一株产超广谱β-内酰胺酶同时携带qnrB4和aac(6')-Ⅰb-suzhou型基因大肠埃希菌的鉴定

目的了解1株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)同时携带qnrB4和aac(6')-Ⅰb-suzhou型基因大肠埃希菌的耐药机制。方法采用纸片扩散法检测1株分离于血液标本的大肠埃希菌对19种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)检测6种耐药基因[qnrA、qnrB、qnrC、qnrS、qepA、aac(6')-Ⅰb],并对qnrB、aac(6')-Ⅰb基因测序后进行Blast比对分析。结果该菌株除对碳青霉烯类、酶抑制剂复合抗菌药物类敏感外,其余药物全部耐药;PCR发现该菌株同时携带qnrB和aac(6')-Ⅰb基因,经测序并分别与已在美国国立信息中心[NCBI]登录的DQ303921(qnrB4)和EF375621[aac(6')-Ⅰb-suzhou]型比对,同源性均>99%。结论该菌株多重耐药的机制与产ESBLs及携带qnrB4和aac(6')-Ⅰb基因有关。

水环境分离细菌及临床分离弗劳地柠檬酸杆菌中喹诺酮耐药基因qnr及aac（6’）-Ib-cr的检测

目的调查水环境分离细菌及临床分离弗劳地柠檬酸杆菌中喹诺酮耐药基因qnr和aac（6’）-Ib-cr的流行情况及qnr基因型分布。方法从杭州10个不同的水域中分离细菌，从4个城市的多家医院收集弗劳地柠檬酸杆菌临床菌株。琼脂稀释法测定环丙沙星、左氧氟沙星和萘啶酸对细菌的最低抑菌浓度（MIC）。PCR方法检测细菌中qnrA、qnrB、qnrS及aac（6’）-Ib-cr基因。对PCR产物进行测序及序列分析，确定各基因型别。结果从水环境分离到78株革兰阴性杆菌（包括33株肠杆菌科细菌、21株气单胞菌属、10株不动杆菌属、10株假单胞菌属、2株产碱杆菌属和2株邻单胞菌属细菌）。10株弗劳地柠檬酸杆菌中有8株qnrB基因阳性；9株大肠埃希菌中qnrS1和aac（6’）-Ib-cr基因阳性各1株；1株斑点气单胞菌（Aeromonaspunctata）qnrS2阳性。临床分离的103株弗劳地柠檬酸杆菌中，qnr基因检出75株（72．8％），其中qnrA1有3株（2．9％），qnrB有65株（63．1％），qnrS2有1株（1．0％），qnrA1合并qnrB阳性5株（4．8％），qnrS1合并qnrB阳性1株；aac（6’）-Ib检出33株（32．0％），其中12株（11．6％）存在-cr变异体。qnrB的基因型以qnrB9、qnrB8和qnrB6为主。结论首次在欧洲以外地区分离到携带qnrS2基因的气单胞菌属细菌。水环境及临床分离的弗劳地柠檬酸杆菌中qnrB基因的携带率非常高，后者同时有较高的aac（6’）-Ib-cr携带率。弗劳地柠檬酸杆菌中qnrB基因的亚型以qnrB9、qnrB8和qnrB6最为常见。

志贺菌质粒介导喹诺酮类耐药基因研究

目的了解志贺菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS和aac（6’）．Ib-cr的流行情况以及其耐药特征。方法PCR法对57株志贺菌进行qnrA、qnrB、qnrS和aac（6’）-Ib基因检测，PCR扩增阳性菌株进行测序和基因分型，并与大肠埃希菌J53作接合试验，采用琼脂稀释法检测志贺菌和接合前后大肠埃希菌J53对抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC）；特异性PCR扩增确认接合子基因型。结果57株志贺菌中，筛选出qnrS、qnrB阳性株各1株（ZH13和ZH53），均为福氏志贺菌，其基因序列在NCBI成功登录，登录号分别为FJ616991和FJ616990，未检出qnrA和aac（6’）-Ib基因；其中ZH13接合试验成功，ZH53不能接合，接合试验后的大肠埃希菌J53对多种抗菌药物的MIC明显提高；特异性PCR证实接合子和供体菌有相同的qnr基因。结论在志贺菌中检出qnrS基因，且国内首次检出qnrB基因，qnr阳性菌株呈多重耐药，且其耐药性可以通过接合方式发生水平转移，需加强监控。