聚合膜固定葡萄糖氧化酶及酶活性分析

采用电化学石英晶振阻抗分析法,测定了中性缓冲溶液中葡萄糖氧化酶在去甲肾上腺素电氧化聚合膜中固定化酶的量;并结合安培法,定量检测了固定化酶(ESAi)和游离酶(ESAn)的比活性以及固定化酶相对于游离酶的酶相对比活性(ERA)。另外,采用扫描电化学显微镜(SECM)监测了酶电极检测电位下"泄漏"H2O2的氧化电流,并分析该泄漏电流的存在可能是引起酶电极ERA偏低的重要原因。

两性离子聚合物的制备及其对酶活性的影响

以具有生物相容性的羧基甜菜碱甲基丙烯酸酯(CBMA)为单体、过硫酸铵为引发剂、亚硫酸钠为还原剂,采用自由基聚合工艺制备了羧基甜菜碱两性离子聚合物PCBMA,并对其进行核磁氢谱和凝胶渗透色谱表征,结果显示聚合物具有预期结构。进一步以葡萄糖氧化酶(GOD)为模型酶,分别制备了添加和未添加聚合物PCBMA的GOD溶液,在四种不同温度下探究酶的活性与时间的关系。结果表明,添加PCBMA的GOD在65℃条件下经过12h后,其活性浓度是对照样GOD 1h时活性浓度的103%;未添加PCBMA的对照样12h后GOD活性浓度仅为1h时的35%。羧基甜菜碱两性离子聚合物能够有效地维持酶的活性,并且温度越高聚合物对酶活性维持的效果越明显。