β_(2)-肾上腺素能受体与神经丝在山羊脾中的分布和共定位研究

为探讨肾上腺素能神经与脾功能联系,用免疫组织化学SP法和免疫荧光双标记法观察β_(2)-肾上腺素能受体(β_(2)-AR)和羊脾神经丝(NFs)在山羊脾中的表达分布特点。结果显示,β_(2)-AR免疫反应阳性产物在山羊脾中分布广泛,白髓、红髓、中央动脉、被膜、小梁、边缘区均有不同程度的着色,白髓中免疫组化染色阳性相对表达量极显著高于红髓(P<0.01),极极显著高于边缘区和被膜(P<0.001);红髓中免疫组化染色阳性相对表达量极显著高于边缘区和被膜(P<0.01);NFs免疫反应阳性产物在山羊脾中红髓、被膜、小梁、小血管、白髓和边缘区均有不同程度的着色,红髓中免疫组化染色阳性相对表达量显著高于白髓(P<0.05),极显著高于边缘区(P<0.01);被膜中免疫组化染色阳性相对表达量极显著高于边缘区和白髓(P<0.01)。共定位研究表明β_(2)-AR和NFs在3个区域存在共定位关系,在平滑肌细胞构成的被膜和小梁中存在,在富含平滑肌细胞的小血管(如中央动脉)中存在,在T、B淋巴细胞丰富区域(如白髓、红髓和边缘区)存在。表明交感-肾上腺素能神经系统对机体免疫具有调控作用。β_(2)-AR和NFs共定位结构证明脾受到交感-肾上腺素能神经的调控,交感神经纤维通过释放神经递质-去甲肾上腺素,作用于脾上的肾上腺素能受体实现功能调控。

β_(2)肾上腺素受体在erastin诱导的前列腺细胞铁死亡和自噬中的作用及其机制

目的探讨β2肾上腺素受体(ADRB2)在铁死亡激活剂erastin(Era)诱导的前列腺癌细胞铁死亡、自噬中的作用及可能的分子机制。方法取慢病毒或对照感染的PC-3细胞,设置sh-NC组(正常培养)、sh-NC+Era组(10μmol/L Era处理24 h)、sh-ADRB2组(正常培养)与sh-ADRB2+Era组(10μmol/L Era处理24 h)。采用CCK-8法检测铁死亡激活剂Era和铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)处理后的细胞存活率,透射电镜观察细胞形态变化,丙二醛(MDA)检测试剂盒检测MDA含量,铁离子比色法检测铁离子含量。Western blotting检测胱氨酸谷氨酸转运体(XCT)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)、p62、LC3、c-Jun N-末端激酶(JNK)、c-Jun、p-c-Jun蛋白表达水平。注射ADRB2敲低的PC-3稳转株,构建裸鼠成瘤模型并用Era处理,分为sh-NC组、sh-NC+Era组、sh-ADRB2组与sh-ADRB2+Era组,每组4只。隔天记录瘤体体积及最终瘤体重量,并采用免疫组化检测ADRB2、JNK、c-Jun、p-c-Jun的表达情况。结果Era处理后PC-3细胞存活率下降(P<0.01),加用Fer-1处理后PC-3细胞存活率恢复(P<0.01)。透射电镜下可见,Era处理后PC-3细胞发生铁死亡和自噬形态学改变,MDA和铁离子含量增高(P<0.05或P<0.01);敲低ADRB2并用Era处理后PC-3细胞存活率进一步下降(P<0.05),MDA和铁离子含量进一步升高(P<0.01),FTH1、XCT、GPX4和LC3蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),p62蛋白和JNK通路相关基因JNK、c-Jun、p-c-Jun蛋白表达水平升高(P<0.01);JNK抑制剂处理后,FTH1、XCT和LC3表达水平升高,p62表达水平降低(P<0.01)。PC-3裸鼠模型中,sh-ADRB2+Era组瘤体体积明显小于sh-NC+Era组和sh-ADRB2组(P<0.05或P<0.01);免疫组化检测结果显示,与sh-NC组比较,sh-ADRB2组ADRB2蛋白表达水平降低(P<0.05),JNK、c-Jun和p-c-Jun蛋白表达水平升高(P<0.01);与sh-NC+Era组比较,sh-ADRB2+Era组ADRB2蛋白表达水平降低,JNK、c-Jun和p-c-Jun蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论ADRB2可能通过JNK/c-Jun通路调控前列腺癌细胞中Era诱导的铁死亡和自噬。

α_(1A)-肾上腺素能受体与增强型绿色荧光蛋白标记的活化T细胞核因子2稳定共表达细胞的构建

目的建立α_(1A)-肾上腺素能受体(α_(1A)-AR)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的活化T细胞核因子2(NFAT2)稳定共表达细胞。方法①将pcDNA3.1-α_(1A)-AR-3×FLAG重组质粒转染至U2OS-EGFPNFAT2细胞,经潮霉素B(Hygro-B)200 mg·L^(-1)压力筛选后加入α_(1A)-AR激动剂去甲肾上腺素(NE,10μmol·L^(-1))孵育30 min,通过高内涵筛选系统检测细胞核内绿色荧光强度,验证EGFP-NFAT2核转位,筛选得到稳定表达α_(1A)-AR的U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞。②采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹法检测该细胞和对照细胞U2OS-EGFP-NFAT2中α_(1A)-AR mRNA和蛋白的表达水平。③将U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞接种于96孔板,分别加入NE(10^(-8)~10^(-5) mol·L^(-1))或α2-AR激动剂右美托咪定(DMED,10^^(-8.8)~10^(-5) mol·L^(-1))孵育30 min,通过高内涵筛选系统检测EGFP-NFAT2核转位。④将U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞分为溶剂对照组、α1-AR拮抗剂萘派地尔(1μmol·L^(-1))组、NE(1μmol·L^(-1))组、萘派地尔+NE(各1μmol·L^(-1)共孵育)组、α2-AR拮抗剂阿替美唑(0.1μmol·L^(-1))组、DMED(0.1μmol·L^(-1))组、阿替美唑+DMED(各0.1μmol·L^(-1)共孵育)组和萘派地尔+DMED(萘派地尔1μmol·L^(-1)与DMED 0.1μmol·L^(-1)共孵育)组,药物孵育时间均为30 min,通过高内涵筛选系统检测EGFP-NFAT2核转位,验证该细胞α_(1A)-AR功能的特异性。结果①Hygro-B压力筛选得到58株U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞,NE 10μmol·L^(-1)孵育后,其中50号细胞核内绿色荧光强度最强,故选定其为稳定共表达α_(1A)-AR和EGFPNFAT2的U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞。②Western印迹法结果显示,U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞可明显表达α_(1A)-AR蛋白,而对照细胞U2OS-EGFP-NFAT2中未见α_(1A)-AR蛋白表达。RT-qPCR结果显示,该细胞在传代5~20代内α_(1A)-AR mRNA均稳定表达,其表达水平为对照细胞的500~800倍。③NE或DMED使U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞中EGFP-NFAT2核转位明显增加,半数有效浓度(EC50)分别为5.94×10^(-7)和6.15×10^(-8) mol·L^(-1)。④与溶剂对照组和萘派地尔组比较,NE组U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞EGFP-NFAT2核转位明显增强(P<0.01),而萘派地尔+NE组EGFP-NFAT2核转位较NE组明显减弱(P<0.01)。与溶剂对照组和阿替美唑组比较,DMED组EGFP-NFAT2核转位明显增强(P<0.01),阿替美唑+DMED组EGFP-NFAT2核转位与DMED组比较无明显差别,而萘派地尔+DMED组EGFP-NFAT2核转位较DMED组明显减弱(P<0.01)。结论成功构建稳定共表达α_(1A)-AR和EGFP-NFAT2的U2OS-EGFPNFAT2-α_(1A)-AR细胞,可用于靶向α_(1A)-AR化合物筛选和受体分子机制研究。

β2肾上腺素受体通过TGF-β1/Smad3信号通路调控创面愈合中的纤维增生

目的探讨β2肾上腺素受体(β2 adrenergic receptor,ADRB2)在创面愈合过程中对纤维增生的调控机制。方法将12只小鼠背部皮肤随机注射非特异性敲减ADRB2基因的腺相关病毒(AAV-ADRB2组,n=6)和对照病毒(AAV-NC组,n=6)21 d后,在背部建立全层皮肤缺损创面愈合模型。记录术后第1、3、5、7天创面愈合率;采用H-E染色、Masson染色和免疫组化染色观察创面组织结构、纤维化程度及α-平滑肌肌动蛋白表达;定量PCR检测ADRB2、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)mRNA水平;Western印迹法检测胶原纤维1A1、胶原纤维3A1、TGF-β1、Smad3蛋白表达水平。结果术后第5、7天,AAV-ADRB2组创面愈合率显著下降(P<0.05),伴随表皮增厚、炎症细胞增多、纤维细胞减少、胶原沉积降低;α-SMA水平显著下降(P<0.05);COL1A1/COL3A1比例减少(P<0.05);ADRB2 mRNA水平显著降低(P<0.01),MMP-1和MMP-8 mRNA水平升高(P<0.01);TGF-β1/Smad3蛋白水平显著下降(P<0.05)。结论ADRB2敲减通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路,减少创面纤维化反应和结缔组织含量,提高MMP mRNA水平,降低Ⅰ型/Ⅲ型胶原比例。

肾上腺素β受体基因、G蛋白基因和CYP2D6基因多态性对美托洛尔导致脂代谢异常的影响

目的:研究肾上腺素β受体基因、G蛋白基因和CYP2D6基因多态性对美托洛尔导致脂代谢异常的影响。方法:选取2019年10月至2022年10月该院收治的初治高血压患者120例,检测β_(1)受体基因Ser49Gly、Gly389Arg多态;β_(2)受体基因Arg16Gly、Gln27Glu多态;β3受体基因Trp64Arg多态;代谢酶基因CYP2D6*10的P34S多态;G蛋白基因GNB3 C825T多态。比较美托洛尔单药治疗3个月后不同表型总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)水平变化。结果:各基因位点不同基因型患者的年龄、性别、体重指数、基线TC和基线TG等指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗3个月后,β_(2)肾上腺素受体基因Arg16Gly患者的TG水平升高,其中Gly/Gly型患者升高幅度最高,Arg/Gly型次之,二者均高于Arg/Arg型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:β_(2)肾上腺素受体Arg16Gly多态与美托洛尔引起的血浆TG水平升高相关,携带2个G等位基因会导致服药后血脂水平明显升高。

HMGB1在a2A-肾上腺素受体介导脓毒血症大鼠急性肺损伤的作用

目的:探讨HMGB1在a2A-肾上腺素受体介导脓毒血症大鼠急性肺损伤(ALI)的作用。方法:64大鼠建立盲肠结扎穿孔法(CLP)脓毒症模型,随机均分为以下两组:CLP组及CLP+马来酸钠组。各组分别于模型建立后2(T1)、6(T2)、12(T3)、24 h(T4)时检测大鼠血清TNF-、高迁移率族蛋白1(HMGB1)及IL-10含量。CLP24 h后检测肺组织干湿重比(W/D)和髓过氧化物酶活性(MPO)及HMGB1表达;并采用HE法进行肺组织学评分。结果:CLP+马来酸钠组T2时的TNF-水平明显低于CLP组(P<0.05);而HMGB1在T2、T3及T4均明显低于CLP组(P<0.05);IL-10在各个时间点比较结果差异无统计学意义(P>0.05)。CLP+马来酸钠组肺组织W/D、MPO活性、肺组织损伤评分均明显低于CLP组(P<0.05)。CLP+马来酸钠组肺组织HMGB1表达明显低于CLP组(P<0.05)。结论:HMGB1参与了ALI的病理过程,a2A-肾上腺素受体阻断可以通过抑制HMGB1从而改善ALI时的肺功能。

巴戟天多糖对骨质疏松大鼠骨质量、生物力学、β2肾上腺素能受体及OX-LDL水平的影响

目的探讨巴戟天多糖对骨质疏松大鼠骨质量、生物力学及β2肾上腺素能受体(ADRB2)及氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)水平的影响。方法选取54只大鼠分为正常组、模型组、西药组和低、中、高剂量组各9只。除正常组外,其余组别均用去双侧卵巢方法建立骨质疏松大鼠模型,建模成功后,模型组与正常组不进行用药,西药组采用普拉芬进行每天喂药干预,低剂量组、中剂量组、高剂量组每日灌胃不同剂量的巴戟天多糖。分别检测各组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,骨生物力学和骨质量,ADRB2的表达水平。结果模型组血清中TC、TG、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、LDL-C及OX-LDL、ADRB2蛋白显著高于正常组(P<0.05),西药组、中剂量组及高剂量组上述指标显著低于模型组(P<0.05),高剂量组上述指标显著低于西药组(P<0.05);模型组弹性模量、最大载荷、屈服强度、断裂点载荷、股骨、胫骨骨密度和刚性系数表达显著低于正常组(P<0.05),西药组、中剂量组及高剂量组上述指标显著高于模型组(P<0.05),高剂量组上述指标显著高于西药组(P<0.05)。结论巴戟天多糖对于降低骨质疏松大鼠血清TC、TG和OX-LDL水平、增强骨质量及骨生物力学及平衡肾上腺素(ADRB2)水平方面具有积极影响。

肾上腺素受体与阿尔兹海默症的关系研究进展

阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种常发生于65岁以上人群的神经退行性疾病,严重影响患者生活质量。AD主要病理特征为脑部β淀粉样蛋白(βamloid protein,Aβ)沉积以及Tau蛋白的过度磷酸化。目前,临床治疗药物仅能缓解其临床症状,并不能有效延缓或逆转疾病的进程。因此,新型治疗靶点和药物亟待解决。研究显示,肾上腺素受体(Adrenergic receptor,AR)α2A-AR和β-AR参与Aβ沉积和Tau的磷酸化过程,可能是治疗AD的有效靶点之一。本文就AR在AD的发生、发展中发挥的作用进行了综述,为发现AD新型治疗靶点和药物提供帮助。

基于β1-AR/TGF-β1/Smad2通路探讨稳心颗粒对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨稳心颗粒通过β1-AR/TGF-β1/Smad2通路对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导大鼠心肌纤维化的影响。方法雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、ISO组与稳心颗粒低、中、高剂量组以及胺碘酮组,每组10只,连续给药14天。第15天起,ISO组、各药物组大鼠以ISO 5 mg/(kg•d)皮下多点注射构建大鼠心肌纤维化模型。检测大鼠心脏质量指数的变化;采用苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察心肌形态学变化,Masson染色观察心肌胶原分布和含量变化;检测心肌组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测大鼠心肌组织交感神经系统-β1肾上腺素能受体(β1 adrenoceptor,β1-AR)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、p-Smad2蛋白表达变化。结果ISO组大鼠心脏质量指数明显升,细胞结构紊乱,胶原沉积和心肌纤维化明显,心肌HYP含量显著增多,GSH含量减少,β1-AR、TGF-β1与p-Smad2表达水平显著升高(P<0.01);与ISO组相比,各治疗组心脏质量指数降低,细胞结构损伤与胶原沉积减轻,心肌纤维化改善,HYP含量降低,GSH含量增多,β1-AR、TGF-β1与p-Smad2表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。稳心颗粒高剂量组效果较稳心颗粒低剂量组更为明显(P<0.05),与胺碘酮组相比无明显差异(P>0.05)。结论稳心颗粒能够改善ISO引起的心肌纤维化,减轻心肌细胞损伤与胶原纤维堆积,其机制可能与β1-AR/TGF-β1/Smad2通路有关。

太原市不同污染区域6~12岁儿童哮喘与β_(2) 肾上腺素能受体基因多态性的关系

目的探讨太原市不同污染区儿童哮喘与β_(2)肾上腺素能受体基因多态性的关系。方法选取太原市3个不同空气质量地区的儿童,哮喘患儿共181例,150例健康儿童作为对照组。哮喘组儿童高污染区67例、中污染区61例,低污染区53例,对照组三区各50例。采用ELISA法测血清总IgE水平,提取血清中DNA,采用聚合酶链反应法(PCR)检测β_(2)肾上腺素能受体16、27位点基因多态性,即精氨酸(Arg)16甘氨酸(Gly)位点和谷氨酰胺(Gln)27谷氨酸(Glu)位点基因多态性,统计各基因型和等位基因频率。比较哮喘组与对照组血清总IgE水平的关系,比较哮喘组儿童不同污染区不同基因型血清总IgE水平的差异,同时比较不同污染区域各基因型频率和等位基因频率的分布。结果①哮喘组血清总IgE水平较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05),哮喘组儿童检测的β_(2)肾上腺素能受体16、27位点不同基因型之间血清总IgE水平差异无统计学意义。②哮喘组β_(2)肾上腺素能受体16位点基因型Arg/Arg频率较对照组均下降(P<0.05),哮喘组该基因型频率与空气污染程度呈负相关(t=-15.588,P<0.05);Gly/Gly频率哮喘组较对照组均升高(P<0.05),哮喘组该基因型频率与污染程度呈正相关(t=29.445,P<0.05)。③27位点基因型Gln/Glu、Glu/Glu频率哮喘组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05),高污染区哮喘组Gln/Glu基因型显著高于对照组(P<0.05),中、低污染区哮喘组Gln/Glu基因型显著低于对照组(P>0.05),高、中、低污染区哮喘组Glu/Glu基因型均显著高于对照组(P<0.05),但各基因型频率与污染程度均未见相关性(P>0.05)。结论不同空气质量下,哮喘患者血清总IgE水平与β_(2)肾上腺素能受体16、27基因多态性可能无关;不同空气质量下,哮喘可能与β_(2)肾上腺素能受体16位点基因表达有关,Gly/Gly基因型频率的增加会提高儿童哮喘的发病率;不同空气污染程度下哮喘患者发病率与27位点基因表达无关,所以推测空气污染可能未通过影响27位点基因表达而影响哮喘发病。

交感神经β_(2)肾上腺素受体基因多态性与前列腺癌患者术后复发及预后的相关性分析

目的:探讨与分析交感神经β_(2)肾上腺素受体(β_(2)AR)基因多态性与前列腺癌患者术后复发及预后的相关性。方法:选择2017年8月—2020年6月在本院行根治性前列腺切除术的88例前列腺癌患者,检测β_(2)AR基因多态性,调查、随访患者的预后并进行相关性分析。结果:在88例患者随访到2021年11月1日,平均随访时间(28.17±2.81)个月,复发18例,复发率为20.5%。复发组的年龄、临床分期、术前Gleason评分、术前前列腺特异抗原(PSA)水平、体重指数、肿瘤直径与非复发组对比差异无统计学意义(P>0.05)。所有检测结果符合Hardy-Weinberg平衡,复发组的β_(2)AR Arg389Gly GG基因型与等位基因G频率高于非复发组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,β_(2)AR Arg389Gly GG基因型与等位基因G为影响前列腺癌患者术后复发的重要因素(P<0.05)。ROC分析显示,β_(2)AR Arg389Gly GG基因型与等位基因G预测前列腺癌患者术后复发的曲线下面积分别为0.750和0.861。结论:前列腺癌患者术后复发比较常见,β_(2)AR Arg389Gly GG基因型与等位基因G为影响前列腺癌术后复发的重要因素。

激活α2A肾上腺素受体抑制背根神经节卫星胶质细胞活性缓解镜像痛敏

目的:躯体单侧组织损伤引发对侧疼痛反应,称为镜像痛敏。镜像痛敏的病理机制尚不明确,缺乏特异性靶标,影响其治疗。本研究拟阐释背根神经节中α2A肾上腺素受体和神经胶质细胞介导镜像痛敏的发生机制。方法:采用行为药理学、实时荧光定量PCR、免疫荧光和免疫印迹等技术研究背根神经节中α2A肾上腺素受体和神经胶质细胞介导镜像痛敏的机制。结果:背根神经节中α2A肾上腺素受体参与了镜像痛敏的发生发展。激活α2A肾上腺素受体显著缓解镜像痛敏行为。疼痛刺激下,双侧背根神经节中胶质细胞被差异激活,而激活α2A肾上腺素受体进一步活化背根神经节神经胶质细胞。此外,激活α2A肾上腺素受体显著降低卫星胶质细胞中α2A肾上腺素受体的表达,而不影响小胶质细胞中α2A肾上腺素受体的表达。结论:背根神经节卫星胶质细胞中的α2A肾上腺素受体是镜像痛敏的重要分子传感器,激活α2A肾上腺素受体改善镜像痛敏行为。

α2-肾上腺素能受体在水杨酸钠诱导大鼠耳蜗螺旋神经节神经元兴奋毒性中的表达变化

目的 观察α2-肾上腺素能受体(α2-adrenergic receptor, α2-AR)在大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neuron, SGN)中的分布,以及水杨酸钠(sodium salicylate, SS)作用SGN不同时间点后α2-AR各亚型的表达改变,以探讨其在SGN兴奋毒性中的作用。方法 将新生SD大鼠随机分成:对照组、SS处理6 h组、SS处理12 h组和SS处理24 h组,每组2只。急性分离各组SGN后进行原代培养48 h,对照组用新的培养基培养,不做处理,余三组分别用5 mM水杨酸钠处理6 h、12 h、24 h,用免疫荧光染色技术检测SGN中α2-AR各亚型的表达情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot方法检测SS作用不同时间后α2-AR各亚型的mRNA和总蛋白表达改变情况。结果 (1)免疫荧光染色表明SGN上存在α2A-AR、α2B-AR、α2C-AR三种亚型的表达;(2)RT-qPCR结果显示在SGN中α2-AR各亚型mRNA相对表达量α2A-AR>α2B-AR(P<0.01),α2A-AR>α2C-AR(P<0.01),α2B-AR和α2C-AR之间差异无统计学意义;与对照组相比,5 mM SS作用SGN 6 h、12 h、24 h后α2A-AR表达量均明显增高(P<0.05);SS作用12 h后α2C-AR表达量开始增高(P<0.05),而α2B-AR呈升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);(3)Western blot结果显示SGN中α2-AR各亚型蛋白表达量α2A-AR>α2B-AR(P<0.01),α2A-AR>α2C-AR(P<0.05),α2B-AR和α2C-AR之间差异无统计学意义,与mRNA表达一致。与对照组相比,5 mM SS作用SGN 12 h后α2A-AR总蛋白开始下降(P<0.05),作用24 h后α2C-AR总蛋白下降(P<0.05),α2B-AR总蛋白不变。结论 α2-AR三种亚型在SGN中均有表达,其中α2A-AR、α2C-AR可能介导了SS诱导的SGN兴奋毒性且α2A-AR比α2C-AR反应更快速。

α2A-肾上腺素受体的同源模建及与Yohimbine的对接研究

通过对比多个与α2A-肾上腺素受体同属G-蛋白偶联受体的视紫红质蛋白序列,选择以相似性最大的牛视紫红质蛋白为模板,同源模建了α2A-肾上腺素受体的跨膜结构,并在结构中找到了体积为0.090nm3,已被报导的活性残基包围的活性位点.运用分子力学与动力学方法研究了此结构突变前后与抑制剂Yohimbine的对接情况,得到了与文献报道相吻合的结果.同时对接研究结果发现,在α2A-肾上腺素受体的结合位点周围的一个由色氨酸和两个苯丙氨酸组成的局部疏水区对抑制剂有稳定作用,并且天冬氨酸113作为氢键受体也对稳定抑制剂有重要作用.

大鼠肺磷脂酶A_2激活与肺中肾上腺素能受体平衡失调

本研究动态地检测了油酸所致大鼠肺αAR与βAR平衡失调发生发展过程中肺PLA_2活性的变化,结果发现:实验组大鼠肺组织中PLA_2活性显著高于对照组,并且分别与αAR增多和βAR减少呈正相关和负相关,应用PLA_2非特异性抑制剂—氯喹预先处理实验组大鼠,可防止αAR和βAR的平衡失调,维持两种受体的数量与亲和力于正常水平,明显地减轻αAR与βAR失衡所致的肺部病变,肺体系数明显减小,支气管肺泡灌洗液中蛋白质含量亦显著低于实验组。

α2肾上腺素受体激动剂在妇科围术期的临床实验研究进展

α2肾上腺素受体是广泛存在于人体各组织、器官的G蛋白偶联受体,具有三种药理学亚型,即α2A、α2B、α2C。α2肾上腺素受体激动剂分为两种类型,即苯乙胺类和咪唑环类。前者代表药物为肾上腺素和去甲肾上腺素,后者通常具有麻醉效应,代表药物为可乐定、右美托咪定(Dex)。Dex对α2和α1的亲和力之比是可乐定的8倍,对α2受体具有高选择性。随着子宫肌瘤、卵巢癌、宫颈癌等妇科肿瘤患病率逐渐增加.

β2肾上腺素能受体激动剂对低氧诱导肺动脉高压中肺血管重构及BMPR2/BMP4表达的影响

目的探究β2肾上腺素能受体(β2AR)激动剂对低氧诱导肺动脉高压(PAH)肺血管重构的作用及机制。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组及β2AR激动剂低、高剂量组,每组各10只,对照组常氧环境下饲养,其余3组均在低氧箱内诱导构建PAH模型,β2AR激动剂低、高剂量组分别腹腔注射2.5、5.0 mg/kg的β2AR激动剂沙丁氨醇;2 w后,测定各组右心室收缩压(RVSP)及右心室肥厚指数(RVH),苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态改变与重构,氮蓝四唑显色法检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定肺组织丙二醛(MDA)含量,免疫荧光染色法检测肺组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达,免疫组织化学染色测定肺组织α-平滑肌肌动蛋白(SMA)表达,Western印迹检测肺组织骨形态发生蛋白(BMP)4、BMP受体(BMPR)2及下游蛋白Smad1/5/8磷酸化表达水平。结果与对照组比较,模型组RVSP和RVH显著增加,肺小动脉变窄,出现管壁增厚和内膜增生的现象,肺组织SOD活性显著降低,MDA含量显著增高,PCNA荧光染色强度明显增加,α-SMA阳性率及肺组织中BMP4蛋白相对表达量显著上调,BMPR2及smad1/5/8磷酸化蛋白表达显著下降(P<0.05)。与模型组比较,在β2AR激动剂低、高剂量作用下,两组RVSP和RVH显著降低,肺组织病理改变减轻,组织内SOD活性显著升高,MDA含量显著减少,PCNA荧光染色强度明显减弱,α-SMA阳性率及肺组织中BMP4蛋白相对表达量显著下调,BMPR2及smad1/5/8磷酸化蛋白表达显著升高(P<0.05)。此外,相较于β2AR激动剂低剂量组,β2AR激动剂高剂量组肺组织内BMP4蛋白相对表达量显著下调,BMPR2及smad1/5/8磷酸化蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论β2AR激动剂能够抑制低氧诱导下PAH模型大鼠的肺血管重构,这可能与其降低肺组织内氧化应激水平,抑制BMP4表达而提高BMPR2及下游蛋白smad1/5/8表达有关。

高龄产妇无痛分娩产程与β_(2)肾上腺素能受体水平及血流变学的相关性

目的:探讨与分析高龄产妇无痛分娩产程与β_(2)肾上腺素能受体水平及血流变学的相关性。方法:选择2019年2月-2022年8月在本院进行自然无痛分娩的高龄产妇88例作为观察对象,采集所有产妇入院时空腹静脉血,观察血清β_(2)肾上腺素能受体水平及血流变学状况,调查记录产妇的产程时间并进行相关性分析。结果:88例产妇的总产程平均时间为(11.83±0.58)h,都顺利完整自然分娩,无中转剖宫产情况出现,其中第一产程平均时间为(10.34±0.24)h,第二产程平均时间为(1.45±0.18)h,第三产程平均时间为(10.09±0.21)min,其中总产程时间≥11h 48例(观察组),<11h 40例(对照组)。观察组产后即刻、产后12h、产后24h的疼痛VAS评分显著高于对照组(P<0.05)。观察组的血清β_(2)肾上腺素能受体水平显著高于对照组(P<0.05)。观察组的血浆黏度、红细胞聚集指数、全血黏度、血细胞比容均显著高于对照组(P<0.05)。在88例产妇中,Pearson分析显示总产程时间与血浆黏度、红细胞聚集指数、全血黏度、血细胞比容、血清β_(2)肾上腺素能受体水平呈正相关性(P<0.05)。结论:产程延长的高龄产妇除了疼痛加剧外,可伴随有血清β_(2)肾上腺素能受体的高表达,血流变学状况也会发生改变,高龄产妇无痛分娩产程与β_(2)肾上腺素能受体水平及血流变学都存在相关性。

肾上腺素受体激动剂对新生大鼠心肌细胞胞质型磷脂酶A_2的活化作用

目的探讨肾上腺素受体(adrenergic receptor,AR)激动剂对培养的新生大鼠心肌细胞胞质型磷脂酶A2(cy-tosolic phospholipase A2,cPLA2)的磷酸化效应及机制。方法分别用β-AR激动剂异丙肾上腺素(10μmol/L)和α1-AR激动剂苯肾上腺素(10μmol/L)处理培养的新生大鼠心肌细胞,Western blot法检测cPLA2及丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平随时间变化的效应曲线。结果α1-AR激活引起心肌细胞内cPLA2磷酸化水平显著增高,此效应可能由p38MAPK及ERK1/2的磷酸化介导;β-AR激活可引起p38MAPK及ERK1/2的磷酸化,但不伴有cPLA2的磷酸化。结论实验结果揭示了心肌细胞中α1-AR激动在调控cPLA2活性方面的重要作用。

肾上腺素β2受体激动药与抗胆碱能药物在慢性阻塞性肺疾病中的应用进展

COPD(慢性阻塞性肺疾病)为常见病,气流渐进性的受限制,为主要疾病特征,多数与肺部及气道,对于有毒颗粒等等,可产生炎症反应有关。针对经常吸烟的群体,会产生炎症反应,一般将中性粒细胞为核心,可使得气道分泌较多的粘液,同时,还会损伤到肺泡壁,可对迷走神经,产生一定的刺激,逐渐释放出乙酰胆碱,促使平滑肌,可加快收缩,导致气道的黏液分泌旺盛,进而导致气流,也会受到一定的营造。对于COPD患者,若处于稳定的阶段,为其治疗中的内容包括:将症状减轻,使得运动耐力提升,以防疾病进一步发展。针对该疾病,一般是把支气管舒张剂,当作将病情减轻的主要药物,此类舒张剂,相较于短效,长效效果更好,而长效β2受体激动剂等药物,当前,其被建议当成对处在稳定阶段COPD患者的,最佳治疗方案。