ABCB4基因外显子12和23突变与妊娠期肝内胆汁淤积症的关系

目的:探讨ABCB4基因外显子12和23的突变与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:从31例ICP患者外周血标本中提取出基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增ABCB4基因外显子12和23,PCR产物经DNA序列测定检测突变情况。结果:31例ICP患者均扩增出ABCB4基因外显子12和23的靶基因片段,未见外显子12和23的缺失,DNA测序分析31例ICP患者ABCB4基因外显子12和23,未发现点突变。结论:ABCB4基因外显子12和23的突变与中国皖南地区的ICP发生无关或关联很小,皖南地区ICP患者中可能存在其他ABCB4基因突变热点。ABCB4基因的突变与中国人ICP发病的相关性仍应进行更大样本的研究和其他外显子的筛查。

肝细胞ABCB4基因与胆囊胆固醇结石关系的研究

目的探讨胆囊胆固醇结石的形成与肝脏组织内ABCB4基因表达的相关性。方法实验组选取14例胆囊胆固醇结石患者的肝组织标本,以10例非胆囊结石患者的肝组织标本为对照组。应用RT-PCR技术检测两组患者肝脏组织ABCB4基因的表达强度;应用免疫组化方法检测两组患者肝脏组织Pgp3蛋白的表达强度,所有检测结果行统计学分析。结果实验组和对照组ABCB4mRNA相对表达量分别为(0.91±0.06)和(1.15±0.04),两者比较差异有统计学意义(P<0.05),实验组Pgp3蛋白表达量(14.29%)明显低于对照组(80%)(P<0.05)。结论 ABCB4基因的表达降低使其编码的Pgp3蛋白表达降低,从而可能导致胆囊胆固醇结石的形成。

妊娠期肝内胆汁淤积症中ABCB4基因外显子23突变的研究

目的:探讨ABCB4基因外显子23点突变与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法对31例妊娠期肝内胆汁淤积症患者扩增ABCB4基因外显子23,PCR产物进行DNA序列测定,以检测突变情况。结果:31例妊娠期肝内胆汁淤积症患者的血样标本,均扩增出ABCB4基因的外显子23,未发现外显子23的缺失。随机挑选20例标本测定外显子23的DNA序列,未发现点突变。结论:ABCB4基因外显子23与中国皖南地区的ICP发生无关或关联很小,皖南地区ICP患者中可能存在其他的ABCB4基因突变热点。ABCB4基因点突变与ICP发病的相关性仍应进行更大样本量的研究及其他突变热点的筛查。

乙型肝炎病毒感染与ABCB4基因及胆囊胆固醇结石形成的关系

目的探讨乙型肝炎(乙肝)病毒感染对ABCB4基因的影响以及与胆囊胆固醇结石形成的相关性。方法选择行胆囊切除的胆囊结石患者48例,HBs Ag阳性28例为观察组,HBs Ag阴性20例为对照组。两组胆囊分别做HE染色及免疫组化S-P法检测乙肝病毒表面抗原和核心抗原,应用Real-time PCR技术检测两组的ABCB4基因表达水平。结果 HBs Ag在胆囊黏膜组织中的表达,观察组阳性率为57.1%,对照组全为阴性,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HBc Ag在胆囊黏膜中的表达,观察组阳性率为28.6%,对照组全为阴性,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组ABCB4基因mRNA表达(0.909±0.059)较低,对照组ABCB4基因mRNA表达(1.149±0.039)较高,两组比较差异有统计学意义(t=-11.062,P<0.05)。结论乙肝病毒感染患者胆囊ABCB4基因的表达下调,可能导致胆囊胆固醇结石的形成。

妊娠期肝内胆汁淤积症中ABCB4基因外显子12突变的研究

目的探讨ABCB4基因外显子12的突变与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法从31名ICP患者外周血标本中提取出基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增ABCB4基因外显子12,PCR产物经DNA序列测定检测突变情况。结果31名ICP患者均扩增出ABCB4基因外显子12的靶基因片断,未见外显子12的缺失,随机挑选20例标本测定外显子12的DNA序列,未发现突变。结论ABCB4基因外显子12的突变与中国皖南地区的ICP发生无关或关联很小,皖南地区ICP患者中可能存在其他的ABCB4基因突变热点。ABCB4基因的突变与中国人ICP发病的相关性仍应进行更大样本量的研究和更多外显子的筛查。

妊娠期肝内胆汁淤积症与ABCB4基因外显子8突变的相关性研究

目的:研究ABCB4基因外显子8突变的情况,以探讨其与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:对15例中国皖南地区妊娠期肝内胆汁淤积症患者抽外周血提取基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)结合DNA序列测定的方法对ABCB4基因外显子8的突变情况进行筛查,并确定其具体的突变性质。结果:15例标本均扩增出AB-CB4基因外显子8的目的片段。对DNA序列测定结果进行分析,发现其中有5例(33.33%)存在c.711A>T杂合性突变。结论:ABCB4基因外显子8的突变可能与中国人群ICP的发病存在一定的相关性。

ABCB4基因外显子6突变与妊娠期肝内胆汁淤积症的相关研究

目的:探讨ABCB4基因外显子6突变与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:抽提12例ICP病例标本外周血DNA,进行PCR扩增。对PCR产物进行DNA序列测定,以明确其具体的突变性质。结果:12例妊娠期肝内胆汁淤积症患者的血样品均扩增出ABCB4基因外显子6的靶基因片段,对12例样品的PCR产物全部测定DNA序列,发现7例标本ABCB4基因第504位碱基发生了变化,其中3例为c.504C>T杂合突变,4例为c.504C>T纯合突变。结论:本研究提示ABCB4基因外显子6突变与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)的发病具有一定的相关性。

ABCB4基因与胆汁淤积性疾病的研究进展

The ABCB4 gene,also called MDR3,encodes the MDR3 protein which is localized to the hepatocyte canalicular membrane and is demonstrated to be a phosphatidylcholine translocase.The recent study showed that ABCB4 deficiency was associated with several cholestatic disorders,but the pathogenesis is not clear.This review highlights recent advances in the structure and function of ABCB4 gene,and the relationship between ABCB4 gene and cholestatic diseases.

妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘ABCB4基因表达与妊娠结局的关系

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)孕妇胎盘ABCB4基因表达水平,分析其与妊娠结局的关系。方法选取2017年5月至2020年11月于延安大学咸阳医院分娩的ICP孕妇98例纳入ICP组,并将ICP组孕妇按照血清总胆汁酸水平将<40 mol/L者纳入轻度组(n=61),≥40 mol/L者纳入重度组(n=37),另选取健康孕妇50例纳入对照组,收集纳入对象娩出的胎盘绒毛组织,通过RT-PCR和免疫组化法分别检测胎盘组织ABCB4 mRNA和ABCB4蛋白表达水平,对比不同组别胎盘绒毛组织中ABCB4基因表达的差异,通过Logistic回归分析其与ICP孕妇妊娠结局的关系。结果ICP组胎盘组织中ABCB4 m RNA表达水平为7.59±2.01,明显低于对照组的26.91±3.45,ABCB4蛋白阳性表达率为58.16%,明显低于对照组的96.00%,差异均有统计学意义(P<0.05);重度组胎盘组织中ABCB4 m RNA表达水平6.57±1.29,明显低于轻度组的8.21±1.43,ABCB4蛋白阳性表达率为43.24%,明显低于轻度组的67.21%,差异均有统计学意义(P<0.05);ICP组孕妇中46例出现不良妊娠结局,发生率为46.94%;ICP组孕妇羊水污染、胎儿窘迫、早产、新生儿窒息、围生儿死亡发生率分别为25.51%、23.47%、28.57%、17.35%、8.16%,明显高于对照组的8.00%、8.00%、4.00%、4.00%、0,差异均有统计学意义(P<0.05);Logisitic回归分析结果显示,高龄、发病时孕周≤34周、疾病程度高、ABCB4蛋白阴性表达、ABCB4 m RNA低表达是ICP孕妇发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)。结论ICP孕妇胎盘组织ABCB4基因呈现低表达状态,胎盘组织ABCB4基因表达水平与妊娠结局关系密切,ABCB4基因表达水平下降可增加不良妊娠结局风险。

ABCB4基因突变相关肝硬化误诊为Wilson病1例报告

1病例资料患者男性,48岁,因“检查发现肝功能异常,肝硬化5年”于2019年8月7日入院。患者曾于2014年体检发现“谷酰转肽酶”异常升高,肝脏B超提示“肝硬化”,当时未诉不适,给予“护肝”治疗,肝酶指标未恢复正常。患者因无明显不适症状,此后未积极求诊、治疗。2019年7月初,患者出现巩膜及皮肤黄染,[JP3]于当地某大学附属医院就诊,实验室检查提示:WBC 2.57×109/L,PLT 52×109/L;肝功能异常:TBil 67μmol/L,DBil 33.2μmol/L,[JP3]ALT 58 U/L,AST 86 U/L,GGT 180 U/L,TP 54.8 g/L,Alb 31.1 g/L;血氨升高(123μmol/L);凝血指标异常:[JP]凝血酶原时间19.5 s,国际标准化比值1.66,活化部分凝血酶时间51.9 s,纤维蛋白原1.6 g/L,凝血酶时间21.2 s;甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒指标均阴性,自身免疫性肝炎抗体阴性。腹部磁共振平扫、增强及磁共振胰胆管造影示:肝硬化,门静脉高压(脾大,食管胃底静脉曲张),腹水及胆囊结石;肝细胞病理示:较符合自身免疫性肝炎(轻型)。初步诊断为自身免疫性肝炎,肝硬化失代偿期。使用糖皮质激素治疗后,肝功能各项指标无好转,进一步检查发现铜蓝蛋白轻微减低(193 mg/L,参考值220~550 mg/L),24 h尿铜升高(218μg/24 h,参考值<100μg/24 h)。诊断考虑为Wilson病,被推荐至本院进一步诊治。

ABCB4基因的相关疾病研究进展

ABCB4基因编码多药耐药蛋白3(MDR3)主要表达于肝细胞的毛细胆管膜,为磷脂酰胆碱转出酶,将卵磷脂从磷脂双分子层内侧转至膜外的胆汁内。ABCB4基因突变可导致MDR3表达下降和/或功能缺陷从而导致ABCB4缺陷症。随着基因测序的普及和公众对精准医疗的需求,对该基因的深入研究可对以基因型为基础的新治疗方案进行指导。现对ABCB4基因功能和所致疾病新进展进行综述,旨在加强临床医师对ABCB4基因相关疾病的认识。

ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4)基因突变相关性肝硬化合并胆囊结石1例报告

ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4)基因突变疾病谱涉及进行性家族性肝内胆汁淤积3型、胆石症、妊娠期肝内胆汁淤积症、门静脉高压、肝硬化,甚至原发性肝脏、胆道恶性肿瘤等多种疾病。本院肝胆内科收治1例青年男性患者,入院初步诊断为胆囊结石,计划腹腔镜胆囊切除术,术前检查发现该患者肝功能异常、肝硬化、脾大、食管静脉轻度曲张,后进一步行二代测序明确诊断为ABCB4基因突变相关性肝硬化合并胆囊结石,给予熊去氧胆酸胶囊利胆治疗后,肝功能逐渐恢复正常。

妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘abcb4基因的表达与围产儿预后的相关性研究

目的分析妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘abcb4基因的表达与围产儿预后的相关性。方法选取2015年5月—2017年5月期间德阳市人民医院定期产检的60例ICP孕妇设为ICP组,包括轻度ICP36例、重度ICP24例;另选取同期产检正常的30例孕妇设为对照组。分别采用RT-PCR法、免疫组化法测定胎盘组织中abcb4mRNA、abcb4蛋白表达水平,分析其与羊水污染、新生儿Apgar评分及不良预后的关系。结果与对照组相比,ICP组患者羊水污染率明显升高,新生儿Apgar评分明显较低,早产、新生儿窒息、低体重儿发生率明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);轻度ICP、重度ICP患者羊水污染率、新生儿Apgar评分及早产、新生儿窒息发生率比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组相比,ICP组abcb4mRNA水平明显下降,abcb4蛋白表达强度明显降低(均P<0.05);与轻度ICP相比,重度ICP患者abcb4mRNA水平明显下降,abcb4蛋白表达强度明显降低(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,ICP患者胎盘组织abcb4mRNA水平、abcb4蛋白表达强度与羊水污染率、Apgar评分及早产、新生儿窒息发生率均呈负相关(均P<0.05)。结论ICP患者胎盘abcb4基因表达水平与围产儿预后密切相关,尤其是abcb4基因表达水平下降可增加羊水污染、早产、新生儿窒息风险。

ABCB4基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症的相关性分析

目的探讨ABCB4基因c.175C>T(rs2302387)、c.504T>C(rs1202283)和c.711A>T(rs2109505)单核苷酸多态性与河南地区妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病易感性的关系。方法选取2012年4月-2014年11月该院收治的ICP患者54例(ICP组)和正常妊娠者100例(对照组)为研究对象。收集其外周血并提取基因组DNA,采用PCR产物直接测序法分析ABCB4基因c.175C>T、c.504T>C和c.711A>T单核苷酸多态性的分布情况,并与ICP发病率进行关联性分析。结果 c.175C>T多态性在ICP组和对照组中的突变频率分别为26.9%和19.5%(P>0.05),GG、GA、AA 3种基因型频率分别为55.6%、35.7%、9.3%和65.0%、31.0%、4.0%(P>0.05);c.504C>T多态性在ICP组和对照组中的突变频率分别为38.9%和29.5%(P>0.05),GG、GA、AA 3种基因型频率分别为35.1%、51.9%、13.0%和51.0%、39.0%、10.0%(P>0.05);c.711A>T多态性在ICP组和对照组中的突变频率分别为25.0%和18.5%(P>0.05),TT、TA、AA 3种基因型频率分别为55.6%、38.9%、5.6%和67.0%、29.0%、4.0%(P>0.05)。结论 ABCB4基因c.175C>T、c.504T>C和c.711A>T单核苷酸多态性与河南地区ICP发病易感性无关联性。

ABCB4基因突变合并巨细胞病毒感染致婴儿胆汁淤积症的诊治分析并文献复习

目的探讨ABCB4基因突变合并巨细胞病毒(CMV)感染致婴儿胆汁淤积症(IC)患儿的临床特征、基因检测结果和诊治方案。方法选择2019年8月3日,于中山大学附属第七医院就诊并确诊为ABCB4基因突变合并CMV感染致IC的1例婴儿(女性,生后9个月)为研究对象。回顾性分析其临床病例资料,包括临床特征、实验室检查结果及基因检测结果。同时,检索国内外数据库中ABCB4基因突变所致IC患儿的相关文献,并进行文献复习。本研究遵循的程序符合2013年新修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果本例IC患儿在本院诊治结果如下。①病史采集:系G_(2)P_(2),足月顺产,外观无异常,否认新生儿黄疸病史,生后2个月龄时出现皮肤及巩膜呈暗绿色,伴反复呕奶,当地医院治疗并诊断为胆汁淤积性肝病、CMV感染和泌尿系统感染,抗病毒治疗2周后好转出院。出院时,其血清总胆汁酸(sTBA)为152.8μmol/L,CMV-DNA<4×10^(2) copies/mL,口服熊去氧胆酸胶囊10 mg/(kg·d)治疗后,皮肤暗绿色逐渐消退,大、小便正常。出院后定期监测肝功能,sTBA、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)仍然较正常值增高。②实验室检查:血清CMV免疫球蛋白(Ig)G抗体呈阳性、CMV IgM抗体呈阴性,CMV-DNA<55×10^(2) copies/mL。基因检测结果:患儿及其父亲均携带ABCB4基因杂合变异。治疗结果:经口服熊去氧胆酸胶囊10 mg/(kg·d)及谷胱甘肽片0.1 g/次×3次/d治疗后,对患儿定期复查sTBA、GGT。随访到18个月龄时,其各项指标逐渐恢复正常范围。③文献复习结果:共计检索到8篇国内外报道的因ABCB4基因突变引起IC相关文献,纳入14例IC患儿,均被诊断为进行性家族性肝内胆汁淤积3型(PFIC3),伴肝大,sTBA、GGT水平升高等。14例IC患儿中,共检测到ABCB4基因突变位点20个。其中,9例IC患儿接受熊去氧胆酸治疗,7例随访结果显示临床症状及实验室检查指标有所好转。结论携带ABCB4基因突变,可引起IC。对于sTBA升高、肝酶异常的病因不明确、治疗效果不佳IC患儿,建议完善基因检测进一步排查ABCB4基因突变所致胆汁淤积症。

MDR3（ABCB4）、BSEP（ABCB11）和FIC1（ATP881）基因在人绒毛和正常妊娠胎盘组织表达的研究

目的检测肝脏胆盐载体FIC1（ATP881）、BSEP（ABCB11）和MDR3（ABCB4）在正常绒毛和胎盘组织中转录水平和蛋白水平的表达情况，探讨肝脏胆盐载体在人类胎盘胆汁酸排泌过程中的作用和功能。方法选择正常妊娠6～12周的孕妇（早孕组）15例和妊娠38～40周的孕妇（晚孕组）20例，采用实时定量逆转录一聚合酶链反应技术（realtimeRT．PCR）检测绒毛和胎盘组织中上3种载体的mRNA，采用免疫组织化学（S-P）法分别检测后两种载体蛋白在上述35例胎盘组织中的表达，并通过免疫印迹技术分析这两种载体在胎盘组织中的含量。结果在所有绒毛和胎盘组织中均检测到3种载体的mRNA。MDR3mRNA在正常绒毛中的表达量较低为（0．15±0．04），正常晚期妊娠胎盘中表达量为（0．58±0．06），两者比较有显著性差异（P〈0．05）。与早孕组相比，FIC1mRNA表达水平明显由（0．65±0．03）下降至（0．23±0．04），差别有非常显著意义（P〈0．01）。而BSEPmRNA表达无改变（0．06±0．01和0．05±0．01）（P〉0．05）。MDR3蛋白、BSEP蛋白在正常绒毛和胎盘组织中均有表达，且两种载体在正常早孕绒毛及晚期妊娠胎盘分布范围基本一致，主要分布在绒毛合体滋养细胞母体面游离缘。MDR3、BSEP蛋白在绒毛和晚期妊娠胎盘中的表达趋势与其mRNA相似，MDR3蛋白Western印迹条带的光密度值为（11357±3618）（早孕组）和（46753±2834）（晚孕组），两组比较有显著性差异（P〈0．05）。BSEP蛋白早孕组Western印迹条带的光密度值为（1296±436），晚孕组为（1798±575），两组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论3种肝脏胆盐载体FIC1、MDR3和BSEP在正常绒毛和胎盘组织中均有表达，可能参与了胎盘胆汁酸的排泌功能。妊娠期间MDR3、FIC1和BSEPmRNA和蛋白表达发生变化，可能与胎儿生长发育的需要有关。

儿童进行性家族性肝内胆汁淤积症3型一例并文献复习

目的探讨进行性家族性肝内胆汁淤积症3型(PFIC3)的临床及遗传学特点。方法报道1例PFIC3病例。以“儿童”“进行性家族性肝内胆汁淤积症3型”(包括中英文)为检索词,对以下数据库的相关论文进行检索:PubMed、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、CNKI、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据库,收集并分析检索到的病例资料。结果该例为1岁男性患儿,临床表现为胆汁淤积性肝炎,基因测序分析显示其ATP结合盒转运蛋白A4(ABCB4)基因存在纯合错义突变:c.3230C>T(p.T1077M),突变来源于其父母。使用蛋白功能损伤预测软件预测该突变为有害。检索文献后收集到11例PFIC3患儿,部分患儿接受药物治疗,部分患儿接受肝移植,后者基本痊愈。结论PFIC3较罕见,临床以肝内胆汁淤积为特点,进行性加重,患儿常在儿童期或青春期因肝衰竭死亡,诊断依赖于基因检测,肝移植是唯一的治愈方法。该例患儿基因突变位点扩展了ABCB4基因突变谱,为PFIC3的诊断提供依据。

进行性家族性肝内胆汁淤积症3型基因突变分析与临床研究

目的 分析进行性家族性肝内胆汁淤积症3型（PFIC3）临床表现、遗传学特点和基因突变特点.方法 应用聚合酶链反应-直接测序方法对2例临床疑似PFIC3的中国患儿ABCB4基因的27个外显子及其侧翼序列进行突变检测,并对其家庭主要成员进行相应突变基因检测,收集临床资料分析.健康对照组为无血缘关系的健康儿童50例,男27例,女23例,均为汉族.结果 2例患儿主要表现为胆汁淤积、黄疸伴瘙痒、肝大,血清γ-谷氨酰转肽酶、胆汁酸升高.例1为ABCB4基因c.2489ins A和c.3143_3145 delGCAinsCC复合杂合突变,例2为c.966G ＞C（p.G319R）和c.3220G＞ A（p.G1074R）复合杂合突变,均为新发突变;2例患儿父母及例2弟弟均为突变基因携带者.结论 发现了4种尚未见报道的ABCB4基因新突变,c.2489ins A/c.3143_3145delGCAinsCC突变可能与严重临床表型相关.

进行性家族性肝内胆汁淤积3型1例临床特点及基因突变分析

进行性家族性肝内胆汁淤积3型(progressive familial intrahepatic cholestasis type 3,PFIC3)是一种由编码多种耐药蛋白3(multi-drug resistance protein 3,MDR3)的ABCB4(ATP-binding cassette,subfamily B,member 4)基因突变引起的常染色体隐性遗传性疾病[1]。