Mechanism of Zuojin Pill in the treatment of anxiety disorder and Major depressive disorder based on network pharmacology and molecular docking validation

Background:Zuojin Pill(ZJP)is a classic Chinese herbal prescription with good efficacy in the treatment of Anxiety disorder(AD)and Major depressive disorder(MDD).Nevertheless,the potential mechanisms of ZJP remain unclear.Based on network pharmacology and molecular docking methods,this study aims to elucidate the possible mechanism of ZJP in the treatment of AD and MDD.Methods:The components and targets of Rhizoma Coptidis and Fructus Evodiae were collected from TCMSP,ETCM,HERB,SWISSADME and STITCH databases.The disease targets related to MDD and AD were collected from DISGENET,GENECARDS and OMIM databases.Protein-protein interaction network was constructed by STRING database,GO and KEGG enrichment analysis was performed by METASCAPE database,and“drugs-components-targets network”was constructed by Cytoscape software.Molecular docking verification was performed by Sailvina2.0 software.Results:ZJP may act on AKT1,IL6,TNF and other targets through caffeine,isorhamnetin,berberine and other components,regulating the Inflammatory mediator regulation of TRP channels,Serotonergic synapse,Dopaminergic synapse,PI3K/AKT signaling pathway,and other pathways.The results of molecular docking showed that berberine had the best binding activity with the core target.Conclusion:ZJP can exert anti-anxiety and anti-depression effects through multiple components,multiple targets and multiple pathways.

Differences in Effects of Zuojin Pills(左金丸)and Its Similar Formulas on Wei Cold Model in Rats

Objective:To explore the effects of Zuojin Pills(左金丸)and its similar formulas on the stomach cold syndrome in a Wei cold model in rats.Methods:The rat Wei cold model was established by intragastric administration of glacial NaOH,and the gastric mucosa injury indices,together with the levels of motilin and gastrin in the stomach,were determined.The preventive and curative effects of Zuojin Pills and its similar formulas on gastric mucosa injury were investigated.Results:Zuojin Pills and its similar formul...

Extract of Zuojin Pill (左金丸) Induces Apoptosis of SGC-7901 Cells via Mitochondria-Dependent Pathway

Objective:To observe the effects of water extract of Zuojin Pill(左金丸,ZJP) on inhibiting the growth of human gastric cancer cell line SGC-7901 and its potential mechanism.Methods:Effects of ZJP on SGC-7901 cells growth were determined by 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide(MTT) assay,cell apoptosis and cell cycle were determined by flow cytometry,and apoptosis induction was detected by means of DNA gel electrophoresis.The cellular mechanism of drug-induced cell death was unraveled by assaying oxidative injury level of SGC-7901 cell,mitochondrial membrane potentials,expression of apoptosis-related genes,such as B cell lymphoma/lewkmia-2(Bcl-2),Bcl-2associated X protein(Bax) and cleaved caspase-3 and caspase-9.Results:ZJP exerted evident inhibitory effect on SGC-7901 cells by activating production of reactive oxygen species and elevating Bax/Bcl-2 ratio in SGC-7901 cells,leading to attenuation of mitochondrial membrane potential and DNA fragmentation.Conclusions:ZJP inhibits the cancer cell growth via activating mitochondria-dependent apoptosis pathway.ZJP can potentially serve as an antitumor agent.

柴胡疏肝散合左金丸结合西药治疗慢性糜烂性胃炎临床研究

目的分析柴胡疏肝散合左金丸加减给药结合西药对慢性糜烂性胃炎的药学机制研究。方法选取2020年2月—2021年12月在太康县人民医院接受治疗的84例慢性糜烂性胃炎患者作为观察对象,根据治疗方法的差异将患者均分为2组,其中对照组42例予以常规西药治疗,观察组42例予以西药联合柴胡疏肝散合左金丸加减治疗,对比2种治疗方法的效果,分析西药联合柴胡疏肝散合左金丸加减治疗的药学机制。结果观察组患者在经过中西药联合治疗后治疗有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论针对慢性糜烂性胃炎患者应用柴胡疏肝散合左金丸加减给药结合西药治疗效果显著,能够有效提高患者的治疗效果,值得临床推广应用。

柴胡疏肝散合左金丸治疗肝胃郁热型难治性胃食管反流病临床研究

目的观察柴胡疏肝散合左金丸治疗难治性胃食管反流病(RGERD)(肝胃郁热型)的临床疗效。方法将112例符合标准的患者随机分为治疗组及对照组各56例,对照组予雷贝拉唑及莫沙必利,治疗组在对照组基础上加服柴胡疏肝散合左金丸。治疗8周后,观察2组患者的症状、内镜下食管炎症、Gerd⁃Q积分、SAS评分、SDS评分、GAS的变化及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗组总有效率优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组中医证候、内镜下食管黏膜炎症、Gerd⁃Q、SAS评分、SDS评分均比治疗前降低(P<0.05),2组GAS水平均上升(P<0.05),治疗组更显著(P<0.05)。2组患者均未见明显不良反应。结论柴胡疏肝散合左金丸治疗肝胃郁热型RGERD疗效显著,安全性良好。

基于网络药理学研究左金丸治疗溃疡性结肠炎的作用机制

目的:运用网络药理学方法探讨左金丸治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:从中药系统药理学数据库、分析平台(TCMSP)和ETCM中分别检索吴茱萸和黄连的有效成分及其相关的靶点名,通过Uniprot数据库将靶点的蛋白名标准化。借助在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、Genecards数据库、Drugbank数据库和GAD数据库获取UC相关靶点。将中药与疾病的交集靶点在string数据库和Cytoscape软件进行蛋白互作(PPI)分析并筛选核心靶点。基于GO数据库和KEGG通路数据库进行基因功能和通路富集。结果:发现左金丸中槲皮素、小檗碱、β-谷甾醇、吴茱萸次碱、吴茱萸碱、巴马汀等53种有效成分可能参与了对UC的治疗,作用于ESR1、PIK3R1、IL6、PIK3CA、JUN、TNF、EGF等177种靶点,通过对炎症反应、分解代谢过程、血管生成、细胞凋亡等多种过程进行调节,并且与PI3K-Akt、JAK-STAT、Toll-like、IL-17、TNF、HIF-1、mTOR、NF-kappa B等通路有着密切关系。结论:通过研究,为左金丸治疗UC的作用机制的阐明提供了新的方法和思路,体现了中药“多成分-多靶点-多途径”的治疗特点,其具体机制及物质基础还需通过更深入的实验研究加以验证。

中西医结合治疗90例反流性食管炎的临床疗效观察

目的:观察西医联合中药协定方治疗反流性食管炎患者的临床疗效。方法:将90例反流性食管炎患者随机分成研究组和对照组,各45例。对照组予以奥美拉唑、莫沙必利、铝碳酸镁片3种药物进行联合用药治疗,研究组则在对照组患者的治疗基础上给予中药协定方(加味左金丸)进行治疗,比较两组的临床疗效。结果:研究组中医症状评分、不良反应发生率低于对照组;总有效率高于对照组(P<0.05)。结论:在西医常规的抑酸、促胃动力及胃黏膜保护等治疗基础上辅以中药协定方治疗反流性食管炎临床疗效较好,有一定的临床推广价值。

基于网络药理学探讨左金丸治疗功能性消化不良作用机制

目的 基于网络药理学分析左金丸治疗功能性消化不良(FD)的作用靶点和分子机制。方法 检索中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获得左金丸的有效成分及作用靶点,检索GeneCards数据库获取FD的疾病靶点,并使用韦恩图获取药物与疾病的共同靶点。采用STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析,使用Cytoscape 3.7.1进行PPI网络拓扑分析。使用Metascape数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析。采用Cytoscape 3.7.1构建“药物-有效成分-关键靶点-通路”网络。结果 获得左金丸33个有效成分,作用靶点203个,其关键有效成分为槲皮素、异鼠李素、β-谷甾醇、吴茱萸次碱、氢化小檗碱等,关键靶点为AKT1、TP53、TNF、IL6、VEGFA。GO功能富集到1 989个条目,KEGG通路富集到202条通路,主要包括癌症通路、脂质与动脉粥样硬化、PI3K-Akt信号通路、乙型肝炎等。结论 左金丸治疗FD具有多成分、多靶点、多通路的特点,通过调控AKT1、TP53、TNF、IL6、VEGFA等核心靶点和PI3K-Akt信号通路等,发挥抗凋亡、抗炎、抗抑郁、改善胃肠功能等作用。

基于生物信息学和网络药理学探究左金丸治疗幽门螺杆菌相关性溃疡的分子机制

目的运用网络药理学和生物信息学方法探究左金丸治疗幽门螺杆菌(Hp)相关性溃疡(PU)所涉及的分子机制及关键基因。方法通过TCMSP数据库筛选左金丸的活性成分及作用靶点;通过GEO数据库检索Hp感染胃黏膜上皮的基因表达谱芯片数据;对芯片数据进行均一化处理并分析差异表达microRNA;利用Starbase搜索显著性差异表达microRNA靶基因;提取左金丸作用靶点和Hp相关性PU关键致病基因的交集;采用Metascape对交集基因进行GO功能分析;运用GSEA对交集基因进行KEGG通路富集分析。结果检索到44种左金丸活性成分和891个作用靶点;从GSE19769芯片中筛选出10个显著性差异表达microRNA;查找到显著性差异表达microRNA靶基因684个;取两者交集得到BIRC5、HIF1A、HSP90AB1等特异性基因;GO功能分析涉及翻译后蛋白修饰、细胞周期调节等生物过程,细胞质、细胞核等细胞成分,蛋白连接酶结合、蛋白质结合等分子功能;左金丸治疗Hp相关性PU涉及的信号通路包括MAPK信号通路、WNT信号通路、癌症相关通路等。结论结果表明左金丸治疗Hp相关性PU主要通过调控BIRC5、HIF1A、HSP90AB1等关键基因参与构成的MAPK信号通路、WNT信号通路等发挥作用。

加味吴茱萸汤联合左金丸辅助治疗慢性浅表性胃炎患者临床观察

目的观察加味吴茱萸汤联合左金丸在慢性浅表性胃炎(寒热错杂型)中的治疗效果。方法选取2021年6月—2022年6月山东烟台茽和堂血管病中医医院诊治的72例慢性浅表性胃炎(寒热错杂型)患者,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各36例。对照组行常规西医治疗,观察组在对照组基础上采用加味吴茱萸汤联合左金丸治疗,两组均连续治疗1个月。比较两组临床疗效、中医证候评分、炎性因子水平及不良反应。结果观察组治疗总有效率(94.44%)高于对照组(77.78%,P<0.05)。治疗后,两组胃痛、神倦乏力、嘈杂吐酸、口苦评分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.01);两组白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平均较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.01)。两组不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论加味吴茱萸汤联合左金丸辅助治疗慢性浅表性胃炎(寒热错杂型)作用明显,可有效减轻患者临床症状,降低炎性因子水平,且无严重不良反应,具有较高的临床应用价值。

左金丸和反左金对大鼠胃粘膜保护机制的比较研究

【目的】比较左金丸(m_(黄连):m_(吴茱萸)=6:1)和反左金(m_(黄连):m_(吴茱萸)=1:6)对胃分泌和粘液屏障的影响。【方法】采用Shay氏大鼠幽门结扎模型,大鼠分为生理盐水对照组,左金丸1.4g/kg、2.8g/kg组以及反左金1.4g/kg、2.8g/kg组,分别从十二指肠给药,观察各组大鼠的胃分泌和粘液合成的变化。【结果】1.4g/kg、2.8g/kg左金丸和反左金都能抑制胃液分泌、降低总酸排出量及胃蛋白酶活性,且随着剂量增加药效更明显;左金丸和反左金都能增加胃壁结合粘液含量,对胃液中粘液成分也有增加的趋势。【结论】左金丸和反左金可能通过影响胃分泌和粘液合成来保护胃粘膜。

反相高效液相色谱法测定加味左金丸中盐酸小檗碱和吴茱萸次碱的含量

目的 建立同时测定加味左金丸中盐酸小檗碱和吴茱萸次碱含量的反相离子对液相色谱法.方法 采用Agilent ZORBAX SB-C18柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,甲醇-乙腈-15 mmol·L^-1 SDS水溶液（20：40：40,pH 7.5）流动相,检测波长343 nm.结果 盐酸小檗碱和吴茱萸次碱的线性范围分别为12～120和0.45～6.81 mg·L^-1,盐酸小檗碱的回收率为99.21%,RSD=1.60%;吴茱萸次碱的回收率为101.40%,RSD=3.32%.结论 采用本方法同时测定加味左金丸中盐酸小檗碱和吴茱萸次碱含量具有简便、快速、准确等优点.

黄连与吴茱萸不同比例组成的方剂的不同药理作用研究

【目的】探讨黄连与吴茱萸不同比例组成的方剂的不同药理作用。【方法】用党参与黄芪给大鼠灌胃造成类热证模型,观察不同比例配伍的黄连与吴茱萸对它们的影响。【结果】黄连与吴茱萸比例为６:１的左金丸和２:１的甘露散有显著的消除类热证的作用,ｌ:ｌ的茱萸丸对肝细胞超微结构的影响中表现出有减轻类热证的作用,而体温(ｔ)、血清皮质醇(Ｃｏｒ)、１７－羟皮质类固醇(１７－ＯＨＣＳ)的改变则未见减轻类热证或增强类热证的作用。【结论】认为不同比例配伍的黄连与吴茱萸对类热证的病理改变有不同的影响。

左金丸总生物碱对束缚水浸应激性胃溃疡模型大鼠神经体液调节的影响

目的左金丸是黄连和吴茱萸按6∶1配伍组成,临床常用于胃溃疡的治疗。该文主要探讨左金丸总生物碱(ZJP-TA)对束缚水浸应激性胃溃疡模型大鼠神经体液调节的影响。方法采用束缚水浸法复制大鼠胃溃疡模型,测定ZJP-TA对大鼠胃溃疡指数,胃黏膜TNF-α含量的影响。测定大鼠海马、皮质、下丘脑、纹状体等脑区中单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量以及肾上腺组织中NE和肾上腺素(E)含量的影响。结果预先口服ZJPTA可明显降低应激性胃溃疡大鼠的溃疡指数,明显降低胃黏膜中TNF-α的含量。各剂量ZJPTA可不同程度降低大鼠脑组织单胺类神经递质的浓度,与模型组比较差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。模型组肾上腺组织NE和E含量明显升高,ZJPTA能明显抑制其升高(P<0.05或P<0.01)。结论 ZJPTA可通过神经体液调节作用,对抗应激性胃溃疡损伤。

LC-MS/MS同时测定左金丸和香连丸中6种生物碱的含量

目的:建立左金丸(黄连、吴茱萸)和香连丸(黄连(吴茱萸制)、木香)中6种生物碱含量的LC-MS/MS测定方法。方法:色谱条件:Phenomenex Luna C18柱(5μm,250 mm×4.60 mm);乙腈-水(4 mmol/L乙酸铵和0.08%甲酸)为流动相,梯度洗脱;质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测,MRM模式。结果:左金丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的平均回收率分别为101.0%,101.3%、101.2%、100.2%、99.6%、99.7%,RSD分别为1.1%、1.8%、0.98%、1.0%、1.3%、1.3%,香连丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱和吴茱萸碱的平均回收率分别为101.6%、99.8%、101.9%、101.0%、101.3%,RSD分别为1.0%、1.9%、0.75%、1.1%、1.9%。结论:本方法可同时测定左金丸和香连丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量,具有快速、简便等特点。

大鼠寒热型胃粘膜损伤模型的研究

目的 :探索建立证病结合的寒热胃粘膜损伤大鼠模型。方法 :SD大鼠用无水乙醇造成胃热模型 ,用冰NaOH造成胃凉、胃寒模型 ,并观察左金丸与反左金在模型上的药效反应。结果 :形态和组织学观察 ,左金丸都明显减轻乙醇模型大鼠的急性胃粘膜损伤 ,而冰 +NaOH模型中反左金与左金丸形态上具有相当的药效 ,病理检测反左金明显优于左金丸。结论 :无水乙醇和冰NaOH造成的寒热胃粘膜损伤模型可用于评价相应药物和方剂的药效。

左金丸对应激性溃疡大鼠下丘脑室旁核c-fos及HPA轴的调节作用

目的 :研究应激性溃疡中枢调节机制及其与丘脑垂体肾上腺皮质 (HPA)轴间的关系 ,并观察左金丸的预防作用。方法 :采用改良束缚浸水法制作应激性溃疡模型。免疫组化方法检测下丘脑室旁核 c fos;用原位杂交法检测下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素 (CRH) m RNA;用放射免疫方法检测血浆皮质醇(CORT)和促肾上腺皮质激素 (ACTH) ;同时检测胃液 p H值、溃疡指数 (IU)等指标。结果 :1模型组各指标与正常组比较均有显著性差异 (P均 <0 .0 1)。 2左金丸能够显著抑制 c fos、CRH m RNA表达 ,下调 ACTH、CORT,升高胃液 p H值 ,降低 IU(P均 <0 .0 5 )。 3雷尼替丁能够显著升高胃液 p H值 ,降低 IU(P均 <0 .0 1)。结论 :左金丸通过抑制下丘脑 c fos表达和 HPA轴通路启动 ,有效防治应激性溃疡。

辛开苦降之法 调理枢机之效——张伯礼教授临床应用左金丸举隅

左金丸多用于肝经火旺之证,后世医家基于临床实践不断加深对左金丸临床功效的认识。张伯礼教授指出:"左金丸治肝火之功,是通过调畅中焦气机而实现的。辛开苦降是调理枢机之法。"应重视传承经典方论的临床指导作用,更好服务于临床治疗。

左金丸及反左金丸对实验性大肠癌不同时期甲基转移酶表达的影响

目的:探讨左金丸及反左金丸对大肠癌发生、发展的干预作用,及在大肠癌不同时期对甲基转移酶表达的影响.方法:在180只大鼠左肩胛骨侧皮下注射1,2-二甲基酰肼(1,2-DMH)25mg/kg,每周1次,连续注射12wk.随机将大鼠分为3组:左金丸组、反左金丸组和对照组.从第1次注射DMH的第2天开始,左金丸组和反左金丸组每天以中药汤剂1.4g/kg灌胃,对照组灌服同等体积的生理盐水,每日1次,连续34wk.分别在第11、21、34周,每组取部分大鼠脱颈处死,通过病理学观察左金丸和反左金丸对大鼠大肠癌发生发展的干预作用,实时荧光定量PCR法检测不同肿瘤发展时期Dnmt1、Dnmt3a及Dnmt3bmRNA的表达.结果:左金丸和反左金丸均能在肿瘤发生的早期显著抑制癌症的进程,左金丸作用优于反左金丸,但后期(34wk),二者的作用不明显.对照组和中药组Dnmt1、Dnmt3a表达没有明显变化.对照组中Dnmt3b的表达明显高于中药组(4.784vs2.613,P<0.01),且随癌变进程的深入,Dnmt3b表达量增高.结论:左金丸和反左金丸均可以有效阻碍早期大肠癌的发生和发展.Dnmt3b参与了组织恶变的过程,其表达的调控可能是中药干预肿瘤进程的机制之一.

左金丸及其主要单体成分对大肠癌的干预作用

目的:探讨左金丸及其主要单体成分在体内体外对大肠癌发生发展的干预作用.方法:培养人大肠癌细胞株HT29,选择处于对数生长期的细胞,分别用不同浓度的盐酸小檗碱(26.25、52.5、105、210、420μmol/L)、吴茱萸碱(5、10、15、20、25、30μmol/L)处理HT29细胞24、48、72、96h,筛选最适作用浓度与时间,在这一浓度与时间作用下,用活细胞计数法检测左金丸的主要单体成分小檗碱和吴茱萸碱对HT29细胞增殖的抑制作用,TRAP法检测HT29细胞端粒酶活性,取HT29细胞,用生理盐水制成单细胞悬液,调整细胞浓度为5×105/0.2mL,注射于裸鼠左侧胁腹部皮下,制作HT29细胞荷瘤裸鼠肿瘤模型.随机将裸鼠分为4组:对照组、左金丸组、AZT组和协同组,观察左金丸和叠氮胸苷(AZT)对瘤体生长及端粒酶活性的影响.利用致癌剂1,2-二甲基酰肼(DMH,25mg/kg)诱导大鼠大肠癌模型,同样随机将大鼠分为4组,观察左金丸和AZT对大鼠大肠癌发生发展的干预作用.结果:在离体实验中,处理24-72h,105μmol/L盐酸小檗碱和15μmol/L吴茱萸碱对HT29细胞增殖的抑制作用呈成正向的线性量效关系,吴茱萸碱(7.5、15、30μmol/L)作用后的抑制率分别为39.3%±2.13%,52.8%±5.34%和64.1%±7.19%,盐酸小檗碱(52.5、105、210μmol/L)作用后的抑制率分别为44.1%±3.97%,55.9%±4.12%和65.3%±6.94%.105μmol/L小檗碱和15μmol/L吴茱萸碱处理HT29细胞72h,小檗碱和吴茱萸碱可以有效抑制HT29细胞端粒酶的活性.在荷瘤裸鼠实验中,左金丸和AZT对瘤体大小无明显影响,对端粒酶活性有微弱影响.第11周,对照组、左金丸组、AZT组和协同组大鼠肿瘤发生率分别为20%、0%,10%和10%,左金丸作用优于AZT,但34wk各组间无明显差异.结论:离体实验中,左金丸的主要成分可以有效抑制HT29细胞的增殖和端粒酶的活性;裸鼠移植瘤实验中,观察不到左金丸的药效;1,2-DMH诱导大肠癌实验模型中,左金丸可以有效阻碍早期癌症的发生和发展.