HPLC法同时测定脑脉泰胶囊中12种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定脑脉泰胶囊中3′-羟基葛根素、2-羟基红花黄色素A、葛根素、葛根素芹菜糖苷、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、二苯乙烯苷、木犀草苷、染料木苷、木犀草素、丹酚酸B、迷迭香酸的含量。方法分析采用KromasilC_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相乙腈-水(含1.0g/L磷酸),梯度洗脱;体积流量0.8mL/min;柱温30℃;检测波长280nm。再进行聚类分析、主成分分析。结果12种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率97.07%~98.30%,RSD0.86%~1.82%。10批样品聚为4类,4种主成分累积方差贡献率达86.262%。结论该方法简便稳定,可靠准确,可为脑脉泰胶囊的质量控制提供科学依据。

葛藤花HPLC指纹图谱建立及3种成分含量测定

目的建立葛藤花HPLC指纹图谱,并测定染料木苷、鸢尾苷、染料木素的含量。方法分析采用AQ-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长260 nm。再进行聚类分析和主成分分析。结果10批药材指纹图谱中有17个共有峰,相似度大于0.970。3种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率100.50%~104.30%,RSD 1.93%~5.21%。各批药材聚为2类,3种主成分累积方差贡献率为84.822%。结论该方法稳定可靠,可用于葛藤花的质量控制。

不同采收时间茵陈药材HPLC指纹图谱研究

目的建立10个不同采收期批次茵陈药材的HPLC指纹图谱,考察整个生长期中主要功效成分合成累积变化规律,揭示绵茵陈和花茵陈药材的整体质量特征,为临床合理用药提供科学数据支撑。方法基于3~12月份采收的10批茵陈药材建立HPLC指纹图谱并进行相似度评价,以共有峰的相对峰面积为指标,采用SPSS22.0软件对不同采收时间茵陈药材进行聚类分析和偏最小二乘判别分析、评价。结果建立了10批不同采收时间茵陈药材指纹图谱,确定18个共有峰,共指认出5个共有成分。10批药材样品可分为3类,其中3、4、5月份采收的茵陈样品聚为第一类,6、7、8、9月份样品聚为第二类,10、11、12月份样品聚为第三类。结论不同采收时间的茵陈药材功效成分种类和含量存在不同,其中绵茵陈(采收期3、4、5月份)和花茵陈(采收期6、7、8、9月份)药材中功效成分累积量差异明显,说明《中华人民共和国药典》对绵茵陈和花茵陈进行分类临床运用的科学性,同时也表明以绿原酸和滨蒿内酯分别作为两者指标成分进行质量控制的合理性。

川西小黄菊HPLC指纹图谱建立及7种成分含量测定

目的建立川西小黄菊HPLC指纹图谱,并测定绿原酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素、芹菜素的含量。方法分析采用Agilent ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,0.5μm);流动相0.5%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长350 nm。再进行主成分分析、偏最小二乘法判别分析和聚类分析。结果14批样品指纹图谱中有12个共有峰,相似度0.761~0.975。7种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9991),平均加样回收率84.00%~105.11%,RSD 1.28%~2.86%。各批样品聚为3类,发现7种差异成分,包括峰4(木犀草素-7-O-葡萄糖苷)、12(芹菜素)、9(芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷)、8、11(木犀草素)、5(木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷)、2。结论该方法精密稳定,专属性强,重复性好,可用于川西小黄菊的质量控制。

基于HPLC-QAMS多组分定量联合多元统计分析及加权TOPSIS法的畲药树参综合品质评价

目的建立同步检测畲药树参中紫丁香苷、绿原酸、芥子醛葡萄糖苷、松柏醇、芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量的高效液相色谱一测多评(HPLC-QAMS)方法,并采用多元统计分析及加权优劣解距离(technique for order preference by similarity to ideal solution method,TOPSIS)法对其品质进行综合评价。方法以Waters Xbridge C 18色谱柱;乙腈-0.05%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长260 nm。以山柰酚-3-O-芸香糖苷为参照物,建立内参物与其他8个待测成分的相对校正因子(relative correction factor,RCF),进行RCF耐用性考察及色谱峰定位,同时与外标法实测结果进行对比,验证HPLC-QAMS法准确性和可靠性。运用主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)等多元统计分析以及W-TOPSIS法对9个成分HPLC-QAMS法含量结果的相关性进行分析,挖掘影响畲药树参产品质量的主要潜在标志物,建立畲药树参综合质量优劣评价方法。结果9种成分分别在3.27~81.75μg/mL、9.85~246.25μg/mL、0.43~0.75μg/mL、0.31~7.75μg/mL、1.58~39.50μg/mL、0.59~14.75μg/mL、1.26~31.50μg/mL、4.55~113.75μg/mL和1.98~49.50μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率96.82%~100.07%(RSD<2.0%);HPLC-QAMS和外标法(ESM)含量测定结果差异无统计学意义(P>0.05),HPLC-QAMS法可用于畲药树参多组分定量控制;多元统计分析结果显示,前2个主成分累计方差贡献率89.589%,绿原酸、紫丁香苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸是影响畲药树参产品质量的主要潜在标志物;加权TOPSIS法结果显示浙江地区所得畲药树参质量最优,其次为江西、安徽、湖南和湖北产树参,云南和贵州产树参位于排名后4位。结论所建立的HPLC-QAMS多组分定量控制方法,操作便捷、结果准确;多元统计分析联合加权TOPSIS法全面客观,可用于畲药树参品质的综合评价。

基于HPLC-UV-QDa检测不同剂型中噻唑膦和吡虫啉

建立了高效液相色谱-紫外检测器-质谱(HPLC-UV-QDa)测定5种不同剂型产品中噻唑膦和吡虫啉含量的分析方法。样品以乙腈+水(0.05%甲酸)为流动相,采用C18色谱柱进行梯度洗脱,结合紫外和质谱串联检测器进行定性和定量分析。研究结果显示,在质量浓度0.05~50 mg/L,噻唑膦、吡虫啉的线性关系良好,R2分别为0.9992~0.9999和0.9991~0.9996。在0.5、50、500 mg/kg等3个添加水平下,噻唑膦、吡虫啉的平均回收率分别为90.2%~103.9%和94.7%~104.1%,相对标准偏差(RSD)分别为1.04%~6.69%和1.27%~5.88%。噻唑膦和吡虫啉在5种基质中无明显基质效应,检出限分别为0.005和0.01 mg/L,定量限分别为0.02和0.04 mg/kg。方法灵敏度高、稳定性好、准确度高,适用于不同剂型产品中噻唑膦和吡虫啉的分析。

HPLC法同时测定槟榔四消丸中15种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定槟榔四消丸中没食子酸、儿茶素、表儿茶素、大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷、绿原酸、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酸、香附烯酮、木犀草素、α-香附酮、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。方法分析采用Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长260 nm。再进行聚类分析、主成分分析。结果15种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率96.00%~101.00%,RSD 0.50%~1.50%。15批样品聚为2类,4种主成分累积方差贡献率为90.004%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于槟榔四消丸的质量控制。

HPLC-FP法同时测定新品富硒竹笋中10种核苷类成分的含量

目的:建立同时测定不同品种富硒竹笋中胞嘧啶、尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、腺嘌呤、鸟苷、胸苷、腺苷10种核苷类化合物含量的方法。方法:运用HPLC法同时测定21种不同品种竹笋的核苷类化合物含量,色谱柱为InertsilODS-3C_(18),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为260nm,流速为0.8 mL·min~(-1),柱温为30℃,进样量为20μL。绘制21种富硒竹笋的指纹图谱进行相似度评价,确定共有峰,并用主成分分析、相关性分析和聚类分析对21种不同富硒竹笋的核苷类化合物含量测定结果进行分析。结果:10种核苷类成分在30 min内达到分离,线性关系良好(R2≥0.9990),精密度、稳定性、重复性、准确度试验RSD均小于2%。不同品种富硒竹笋中10种核苷类成分含量与结构比差异明显,并且核苷类化合物成分指标互相间存在着不同程度的相关性。通过主成分分析,提取了4个主成分,并确定了胸苷、胸腺嘧啶、腺苷、鸟苷为4项核心指标,可用于评价不同品种富硒竹笋的品质;通过相关性分析,得出尿嘧啶与胞苷、鸟苷与胸苷、胸苷与腺苷等指标间相关性较高,指标之间的含量会互相影响;通过聚类分析,得出新品富硒竹笋主要集中为一类,市场上常见的富硒竹笋主要分为两类。结论:该实验方法操作快速、简便,重现性好,可用于21种富硒竹笋中10种核苷类化合物的含量测定。同时,测定结果为竹笋的后期高效开发和利用提供理论依据。

HPLC法同时测定安神胶囊中7种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定安神胶囊中斯皮诺素、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲的含量。方法分析采用Inertsustain C_(18)色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相甲醇-乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长203、270 nm。再进行主成分分析、偏最小二乘判别分析。结果7种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率96.12%~102.70%,RSD 0.31%~1.83%。10批样品按厂家分为2类,峰5(五味子醇甲)、峰4(丹酚酸B)为质量差异标志物。结论该方法简便灵敏,专属性强,重复性好,可用于安神胶囊的质量控制。

HPLC-MS/MS法测定盐酸拉贝洛尔中潜在基因毒性杂质

为了更好地控制盐酸拉贝洛尔中潜在的基因毒性杂质,保证用药安全,建立了高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法检测盐酸拉贝洛尔中潜在遗传毒性杂质N-亚硝基拉贝洛尔。液相色谱条件:以Waters ACQUITY UPLC CSH C_(18)(150 mm×3.0 mm,1.7μm)为色谱柱,流动相A为0.01 mol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液,流动相B为乙腈溶液,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,柱温为50℃,进样体积为10μL。以电喷雾电离源为离子源,负离子模式,采用多反应监测,建立质谱条件,对盐酸拉贝洛尔中N-亚硝基拉贝洛尔进行定量检测。结果表明:N-亚硝基拉贝洛尔质量浓度在1.01~100.60 ng/mL范围内有良好的线性关系;低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)为96.84%~99.53%;检测限和定量限分别为0.01 ng/mL和0.03 ng/mL;6批盐酸拉贝洛尔样品中N-亚硝基拉贝洛尔的含量为0.37~0.79 ng/mL。所提出的方法灵敏度高、专属性强,可用于测定盐酸拉贝洛尔中的N-亚硝基拉贝洛尔,为盐酸拉贝洛尔的质量控制提供参考。

心脑欣片HPLC指纹图谱建立及7种成分测定

目的:建立心脑欣片HPLC指纹图谱,并测定红景天苷、酪醇、没食子酸、没食子酸乙酯、对香豆酸、咖啡酸和绿原酸的含量。方法:心脑欣片75%甲醇提取液的分析采用WondaSil C18-WR色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇(A)-0.1%磷酸(B),梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温为35℃;检测波长为275 nm;进样量为20μL。对心脑欣片HPLC指纹图谱进行聚类分析、主成分分析。以没食子酸为内标,采用一测多评法测定多种成分含量。结果:11批样品中HPLC指纹图谱中有24个共有峰,相似度均大于0.960。各批次样品分为3类,4个主成分累积方差贡献率达95.045%,7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.995),平均加样回收率为96.76%~104.02%,RSD值为0.05%~1.48%。一测多评法结果与外标法接近。结论:该方法简单可靠、重复性好,可用于心脑欣片的质量控制。

HPLC法同时测定健腰密骨片浸膏粉中5种指标成分

目的:建立健腰密骨片浸膏粉的多成分定量分析方法,为评价浸膏粉中间体的质量提供依据。方法:采用HPLC法,以乙腈-磷酸盐缓冲液为流动相,梯度洗脱,测定健腰密骨片浸膏粉中5种成分的含量。结果:木兰花碱、丹酚酸B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ5种成分在各自质量浓度范围内呈良好线性关系,r≥0.9997;5种化合物的平均回收率分别为100.47%、104.37%、95.38%、95.93%、96.66%。该方法的专属性、重复性均良好。结论:该分析方法准确、重复性好,可作为健腰密骨片浸膏粉的质量控制方法。

HPLC双波长法同时测定甘草药材中5种活性成分含量及主成分分析

目的:建立HPLC双波长法同时测定甘草中甘草苷、甘草素、异甘草苷、异甘草素和甘草酸含量,为甘草质量的综合评价提供参考。方法:采用Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为248 nm和362 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min。使用统计学软件SPSS 21.0对15批甘草的测定结果进行主成分分析。结果:5种活性成分分离效果良好,精密度、重复性、稳定性、线性关系、加样回收率和耐用性均良好。主成分分析可知,新疆甘草总体质量较好并且差异较小。结论:本法可同时测定5种成分的含量且可靠简便,结合主成分分析可为甘草质量的综合评价提供参考。

HPLC法同时测定风热感冒颗粒中5种成分

目的:建立能同时测定风热感冒颗粒中5种成分含量的方法。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃;1.0 mL/min乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱;多波长转换法测定,检测波长327 nm、278 nm;对绿原酸、牛蒡苷、异绿原酸A、连翘苷、芸香苷的含量测定方法进行方法学验证,将实验结果运用聚类分析(CA)进行评价。结果:在其各自相对应的浓度范围内,风热感冒颗粒中的5种成分均呈现出良好的线性关系(n≥0.9991),平均加样回收率分别为98.67%、97.44%、97.94%、98.44%、100.03%,RSD分别为1.61%、1.38%、1.70%、1.55%、0.96%;10批次样品中绿原酸、芸香苷、异绿原酸A、连翘苷、牛蒡苷成分含量分别为0.091 mg/g~0.227 mg/g、0.094 mg/g~0.258 mg/g、0.084 mg/g~0.274 mg/g、0.080 mg/g~0.217 mg/g、0.809 mg/g~2.584 mg/g;10批样品明显聚为两类,聚类情况为:s3、s10、s4、s2、s5、s9为一类,s1、s8、s6、s7为一类。结论:所建立的方法科学准确,可用于风热感冒颗粒的含量测定。

基于HPLC指纹图谱和多成分含量综合评价扶正胶囊的质量

目的建立壮药制剂扶正胶囊指纹图谱和多指标成分含量的测定方法,并对其进行质量评价。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)》建立12批扶正胶囊样品的指纹图谱,并进行相似度评价、共有峰确认;以指纹图谱共有峰峰面积为变量,采用SPSS 20.0软件进行聚类分析和主成分分析。采用同一HPLC法测定12批样品中甘草苷、特女贞苷、3,6′-二芥子酰基蔗糖、甘草酸铵的含量。结果12批扶正胶囊样品共有22个共有峰,相似度均大于0.91;指认出甘草苷(峰8)、特女贞苷(峰10)、3,6′-二芥子酰基蔗糖(峰11)、甘草酸铵(峰21)4个共有峰;12批样品可聚为3类,200801、200802、200803为Ⅰ类,样1~样8为Ⅱ类,221101为Ⅲ类;200802的综合得分(2.540)最高。12批样品中,甘草苷、特女贞苷、3,6′-二芥子酰基蔗糖、甘草酸铵的含量分别为0.44~0.73、1.28~2.47、0.08~0.12、1.31~1.81 mg/粒。结论12批扶正胶囊样品的主要成分相似但含量有所差别,以200802的质量最优;所建指纹图谱和多指标成分含量测定方法专属性强、准确度高,结合化学模式识别分析可用于扶正胶囊的质量评价。

HPLC法测定五味子颗粒中7种木脂素成分的含量

建立了同时测定五味子颗粒中7种木脂素成分含量的高效液相色谱(HPLC)法。采用Poroshell 120 SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm)进行分离,四氢呋喃水-乙腈梯度洗脱,流速为0.6 mL/min,柱温为30℃,检测波长为220 nm,进样量为10μL。结果表明:该方法对五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素的检测下限(LOD)分别为0.017、0.041、0.156、0.165、0.136、0.166和0.113μg/mL,线性关系良好,相关系数(r)均大于0.9999,平均加样回收率为98.1%~100.9%,相对标准偏差(RSD)均小于3.0%。因此,该方法重复性好、灵敏度高,所得含量关系可对五味子颗粒进行质量控制,特别是可为预防南五味子掺伪提供参考,也为其他含五味子制剂的质量标准修订奠定了基础。

Correlation analysis between the HPLC fingerprints and in vitro antibacterial activity of ethyl acetate extracts from Radix isatidis

Aim To study the correlation between the HPLC fingerprints and in vitro antibacterial activities of EtOAc extracts of Radix isatidis from various sources. Methods Ten batches of Radix isatidis EtOAc extracts were analyzed with HPLC and the fingerprints were established. The influence of EtOAc extracts on the thermogenic curve of growth of Escherchia coli was obtained by microcalorimetry. The chemical differences of EtOAc extracts of Radix isatidis from various sources in the HPLC fingerprints were probed with hierarchical clustering analysis and similarity analysis. The correlation between the HPLC fingerprints and in vitro antibacterial activities was analyzed with multivafiant correlation analysis. Results Close correlation existed between the HPLC fingerprints and in vitro antibacterial activities of EtOAc extracts of Radix isatidis. Conlusion The combination of HPLC fingerprints and antibacterial activities can be used to discover principle components of Radix isatidis on bioactivity.

60%烯啶·呋虫胺水分散粒剂的HPLC分析

采用反相高效液相色谱法,以乙腈+水为流动相,使用ZORBAX Eclipse C18色谱柱和二极管阵列(DAD)检测器,在270 nm检测波长下,对60%烯啶·呋虫胺水分散粒剂中有效成分进行分离和定量分析。结果表明:该分析方法线性关系良好,烯啶虫胺、呋虫胺的相关系数分别为0.9998和0.9997。方法的精密度和准确度符合检测要求,烯啶虫胺、呋虫胺的相对标准偏差分别为0.170%和0.132%,平均回收率分别为99.64%和99.78%。

不同品种红花HPLC指纹图谱及其化学成分差异性研究

目的采用HPLC指纹图谱结合化学模式识别评价不同品种红花Carthamus tinctorius L.质量。方法建立HPLC指纹图谱,采用HPLC-Q-TOF-MS法对共有峰进行鉴定,结合聚类分析、偏最小二乘判别分析进行质量评价,筛选差异成分。结果43批样品指纹图谱中有12个共有峰,鉴定出6-羟基山柰酚-3,6,7-三-O-β-D-葡萄糖苷、烟花苷等11种成分,相似度为0.919~0.998。不同品种样品聚为3类,9,12,13-三羟基-10-十八碳烯酸等6种成分为质量差异标志物。结论该方法可有效识别不同品种红花成分差异,为该药材选育及质量控制提供依据。

复方金银花颗粒HPLC指纹图谱研究

目的探讨复方金银花颗粒的质量评价方法。方法采用InerSustain C18色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,柱温为35℃,检测波长为320 nm,进样量为10μL。以葛根素为内标物,分析27批复方金银花颗粒样品,并进行相似度评价,确定共有峰,进行聚类分析和主成分分析。结果27批不同生产厂家不同批次的复方金银花颗粒有20个共有峰,相似度在0.907~0.991,经主成分分析,20个共有峰可综合为4个主成分,累计贡献率达到85.804%。结论本研究建立的复方金银花颗粒HPLC指纹图谱可以为其质量控制与评价提供参考。