ADAM28反义核酸对人牙髓干细胞生物学特性的影响

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)对人牙髓干细胞(HDPSCs)增殖、分化、凋亡特性的影响并分析可能的作用机制。方法:体外分离培养、鉴定HDPSCs,将FITC荧光标记的ADAM28反义核酸(AS-ODN)和正义对照(S-ODN)分别转染HDPSCs,用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Westernblot)检测ADAM28AS-ODN转染48h后的封闭效率,应用四唑盐(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)分别检测实验各组HDPSCs的增殖活性、碱性磷酸酶(AKP)的分泌活性以及细胞周期分布和凋亡百分比。采用SPSS13.0软件包的SNK检验进行统计学分析。结果:AS-ODN转染组ADAM28mRNA和蛋白的表达水平均明显下调(P<0.05),细胞增殖活性、增殖指数明显降低(P<0.05),碱性磷酸酶(AKP)分泌水平和细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。结论:ADAM28AS-ODN可显著抑制HDPSCs的增殖并影响细胞周期的变化,促进AKP的分泌活性并诱导HDPSCs的凋亡。

结直肠癌ADAMs表达谱及其ADAM-28的表达及意义

目的探讨金属蛋白酶解离素(ADAMs)家族成员ADAM-8、ADAM-9、ADAM-10、ADAM-12、ADAM-15、ADAM-17、ADAM-19、ADAM-28、ADAM-33在结直肠癌中的表达分布,并分析ADAM-28表达与结直肠癌临床病理特征的关系及其对预后的影响。方法实时荧光定量PCR(QPCR)检测6例新鲜结直肠癌组织和对应癌旁组织中ADAMs mRNA的表达,Western blotting检测ADAM-28蛋白在上述样本中的表达。免疫组化法检测ADAM-28在218例结直肠癌组织中的表达,分析ADAM-28表达与临床病理特征和预后的关系。结果 ADAM-8、ADAM-9、ADAM-17、ADAM-28和ADAM-33 mRNAs在结直肠癌组织中表达升高,ADAM-12表达下调,ADAM-10、ADAM-15和ADAM-19无明显变化。ADAM-28蛋白表达在结直肠癌组织中也升高。免疫组化检测显示,结直肠癌组织中ADAM-28的阳性表达率为68.8%(150/218),其表达与淋巴结转移(P=0.032)、TNM分期(P=0.032)和分化程度(P=0.019)有关。ADAM-28阳性表达者的中位总生存时间(OS)明显劣于ADAM阴性表达者(36.75个月vs.95.10个月),差异有统计学意义(P<0.001)。Cox多因素分析显示,ADAM-28是影响OS的独立因素(P<0.05)。结论 ADAM-28表达与结直肠癌的发生、发展密切相关,是潜在评估结直肠癌预后的预测因子。

ADAM28对人牙龈成纤维细胞表达CAP、OPN的影响

目的:研究金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)和正义对照(S-ODN)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)表达牙骨质附着蛋白(CAP)和骨桥蛋白(OPN)的影响。方法:采用细胞培养、基因转染、免疫细胞化学和图像分析技术检测ADAM28对HGFs表达CAP、OPN的影响。结果:ADAM28 AS-ODN转染HGFs后,细胞内CAP、OPN的表达显著降低(P<0.05),ADAM28 S-ODN转染HGFs后,细胞内CAP、OPN的表达显著升高(P<0.05)。结论:ADAM28 AS-ODN可有效封闭HGFs内CAP、OPN的表达。