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题名人AADC基因在cos-7细胞中的表达和活性检测
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作者
杨慧
赵焕英
张智
段德义
蔡青
徐群渊
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机构
首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室
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出处
《中国组织化学与细胞化学杂志》
CAS
CSCD
2002年第4期365-369,共5页
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基金
国家重点基础研究规划 (G19990 5 40 0 8)
教育部高等学校骨干教师资助计划
+1 种基金
北京市教委科技发展计划
北京市跨世纪优秀人才工程
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文摘
目的 研究人芳香族左旋氨基酸脱羧酶 (AADC)基因在多巴胺代谢过程中的作用。方法 从人胎儿黑质组织中提取总RNA ,以RT PCR法扩增AADCcDNA片段 ,克隆于 pGEM T载体中。测序正确后再构建真核表达载体 ,转染猴肾成纤维细胞COS 7,原位杂交检测AADC表达 ,加入L DOPA后 ,用高效液湘色谱测定转AADC细胞的多巴胺(DA)生成量 ,以了解转基因细胞AADC基因的功能活性。结果 RT PCR扩增出 144 2bp的cDNA片段与Genbank[NM 0 0 0 790 ]登录的序列相同 ,构建真核表达载体 pBK RSV AADC ,原位杂交证实其在COS 7表达阳性率为 70 % - 80 % ,在AADC活性作用下实验组的DA生成量是对照组的 4倍以上 (P <0 0 1)。结论 所克隆的AADC基因可在真核细胞中表达并具有生物活性。可望用于帕金森病的基因治疗。
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关键词
人aadc基因
COS-7细胞
表达
活性检测
芳香族左旋氨基酸脱羧酶
帕金森病
基因治疗
原位杂交
多巴胺
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Keywords
aadc
PD disease
gene therapy
In situ hybridization
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分类号
R742.5
[医药卫生—神经病学与精神病学]
R394.
[医药卫生—医学遗传学]
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题名芳香族L-氨基酸脱羧酶缺乏症2例报告及文献复习
被引量:1
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作者
陈先睿
许锦平
陈玲
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机构
厦门大学附属第一医院儿科
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出处
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期365-368,共4页
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文摘
目的报道芳香族L-氨基酸脱羧酶缺乏症(AADCD)患儿的临床表现及基因特征。方法分析2例AADCD患儿的临床资料及基因结果,并复习相关文献。结果2例女性患儿,均为新生儿期起病,表现为喂养困难、运动发育落后、眼球震颤、痉挛发作。2例患儿均于1岁余行基因检测,发现DDC基因第13外显子的杂合突变c.1234C>T,例1来源于母亲,例2来源于父亲;同时例1和例2也均携带新的杂合突变c.170A>G(p.I57T)和c.179T>C(p.V60A),临床意义不明。结论2例AADCD患儿均有典型临床表现,早期基因检测识别确诊有助于改善预后。
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关键词
芳香族L-氨基酸脱羧酶
aadc缺乏症
基因突变
DDC基因
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Keywords
aromatic L-amino acid decarboxylase deficiency
aadc deficiency
gene mutation
DDC gene
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分类号
R725.9
[医药卫生—儿科]
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题名N-乙酰基色胺的异源生物合成和抑藻活性研究
被引量:1
- 3
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作者
张胜男
朱春苗
江婧娴
马丽艳
张风丽
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机构
上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室
中国水产科学研究院东海水产研究所
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出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2020年第2期137-144,共8页
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基金
国家重点研发计划(No.2018YFC0310900)。
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文摘
目的 用Streptomyces lividans GX28异源合成N-乙酰基色胺,并研究N-乙酰基色胺的抗赤潮藻活性。方法 前期研究发现Bacillus atrophaeus C89芳香族氨基酸脱羧酶(aromatic l-amino acid decarboxylase, AADC)能将L-色氨酸脱羧成L-色胺。氨基酸多序列比对发现S. lividans GX28基因组中存在使色胺乙酰化的酶。通过克隆、重组将aadc基因转入S. lividans GX28中构建重组菌株,HPLC检测目标产物,NMR鉴定化合物的结构。检测化合物对3种赤潮微藻的毒性。结果 S. lividans GX28中的蛋白WP_015609847.1含有芳烷基胺N-乙酰转移酶(alkyl amine N-acetyltransferase, AANAT)的底物结合位点(P_(64)和F_(188))和催化位点(Y_(168)),推测其为AANAT。宿主的发酵产物中分离得到N-乙酰基色胺。N-乙酰基色胺对墨西哥原甲藻的生长具有较强的抑制作用(IC_(50)=9.56mg/L)。结论 推测aadc基因在链霉菌中异源表达。重组链霉菌中检测到N-乙酰基色胺,并对N-乙酰基色胺的生物合成途径进行推测。N-乙酰基色胺对P. mexicanum的生长具有显著的抑制作用。本研究为抑藻化合物的生物合成研究奠定了基础。
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关键词
N-乙酰基色胺
AANAT
aadc基因
异源表达
抑藻剂
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Keywords
N-acetyltryptamine
AANAT
aadc gene
Heterologous expression
Algicide
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分类号
R9
[医药卫生—药学]
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