、去熟地组(None prepared rhizome of rehmannia group,NPROR)等4组。常规水煎左归饮及其部分组方,配成100g/L浓度的药水混合液,供中药各组小鼠自由饮用75天,老年对照组小鼠饮用自来水。(1)测胸腺指数,脾指数;(2)用MTT法测定脾脏T淋巴细胞增殖活性;(3)用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中IL-2水平。结果:ZGY可增强老年小鼠特异性细胞免疫功能,显著提高老年小鼠的胸腺指数和脾指数,增强T淋巴细胞活性,同时增加体内IL-2表达水平,而单味熟地仅能显著增强老年小鼠T淋巴细胞活性,对其它免疫衰老指标影响不大,去熟地组对老年小鼠的细胞免疫功能影响不显著,显示出整方抗衰老的优势。结论:左归饮可能是通过提高细胞免疫功能来发挥其抗衰老作用。

左归饮对衰老模型小鼠血清SOD GSH-Px MDA及IL-2的影响

目的:探讨左归饮延缓衰老的作用机制。方法:将50只小鼠随机分为5组,除正常对照组外均每日注射D-半乳糖造成衰老模型,同时给予不同剂量的左归饮。6周后检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)含量和白细胞介素-2(IL-2)水平。结果:模型对照组与正常对照组比较,小鼠血清中SOD、GSH-Px活性显著降低,MDA含量显著升高,IL-2水平显著下降(P<0.01)。与模型对照组比较,左归饮高、中、低剂量组小鼠血清中SOD活性显著升高(P<0.01,P<0.01,P<0.05),GSH-Px活性显著升高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.05);左归饮高、中剂量组IL-2水平显著升高(P<0.05)。结论:左归饮可通过抗氧化作用及对IL-2影响延缓衰老。

归芍首乌左归饮治疗外阴营养不良64例

用归芍首乌左归饮加减治疗外阴营养不良64例。结果:总有效率95.31%。结论:归芍首乌左归饮可滋补肝肾,养血润燥,灵活加减运用,对外阴营养不良具有较满意的疗效。

左归饮加减对小鼠血粘度及体外血栓的影响

目的 探讨左归饮加减对小鼠血流变及体外血栓的影响。方法 中老年雄性昆明种小鼠饮用该复方中药煎剂 75天后取血 ,测全血粘度、血浆粘度及体外血栓的质量。结果 以上指标均随增龄而增加 ;实验组小鼠的全血粘度、血浆粘度、体外血栓的长度及重量均明显低于中老年对照组 (P <0 0 1)。结论 左归饮加减有降低血粘度 。

响应面法优化左归饮总多糖提取工艺研究

目的:应用响应面法对左归饮中总多糖成分的提取工艺进行优化研究。方法:采用水提醇沉法对左归饮总多糖进行提取,苯酚-硫酸法测定总多糖含量,在单因素实验基础上,以总多糖含量为响应值,通过四因素三水平Box-Behnken设计实验,利用响应面法(RSM)分析确定左归饮总多糖的最佳提取工艺。结果:最佳工艺条件为料液比1:10.61,提取温度81.31℃,提取时间44.72min,醇沉后乙醇体积64.37%。结论:本实验所采用的方法操作简便,提高了总多糖提取效率,为左归饮总多糖的进一步研究奠定基础。

左归饮中总多糖对D-半乳糖致衰模型小鼠体内自由基代谢的影响

目的:探讨滋阴补肾方左归饮中总多糖对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠体内自由基代谢的影响。方法:取健康昆明种小鼠60只,随机分为六组,每组10只,雌雄各半,即对照组、模型组、阳性对照组、左归饮总多糖(低、中及高)剂量组。除对照组小鼠颈背部皮下注射生理盐水外,其余各组小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖(200mg/kg)复制亚急性衰老模型。造模同时,左归饮总多糖各剂量组小鼠分别灌胃给予不同剂量左归饮总多糖(200mg/kg、400mg/kg及800mg/kg)水溶液;阳性对照组小鼠灌胃给予维生素E(200mg/kg)油溶液;对照组与模型组分别灌胃给予等体积的蒸馏水。每日一次,连续给药8周后,小鼠眼球取血,取肝、脑组织,测定血清、肝及脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)的活性及丙二醛(MDA)水平。结果:左归饮总多糖能有效提高衰老模型小鼠血清、肝及脑组织中SOD、T-AOC、GSH-Px及CAT活性,降低MDA水平。结论:左归饮总多糖能够通过改善小鼠体内自由基代谢,发挥抗衰老作用。

左归饮合逍遥散加减方治疗黄褐斑48例疗效观察

目的:观察左归饮合逍遥散加减方治疗黄褐斑的临床疗效。方法:将89例患者随机分为两组,治疗组48例,以左归饮合逍遥散加减方治疗;对照组41例,以口服维生素C、维生素B6、维生素E治疗。两组均以1个月为1疗程,3个疗程后评定疗效。结果:总有效率治疗组为83.3%,对照组为51.2%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:左归饮合逍遥散加减方治疗黄褐斑疗效较好,值得推广应用。

左归饮加味对育龄子宫动脉栓塞术后妇女子宫内膜容受性的影响

目的观察左归饮加味治疗对育龄子宫肌瘤介入术（UAE）后患者子宫内膜容受性的影响。方法选择20～40岁因子宫肌瘤行UAE术后出现月经过少的患者,按自愿原则分为治疗组33例,给予左归饮加味治疗;对照组32例在月经期在月经期无采取药物治疗。分别于卵泡成熟日观察子宫内膜厚度及ER受体的表达。结果卵泡成熟日子宫内膜厚度治疗组高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。ER表达的阳性率治疗组高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论左归饮加味能有效改善育龄子宫肌瘤妇女UAE术后的子宫内膜容受性,为成功受孕提供条件。

左归饮“异病同治”早发性卵巢功能不全、闭经、绝经综合征的网络药理学研究

目的探讨左归饮"异病同治"早发性卵巢功能不全、闭经、绝经综合征的网络药理学研究。方法利用数据库检索获得左归饮活性成分及"异病同治"相关靶点,依托STRING数据库,构建活性成分-靶点网络图和靶点间蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图,并经Cytoscape 3.7.0软件可视化展示;通过DAVID数据库对左归饮"异病同治"交集基因进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,最终通过构建活性成分-靶点-关键通路网络图来展示左归饮"异病同治"相关作用机制。结果筛选出左归饮活性成分127个,相关靶点262个,"异病同治"靶点66个,其主要活性成分为类固醇化合物,干预的PPI核心基因靶点为肿瘤抑制蛋白P53(TP53)、信号传导转录激活因子3(STAT3)、肿瘤坏死因子(TNF)、基因蛋白激酶B1(AKT1)、白细胞介素-6(IL6)等,GO及KEGG富集分析结果主要涉及药物反应、基因表达的正调控、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、细胞缺氧反应、相同蛋白质结合、酶结合、类固醇受体活性等,其反应主要集中在细胞外液,通过缺氧诱导因子1(HIF-1)信号通路、叉形头转录因子(FoxO)信号通路等发挥作用。结论左归饮"异病同治"的多种类固醇活性成分通过多基因靶点、多信号通路来发挥"异病同治"治疗作用。

左归饮加减与波依定治疗老年单纯收缩期高血压40例疗效观察

目的 观察左归饮加减与波依定(非洛地平缓释片)对老年单纯收缩期高血压(ISH)的疗效。方法 ISH患者随机分为治疗组40例和对照组28例,分别用左归饮加减加波依定和波依定治疗。测定治疗前后血压,并观察临床症状。结果 治疗8周后,治疗组降压总有效率(85%)明显优于对照组(64.3%,P <0.05));治疗组中医临床症状疗效总有效率(92.5%)亦显著优于对照组(53.6%,P <0.01)。结论 治疗组对ISH的远期降压及中医临床症状改善方面有较好疗效,其原因可能与治疗组通过中药着重补肝肾固本,调整恢复患者机体生理功能,加之有降压功效的天麻、钩滕等中药协同波依定降压有关。

中药人工月经周期法治疗卵巢早衰随机平行对照研究

[目的]观察中药人工月经周期法治疗卵巢早衰疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例门诊患者按就诊顺序编号方法简单随机分为两组。对照组30例六味地黄丸（北京同仁堂科技发展股份有限公司）,1丸/次,2次/d,口服。治疗组30例中药人工周期法：月经后期（卵泡期,相当月经周期第4~14d）六味地黄汤或养精种玉汤、左归饮等配合五子衍宗丸,月经间期（排卵期,相当月经周期第14~16d）促排卵汤（当归、香附、木香、赤芍、乌药、丹参、桃仁、红花、菟丝子、肉苁蓉、淫羊藿等）,月经前期（黄体期,相当于月经周期第17~25d促黄体汤（熟地、山药、山萸肉、茯苓、菟丝子、枸杞子、鹿角霜、淫羊藿、当归、白芍、香附、艾叶等）或右归丸;月经期（月经周期第1~4d）活血调经汤（当归、川芎、香附、泽兰、丹参、赤芍等）加减,水煎300m L;无特殊不适症状,可以不予治疗;血瘀并发为＂痛经＂加隔下逐瘀汤加减;气滞血行不畅发为＂经行乳房胀痛＂加逍遥散;肝郁化火并发为＂经行头痛＂加羚羊钩藤汤;脾肾气虚,水湿内蕴,泛滥肌肤,并发为＂经行浮肿＂加苓桂术甘汤。连续治疗6个月为1疗程。观测临床症状、月经量、月经色、月经周期、伴随症状、FSH、E2不良反应。连续治疗6个月1疗程,判定疗效。[结果]治疗组痊愈2例,显效8例,有效11例,无效7例,总有效率80.00%。对照组痊愈0例,显效2例,有效10例,无效18例,总有效率40.00%。治疗组疗效优于对照组（P〈0.05）。生化指标、月经变化改善治疗组治疗组优于对照组（P〈0.05）。[结论]中药人工月经周期法治疗卵巢早衰,疗效满意,无不良反应,值得推广。

经典名方左归饮的历史沿革与关键信息考证

左归饮出自明代张介宾所著《景岳全书》,于2023年被收录于《古代经典名方目录(第二批)》。该研究遵循《古代经典名方关键信息考证原则》对古今文献中左归饮的方名源流、配伍组成、药物的基原、炮制、剂量、煎煮法、功效主治等关键信息进行考证。研究发现,左归饮古今配伍组成、药物剂量与炮制、煎煮服用方法等基本沿用原方。左归饮原方剂量换算为熟地黄41.03 g、山药7.46 g、枸杞子7.46 g、炙甘草3.73 g、茯苓5.595 g、山茱萸5.595 g方中药物基原基本清晰,熟地黄选用玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa的新鲜或干燥块根经酒炖法或加酒蒸法炮制加工而成;山药选用薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposita的干燥根茎;枸杞子选用茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum的干燥成熟果实;茯苓选用多孔菌科真菌茯苓Poria cocos的干燥菌核;山茱萸选用山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis的干燥成熟果肉;炙甘草选用豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis的干燥根和根茎经蜜炙法炮制而成。其服用方法为上诸药加水600 mL,煎至140 mL,空腹服用。左归饮功擅滋阴补肾,主治肾阴不足、阴衰阳盛证,如腰酸遗泄、盗汗、口燥咽干、口渴欲饮、舌光红、脉细数等证。古今多用于治疗多种以肾阴虚证为主的内、妇科及神经、循环、生殖系统疾病。但现代文献对左归饮的现代应用研究及治疗机制研究不多,且市场未见规范化左归饮制剂,开发利用程度不高,仍有很大的研究空间。

左归饮对围绝经期大鼠卵巢VEGF及SPARC表达的影响

目的:观察滋阴理气中药左归饮对围绝经期大鼠卵巢血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)表达的影响。方法:采用围绝经期大鼠动物模型,分别给予低、中、高剂量左归饮(13.78,20.67,31.00 g.kg-1)灌胃处理8周。用RT-PCR和免疫组化法检测卵巢VEGF mRNA及蛋白的表达,用RT-PCR方法检测卵巢SPARC mRNA的表达水平。结果:围绝经期大鼠卵巢VEGF mRNA的表达明显高于青年组(P<0.01),中、高剂量左归饮可有效降低其表达水平(P<0.01)。围绝经期大鼠卵巢SPARC mRNA的表达明显低于青年组(P<0.01),中、高剂量左归饮可使其表达显著升高(P<0.01)。结论:VEGF和SPARC表达异常可能在卵巢衰老过程中起一定作用。滋阴理气中药左归饮能通过下调VEGF的表达、上调SPARC的表达,从而促进衰老大鼠卵巢的血管生成,延缓卵巢衰老过程。