质粒介导aac(6')-Ib基因检测与喹诺酮类耐药

目的了解大肠埃希菌临床株对喹诺酮类抗菌药物耐药情况并分析质粒介导aac(6')-Ib基因存在与喹诺酮类药物耐药性的关系。方法采用纸片扩散法(K-B)对临床中段尿分离所得121株大肠埃希菌进行耐药性检测,聚合酶链反应(PCR)法检测大肠埃希菌aac(6')-Ib基因,对aac(6')-Ib基因阳性菌株扩增片段进行DNA测序并确定基因型。结果大肠埃希菌临床株对萘啶酸、环丙沙星、诺氟沙星、左氧氟沙星4种喹诺酮类抗菌药物耐药率均高于75%。aac(6')-Ib基因检出率为14.0%(17/121),经DNA测序确定aac(6')-Ib基因变异体(cr)有14株,突变率为82.4%(14/17);aac(6')-Ib基因阳性株对氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢唑啉、头孢克洛、头孢呋辛、阿米卡星、环丙沙星、诺氟沙星、左氧氟沙星耐药率高于阴性株且差异有统计学意义(P<0.05)。结论仁济医院临床分离大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物耐药情况严重;质粒介导aac(6')-Ib基因的存在可使大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物耐药性提高;质粒介导aac(6')-Ib基因还可能引起细菌对β-内酰胺酶抑制剂药物和头孢菌素类药物敏感性下降。

中国大陆地区肠杆菌科细菌aac（6＇）-Ib—cr基因检出率与常见药物不同耐药水平关系的研究

目的研究中国大陆地区质粒介导的耐药基因aac（6’）-Ib—cr在肠杆菌科细菌环丙沙星和阿米卡星敏感株与耐药株中及在ESBL阳性株和阴性株中的分布状况和比较分析.方法从2006年全国美平耐药监测网点中收集241株非重复的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，用琼脂对倍稀释法测定所有菌株对环丙沙星等药物的MIC值.采用PCR检测所有菌株的aac（6’）-Ib基因;并以内切酶BtsCI酶切消化aac（6’）-Ib的PCR阳性产物和/或DNA测序以确定aac（6’）-Ib—cr.结果在241株筛选出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中，环丙沙星的耐药率为61．4%（148/241）;阿米卡星的耐药率为10．0%（24/241）;ESBL阳性株占56．8%（137/241）.aac（6’）-Ib—cr的总阳性率为12．4%（30/241）.经妒检验，aac（6’）-Ib—cr基因在环丙沙星敏感菌株与耐药菌株中的检出率差异具有统计学意义（0．0%和20．3%，X^2=20．655，P〈0．05）;在阿米卡星敏感菌株与耐药菌株中约检出率差异无统计学意义（12．0%和16．7%，X^2=0．112，P〉0．05）;在ESBL阳性株与ESBL阴性株中的检出率差异无统计学意义（16．1%和7．7%，X^2=3．797，P〉0．05）.结论质粒介导喹诺酮类耐药基因aac（6’）-Ib-cr在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的分布广泛，而且该基因在环丙沙星敏感菌株与耐药菌株的检出率差异具有统计学意义，而在阿米卡星敏感菌株与耐药菌株中的检出率差异无统计学意义，在ESBL阳性株与阴性株中的检出率亦无统计学意义.

猪场环境大肠杆菌qnrA和aac(6’)-Ib基因检测

为了解质粒介导的喹诺酮类抗生素耐药基因qnrA、aac(6’)-Ib-cr在猪场环境大肠杆菌的流行分布及变异情况,从贵州省规模养猪场空气、污水、粪便和土壤样本中分离、鉴定大肠杆菌57株,PCR检测qnrA和aac(6’)-Ib基因,测序分析aac(6’)-Ib-cr基因变异体,并用药敏纸片琼脂扩散法测其对喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药性。结果表明:57株大肠杆菌均未携带qnrA基因;8株检出aac(6’)-Ib基因,分别来自污水、粪便和土壤样本,且介导对喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素的广泛耐药性。E.coli3和E.coli4在第75(A)、76(G)或488位(A)碱基缺失;E.coli5在第222位(A→T)变异,E.coli1、E.coli2、E.coli3、E.coli4、E.coli5、E.coli7和E.coli8在223位(T→C)和454位(G→T)变异;E.coli3、E.coli4在第492位有A、C碱基增添。说明贵州省规模养猪场肠杆菌科细菌qnrA基因携带率较低,但存在aac(6’)-Ib-cr基因。

大肠埃希菌临床分离株aac(6)′-Ib-cr基因的检测

目的:了解温州地区大肠埃希菌临床株中质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6)′-Ib-cr的分布、耐药情况。方法:收集温州医学院附属第一医院环丙沙星耐药的大肠埃希菌临床株60株,应用PCR方法检测其aac(6)′-Ib基因,琼脂稀释法检测菌株的耐药情况,DNA测序aac(6)′-Ib-cr基因变异体,用接合传递试验方法验证细菌质粒介导的耐药性的可转移性。结果:60株大肠埃希菌临床株检出10株aac(6)′-Ib,其扩增产物进行测序,结果表明4株菌在第223位(T→C或T→A)发生变异,均携带aac(6)′-Ib-cr基因;这4株菌接合传递试验成功,临床株对喹诺酮类的耐药性传递给了受体株。结论:温州地区aac(6)′-Ib-cr介导的喹诺酮类耐药的大肠埃希菌较普遍存在。

鲍曼不动杆菌耐药基因aac（6＇）-Ib和aac（6＇）-Ib-cr的检测

目的了解阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌中aac（6＇）-Ib-cr基因的分布情况。方法收集2007年1月2009年10月临床标本中分离对阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌73株，利用聚合酶链反应（PCR）方法扩增aac（6＇）-Ib基因，PCR产物进行电泳分析和测序，aac（6＇）-Ib基因阳性PCR产物用内切酶FOK酶切后电泳分析。统计菌株对亚胺培南等12种抗生素的耐药率。结果aac（6＇）-Ib基因的检出率为89．0％，其中7．7％为突变了的aac（6＇）-Ib-cr基因。所有菌株对除亚胺培南外的其它抗生素的耐药率均大于80％。结论aac（6’）．Ib基因广泛存在于这些耐药菌株中，突变成aac（6＇）-Ib-cr基因的发生率较低。这些对阿米卡星耐药的菌株，对其它抗生素的耐药也十分严重。

aac(6')-Ib-cr基因是微生物对喹诺酮类抗菌药的又一耐药途径

aac(6')-Ib-cr基因表达的氨基糖苷乙酰转移酶通过质粒介导方式对环丙沙星等乙酰化,使其抗菌生物活性降低,并与其他耐药因素产生协同作用,导致MIC值大幅升高。该基因分布范围广,检出率高,使得微生物对喹诺酮类抗菌药物耐药更加复杂。本文检索了近年来aac(6')-Ib-cr基因相关研究报道,归纳论述该基因在喹诺酮类抗菌药物耐药中的作用,提醒临床医务工作者应高度重视aac(6')-Ib-cr基因对临床用药的影响,以促进喹诺酮类抗菌药的合理应用。

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌中检出aac(6′)-Ⅰb-suzhou型基因

目的了解质粒介导的喹诺酮耐药基因在产超广谱β-内酰胺酶(ELBLs)大肠埃希菌的耐药特点及耐药机制。方法用纸片扩散法检测59株产ESBLs的大肠埃希菌对11种抗生素的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)检测qnrA、qnrB和qnrS、qnrC、aac(6′)-Ⅰb及qepA基因,并对扩增阳性基因qnrB、aac(6′)-Ⅰb测序后进行BLAST比对分析。结果 59株产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌共检出qnrB 3株(5.1%)、aac(6′)-Ⅰb 22株(37.3%),qnrB经测序证实为qnrB4,aac(6′)-Ⅰb经测序证实为aac(6′)-Ⅰb-cr型1株(1.7%)和aac(6′)-Ⅰb-suzhou型3株(5.1%)。结论大肠埃希菌多重耐药机制与产超广谱β-内酰胺酶及携带qnrB4、aac(6′)-Ⅰb和aac(6′)-Ⅰb-cr基因有关;本研究是国内首次从大肠埃希菌中检出aac(6′)-Ⅰb-suzhou型基因。

多重耐药铜绿假单胞菌aac(6’)-Ⅱ型氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的 进一步探讨铜绿假单胞菌 (Pseudomonasaeruginosa ,Pa)的耐药机制。 方法 从分离的 2 2株Pa中 ,经药敏试验、氨基糖苷类修饰酶耐药aac(6’) Ⅱ型基因的聚合酶链反应 (PCR)检测 ,筛选出 1株具有多重耐药的特征、氨基糖苷类修饰酶aac(6’) Ⅱ型阳性的菌株 ,对其耐药基因进行序列分析。 结果 Pa菌株扩增结果阳性 ,产物的长度为 178bp ,与标准产aac(6’) Ⅱ型菌株扩增片段长度大小一致 ;PCR产物经自动测序仪进行序列分析 ,共测得 132个核苷酸序列 ,经GenBank网上同源性比较 ,发现该序列与M2 96 95相比有 2个位点改变。 结论 国内临床上分离的Pa产aac(6’) Ⅱ型氨基糖苷类修饰酶基因 。

鲍曼不动杆菌耐药基因aac（6’）－Ib和aac（6’）－Ib－cr的检测

目的了解阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌中aac（6’）－Ib—cr基因的分布情况。方法收集2007年1月到2009年10月临床标本中分离对阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌73株，利用聚合酶链反应（PCR）方法扩增aac（6’）-Ib基因，PCR产物进行电泳分析和测序，aac（6’）-Ib基因阳性PCR产物用内切酶FOKI酶切后电泳分析。统计菌株对亚胺培南等12种抗生素的耐药率。结果aac（6＇）-Ib基因的检出率为89．0％，其中7．7％为突变了的aac（6’）-Ib-cr基因。所有菌株对除亚胺培南外的其它抗生素的耐药率均大于80％。结论aac（6＇）-Ib基因广泛存在于这些耐药菌株中，突变成aac（6’）-Ib—cr基因的发生率较低。这些对阿米卡星耐药的菌株，对其它抗生素的耐药也十分严重。

大肠埃希菌连续分离株氨基糖苷类修饰酶aac(6′)-Ⅰb基因分型研究

目的了解临床连续分离的大肠埃希菌(ECO)氨基糖苷类饰酶aac(6′)-Ib基因及亚型存在状况。方法测定临床分离的60株ECO菌对19种抗菌药物的敏感性,采用PCR技术检测氨基糖苷类修饰酶aac(6′)-Ib基因。结果60株ECO菌连续分离株中aac(6′)-Ib基因阳性11株(18.3%),经DNA测序,2株为aac(6′)-Ib经典型,6株为aac(6′)-Ib-Cr型,另有2株为新亚型。结论检出氨基糖苷修饰酶aac(6′)-Ib基因新亚型,在一家医院ECO菌中同时检出aac(6′)-Ib型和aac(6′)-Ib-Cr型及新亚型三种亚型为国内首次报道。

Detection of aac(3)IIc, aac(6)Ib, armA Genes Coding for Escherichia coli Resistance to Aminoglycosides in Burkina Faso

Background and Prupose: Antibiotic resistance is a major global health concern. In addition to the existing data on the prevalence of bacterial resistance to antibiotics, there are patchy data on bacterial resistance to aminoglycosides in Burkina Faso. In this study, we determined the prevalence of aminoglycoside resistance genes in E. coli, including aac(3)-IIc, aac(6)-Ib and armA in Ouagadougou, and determined which antibiotics in this class are most affected by resistance. Material and Methods: This study was conducted on 216 E. coli strains collected from the biomedical analysis laboratories of Saint Camille and Schiphra hospitals. E. coli strains were isolated from pus and urine samples collected between September 2018 and January 2019. Antibiotic susceptibility testing was performed using aminoglycosides, β-lactams, fluoroquinolones, and sulfonamides. Aminoglycoside resistance genes were detected in strains with at least one aminoglycoside resistance gene using conventional/multiplex PCR. Results: Aminoglycoside resistance was observed in 46.8% (101/216) of strains. The resistance rates were respectively 45.37% for Tobramycin, 32.40% for Gentamicin, 14.81% for Kanamycin, 2.31% for Netilmicin, 1.84% for Neomycin, and 0.46% for Amikacin. PCR showed that 86 strains (85.15%) possessed the aac(3)-IIc gene, 71 strains or 70.30%) possessed the aac(6’)-Ib gene, and nine strains (8.91%) possessed the armA gene. Conclusion: Aminoglycoside resistance in pathogenic E. coli strains is mainly due to the presence of the aac(3’)-IIc and aac(6’)-Ib genes. The presence of armA was first reported in Burkina Faso. Netilmicin, Neomycin and Amikacin are good therapeutic options for treating urinary tract and pus-forming infections.

39株鲍曼不动杆菌耐药性分析与aac(6’)-Ib基因检测

目的调查鲍曼不动杆菌耐药特征及aac(6’)-Ib基因分布情况。方法收集39株不重复鲍曼不动杆菌,采用琼脂倍比稀释法测定对13种常用抗菌素的最小抑菌浓度(MIC),聚合酶链反应(PCR)法检测质粒介导aac(6’)-Ib基因。结果 39株鲍曼不动杆菌对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、加替沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星和庆大霉素耐药率依次为74.36%、76.92%、82.05%、76.92%、82.05%、71.79%、79.49%、71.79%、79.49%、76.92%、89.74%、82.05%、94.88%。22株(56.41%)携带aac(6’)-Ib基因。结论鲍曼不动杆菌呈现多药耐药表型,aac(6’)-Ib基因与鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类和喹诺酮类耐药有关。

肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr的研究

目的调查本院临床所分离的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌中质粒介导的aac(6’)-Ib-cr基因的存在情况,为临床预防感染及合理使用抗菌药物提供依据。方法收集2007年7月～2008年12月本院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌共57株,采用PCR技术检测aac(6’)-Ib基因,并对阳性菌株进行测序。以大肠埃希菌J53为受体菌,通过接合试验从aac(6’)-Ib-cr阳性菌株中获得的接合子,采用E-test方法测定菌株的药敏情况。结果 57株肺炎克雷伯菌中,aac(6’)-Ib基因阳性菌共12株,经测序全部为aac(6’)-Ib-cr基因,阳性率为21.1%。aac(6’)-Ib-cr基因阳性肺炎克雷伯菌中6株接合试验获得成功。环丙沙星对接合子的MIC值均为0.5μg/ml,左氧氟沙星对接合子的MIC值均为0.25μg/ml;接合子与受体菌MIC值比较,环丙沙星和左氧氟沙星的耐药性分别提高了63倍和17倍。结论本院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6’)-Ib-cr携带率很高,临床上应加强喹诺酮类耐药基因的检测,以避免产aac(6’)-Ib-cr基因菌株感染的暴发流行。

连云港地区大肠埃希菌质粒介导喹诺酮类抗菌药耐药基因检测

目的了解连云港地区临床分离的大肠埃希菌质粒介导喹诺酮类抗菌药物耐药基因的携带状况，为临床喹诺酮类药物耐药的预防提供指导。方法采用PCR检测88株分离自连云港地区的大肠埃希菌株的质粒介导喹诺酮耐药基因qnrA，qnrB，qnrS和aac（6’）-Ib—cr，将阳性结果进行测序分析确认，并通过将aac（6’）一Ib序列与Genbank登记序列比对以确定aac（6’）-Ib-cr；分析基因阳性菌株的喹诺酮类药物的药敏结果。结果在检测的大肠埃希菌临床分离株中，共检出qnr基因阳性7株（7．95％），其中qnrB基因2株（2．27％），qnrS基因5株（5．68％），未检出qnrA基因阳性菌株。检出aac（6’）-Ib基因阳性菌株12株（13．64％），经测序确定其中6株（6．82％）为aac（6’）-Ib-cr基因。检测出的12株qnr和aac（6’）-Ib-cr基因阳性的大肠埃希菌中，8株对喹诺酮类耐药，3株对喹诺酮类敏感，1株对左旋氧氟沙星敏感但对环丙氟派酸耐药；有11株为产超广谱p内酰胺酶（ESBLs）菌株。结论连云港地区临床分离的大肠埃希菌中存在qnr和aac（6’）-Ib-cr基因阳性菌株的流行，喹诺酮类敏感菌株与耐药菌株中均有qnr基因和aac（69-Ib—cr基因的存在。qnr和aac（6’）-Ib—cr基因往往和ESBLs同时存在，应加强临床分离菌株的质粒介导喹诺酮类抗菌药物耐药基因监测，以防止其传播与流行。

阿米卡星耐药鲍曼不动杆菌aac(6′)-Ib和aac(6′)-Ib-cr基因的研究

目的了解阿米卡星耐药鲍曼不动杆菌中aac(6′)-Ib和aac(6′)-Ib-cr基因的临床分布情况。方法收集临床标本中分离的阿米卡星耐药鲍曼不动杆菌61株。应用聚合酶链反应(PCR)法检测aac(6′)-Ib基因,aac(6′)-Ib基因阳性PCR扩增产物利用限制性内切酶Fok I酶切消化后电泳分析aac(6′)-Ib-cr基因。采用纸片扩散法进行药物敏感性试验,Whonet 5.5软件进行数据分析。结果阿米卡星耐药鲍曼不动杆菌中aac(6′)-Ib基因检出率为70.5%,aac(6′)-Ib-cr基因检出率为8.2%,两者对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为62.3%、63.9%,对其余11种抗生素的耐药率均在85.0%以上。结论阿米卡星耐药鲍曼不动杆菌中aac(6′)-Ib基因携带率较高,aac(6′)-Ib-cr基因检出率较低;两基因对包括碳青霉烯类抗生素在内的多种抗生素存在严重耐药且呈多重耐药现象。

临床尿液标本大肠埃希菌耐药基因qnrA和aac(6')-Ib的检测及耐药性分析

目的探讨本院临床尿液标本大肠埃希菌菌株耐药基因qnr A和aac(6')-Ib(-cr)的存在及其耐药特征。方法选择本院临床中段尿标本分离的110株大肠埃希菌菌株,用纸片扩散法进行药敏试验,PCR法扩增qnr A和aac(6')-Ib基因,扩增片段进行电泳分析及DNA测序,并分析耐药性。结果大肠埃希菌临床株对多种抗生素耐药,对喹诺酮类耐药率高于75%。110株大肠埃希菌菌株,检测出qnr A基因9株,aac(6')-Ib基因16株,其中13株为突变的aac(6')-Ib-cr基因,1株同时携带qnr A和aac(6')-Ib-cr基因。qnr A基因阳性与阴性菌株的耐药性比较虽有差异,但差异无统计学意义(P>0.05);aac(6')-Ib基因阳性菌株对喹诺酮类等多种抗生素的耐药率高于阴性菌株(P<0.05)。qnr A与aac(6')-Ib基因阳性菌株间对氨苄西林/舒巴坦、左氧氟沙星的耐药率差异有统计学意义(P<0.05)。结论本院尿标本大肠埃希菌临床分离株中,对喹诺酮类耐药率高于75%;qnr A与aac(6')-Ib基因均有检出,aac(6')-Ib基因阳性菌株对喹诺酮类等多种抗生素的耐药率高于阴性菌株,qnr A与aac(6')-Ib基因阳性菌株间耐药性有一定差异。临床要加强对耐药菌株检测。

环丙沙星耐药肠杆菌科细菌临床株qnr和aac（6’）-Ⅰb-cr基因的检测

目的了解温州地区环丙沙星耐药肠杆菌科细菌临床株的qnr、aac（6’）-Ⅰb-cr基因的分布情况。方法收集2005年8月-2008年4月间温州医学院附属第一医院环丙沙星耐药的肠杆菌科细菌共461株，其中大肠埃希菌370株，阴沟肠杆菌39株，克雷伯菌属细菌52株。应用PCR方法检测qnr和aac（6’）-Ⅰb基因，DNA测序检测qnrA、qnrB、qnrS和aac（6＇）-Ⅰb-cr基因；接合传递试验方法探讨细菌质粒介导的耐药性传递情况。结果461株环丙沙星耐药的肠杆菌科细菌临床株中检出含qnr基因阳性菌株15株（3．25％），包括qnrA基因阳性株5株（4株阴沟肠杆菌和1株解鸟氨酸克雷伯菌）、qnrB基因阳性株4株（2株肺炎克雷伯菌和2株大肠埃希菌）、qnrS基因阳性株6株（2株肺炎克雷伯菌和4株大肠埃希菌）；检出52株细菌（包括42株大肠埃希菌、4株阴沟肠杆菌和6株克雷伯菌属细菌）携带aac（6’）-Ⅰb-cr。15株qnr基因阳性的菌株同时携带aac（6’）-Ⅰb-cr，药敏结果显示对亚胺培南敏感但对多种抗生素耐药。15株qnr基因阳性的菌株中7株质粒接合传递试验成功，临床株对喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药性部分传递给了受体株。结论qnr基因在温州地区环丙沙星耐药的肠杆菌科细菌临床株中较少见，而aac（6’）-Ⅰb-cr基因存在较普遍。

1株携带qnrB4及aac(6′)-Ⅰb-suzhou型基因同时产ESBLs、AmpC酶多药耐药大肠埃希菌的调查

目的了解1株产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌的耐药机制。方法采用纸片扩散法检测1株大肠埃希菌对19种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)检测6种耐药基因:qnrA、qnrB、qnrC、qnrS、qepA、aac(6′)-Ⅰb,并对qnrB、aac(6′)-Ⅰb基因测序后进行BLAST比对分析。结果该菌株除对碳青霉烯类、酶抑制剂复合抗菌药物类敏感外,对其余药物均耐药;PCR发现该菌株同时携带qnrB和aac(6′)-Ⅰb,经测序并分别与已在美国国立信息中心登录的DQ303921(qnrB4)和EF375621[aac(6′)-Ⅰb-suzhou]型比对,同源性均>99.0%。结论该菌株多药耐药的机制与产ESBLs、AmpC酶及携带qnrB4和aac(6′)-Ⅰb基因有关;该研究是第一篇从1株产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌中检出同时携带qnrB4和aac(6′)-Ⅰb-suzhou型基因的报道。

金黄杆菌属检出aac(6′)-Ⅱ和ant(2″)-Ⅰ耐药基因研究

目的研究金黄杆菌属临床分离株6种氨基糖苷类耐药机制。方法应用法国生物梅里埃公司的API鉴定条/PSE5.0药敏条进行细菌鉴定和药敏试验,应用PCR法检测两株金黄杆菌属临床分离株6种氨基糖苷类修饰酶基因(AMEs)耐药基因,并对PCR阳性产物测序和同源性分析。结果在两株临床分离菌株均检出2种AMEs基因(aac(6′)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ),同源性分析证实为2种AMEs基因,GenBank注册号分别为EU252512,EU252513,EU252514,EU252515;其他4种AMEs基因(aac(6′)-Ⅰb、aac(3)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、aac(3)-Ⅰ)均阴性。结论金黄杆菌属临床分离株存在AMEs基因,且为两种基因共存。

阴沟肠杆菌的耐药性及对喹诺酮类耐药基因的检测

目的研究临床分离的阴沟肠杆菌的耐药性和其对喹诺酮类抗生素耐药的分子机制。方法采用VITEK2型全自动微生物检测系统鉴定临床分离的细菌,用K-B法测定阴沟肠杆菌对25种抗生素的敏感性,用聚合酶链反应检测耐环丙沙星的阴沟肠杆菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因,包括qnrS、qnrA、qnrB、qepA和aac(6’)-Ib,并对阳性的aac(6’)-Ib结果进行测序分析。结果 71株阴沟肠杆菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为46.5%和40.8%,对第一、二、三代头孢菌素类药物的耐药率在50%以上,对青霉素类药物的耐药率在70%以上,对含β-内酰胺酶抑制剂复合物的耐药率在50%以上,对氨基糖苷类药物(庆大霉素、妥布霉素)的耐药率在46.5%以上,对碳青霉烯类药物的敏感性最好,对亚胺培南、美罗培南的耐药率为0。37株耐环丙沙星的阴沟肠杆菌中1株检出qnrA基因(2.7%),4株检出qnrS基因(10.8%),qnrB基因全阴性,qnr基因的总阳性率为13.5%。2株检出qepA基因(5.4%)。25株检出aac(6')-Ib基因(67.6%),经测序证实其中5株为aac(6')-Ib-cr(13.5%)。1株菌同时携带qnrS和aac(6')-Ib-cr基因。质粒介导的喹诺酮类耐药基因的总携带率为29.7%。结论临床分离的耐喹诺酮类药物的阴沟肠杆菌携带qnrA、qnrS、qepA和aac(6')-Ib-cr基因,未检出qnrB。qnr、qepA和aac(6')-Ib-cr基因引起质粒介导的阴沟肠杆菌对喹诺酮类抗生素的耐药。