几种常见Bt菌株中的ZwittermicinA活性比较

ZwittermicinA(ZwA)是一种水溶性抗生素,对微生物具有较强的抑制作用。以草生欧文氏杆菌为指示菌,采用抑菌圈法,检测了5种国际标准Bt菌株Bt22、Bt185、G03、HD-1和HD-73不同发酵时刻发酵液的抑菌效果,通过数据分析,确定菌株代谢产物ZwA的初始产生时间,及ZwA的最佳获得时间。结果表明,Bt185、G03、HD-1和HD-73四种菌株初始产生ZwA的时间差异不大,在20h左右,Bt22最晚,在28h;ZwA的最佳获得时间依次为Bt22(68h)>HD-73(64h)=G03(64 h)>Bt185(60 h)>HD-1(52 h);在最佳获得时间时,Bt185产生的ZwA产量最高,为1.63 mg/mL,其它4种菌的ZwA产量依次为HD-73(0.96 mg/mL)>Bt22(0.92 mg/mL)>G03(0.89 mg/mL)>HD-1(0.47 mg/mL)。

Zwittermicin A对Cry1Ac杀虫活性的增效作用

Zwittermicin A(ZwA)能够增加苏云金杆菌(Bacillus thuringienesis,Bt)Cry1Ac蛋白的杀虫活性。生物测定使用生长在人工饲料上的甜菜夜蛾幼虫。用Cry1Ac蛋白单独处理甜菜夜蛾初孵幼虫,体重抑制活性明显,杀虫活性较低;单独用ZwA处理时无杀虫活性。当ZwA浓度为0.1 mg/mL、Cry1Ac浓度为1 mg/mL时,48 h校正死亡率达90%。对甜菜夜蛾5龄幼虫进行生物测定,当用25μg ZwA和5μg Cry1Ac分别饲喂试虫时,无杀虫活性;用25μg ZwA和5μgCry1Ac同时饲喂试虫时,84 h试虫全部死亡。对甜菜夜蛾5龄幼虫中肠组织切片分析发现,口服25μg ZwA和5μgCry1Ac的幼虫12 h,中肠变细小,中肠壁变厚,围食膜无法正常形成;36 h后中肠壁逐渐恢复正常,围食膜重新形成。

光照等条件对G03菌株繁殖及其ZwA合成的影响

以苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) G03菌株为对象,研究光照、碳源、氮源、无机盐、培养基初始pH和培养温度等条件对该菌株繁殖及其代谢产物杀虫晶体蛋白和Zwittermicin A(ZwA)活性的影响。结果表明,G03菌株发酵培养基的最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母粉,最适无机盐为氯化钠,最适培养温度为30℃,最适的初始pH为7～7. 5; ZwA的最适合成条件与之相同,但是其最适初始pH为8. 0;菌株在4 000lux下发酵40 h时繁殖量最大;杀虫晶体蛋白积累量在4 000 lux下发酵55 h时最大;黑暗条件下ZwA的积累量较2 000 lux光强下的大。