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敲除aceE基因对大肠杆菌生长和丙酮酸代谢的影响 被引量:3
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作者 宋灿辉 张伟国 《生物加工过程》 CAS CSCD 2013年第6期15-18,共4页
大肠杆菌aceE基因是编码丙酮酸脱氢酶多酶复合体PdhR的关键酶之一。利用Red重组系统敲除大肠杆菌MG1655的aceE基因后,阻断了丙酮酸流向TCA循环,导致丙酮酸的累积,也使菌体生长受到影响,在培养基中补加5 g/L KAc后可以在一定程度上弥补... 大肠杆菌aceE基因是编码丙酮酸脱氢酶多酶复合体PdhR的关键酶之一。利用Red重组系统敲除大肠杆菌MG1655的aceE基因后,阻断了丙酮酸流向TCA循环,导致丙酮酸的累积,也使菌体生长受到影响,在培养基中补加5 g/L KAc后可以在一定程度上弥补菌株在生长上的缺陷。摇瓶发酵36 h,MG1655没有积累丙酮酸,MG1655ΔaceE∷cat菌株可以积累26.77 g/L丙酮酸,为利用大肠杆菌发酵生产丙酮酸奠定了基础。 展开更多
关键词 acee 大肠杆菌 丙酮酸 RED重组
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2018亚洲能源与环境工程会议(ACEEE 2018)
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《决策探索》 2017年第12Z期2-2,共1页
中国·上海2018年1月19日-21日201 8亚洲能源与环境工程会议将于1月1 9日到21日在中国上海召开。会议由上海交大和IACT协会共同主办。本次会议将为学术界、政府及相关产业提供广阔的平台。本次会议将由相关领域的专家演讲。
关键词 环境工程 aceeE 2018 专家演讲 实践需求
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基于ACE/AngⅡ/AT1R通路探讨补肾降压方对盐敏感性高血压大鼠肾纤维化的作用机制
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作者 刘巍 熊兴江 +4 位作者 刘红旭 张竹华 王阶 褚福永 谭玉培 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第9期1269-1275,共7页
目的:探讨补肾降压方对盐敏感性高血压DS大鼠肾纤维化及肾素血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(ACE-AngⅡ-AT1R)信号通路的调节作用,探讨其防治高血压肾损害的作用机制。方法:选用盐敏感性高血压大鼠(Dahl salt-sensit... 目的:探讨补肾降压方对盐敏感性高血压DS大鼠肾纤维化及肾素血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(ACE-AngⅡ-AT1R)信号通路的调节作用,探讨其防治高血压肾损害的作用机制。方法:选用盐敏感性高血压大鼠(Dahl salt-sensitve,DS)48只,随机数字表法分为低盐组、高盐组、缬沙坦组和补肾降压组,喂食以不同浓度钠盐饲料造模后,予药物干预8周。于干预前后测量血压。干预后酶联免疫吸附测定(ELISA)血清中血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))的含量。苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学改变情况,Masson染色观察肾纤维化程度。反转录PCR(RT-PCR)及蛋白质印迹法分别检测肾脏血管紧张素转化酶(ACE)及血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)mRNA及蛋白表达水平。结果:喂食3周不同浓度盐后,喂食高盐各组收缩压均较低盐组升高(P<0.01)。干预后,与低盐组比较,高盐组收缩压升高,Cr、BUN升高,血清AngⅡ及TGF-β_(1)水平升高,HE及Masson染色显示肾脏纤维化程度加重,肾脏ACE及AT1R蛋白及mRNA表达升高(P<0.01)。与高盐组比较,缬沙坦组及补肾降压组收缩压降低,Cr、BUN降低,血清AngⅡ及TGF-β_(1)水平降低,肾脏纤维化程度减轻,肾脏ACE及AT1R蛋白及mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾降压方有平稳降压,改善肾功能的作用,其作用机制可能与调节ACE/AngⅡ/AT1R轴进而抑制TGF-β_(1)达到延缓肾纤维化相关。 展开更多
关键词 盐敏感性高血压 补肾降压方 高血压肾损害 肾纤维化 ACE/AngⅡ/AT1R轴
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从络脉探讨新型冠状病毒感染后嗅觉异常
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作者 王莹威 马辉军 孙赫 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2024年第1期31-35,共5页
新型冠状病毒感染(COVID-19)从发生到现在为止已3年有余,疫情期间中医中药发挥了重要的作用,取得了很好的疗效,但随着时间推移,感染过的人数增多,发现感染后嗅觉异常患者越来越多,西医对其治疗以刺激神经或使其自愈为主,但效果因人而异... 新型冠状病毒感染(COVID-19)从发生到现在为止已3年有余,疫情期间中医中药发挥了重要的作用,取得了很好的疗效,但随着时间推移,感染过的人数增多,发现感染后嗅觉异常患者越来越多,西医对其治疗以刺激神经或使其自愈为主,但效果因人而异且治疗周期长,而嗅觉异常会使患者生活体验感降低、心理状态改变,如焦虑、抑郁等,还会诱发其他系统疾病,所以对于嗅觉异常的情况不容小觑,中医对其认识、治疗有独特之处,故文章从COVID-19致嗅觉异常的现代研究、中医认识及药物应用等方面阐述了嗅觉异常的原因及从络脉入手如何拓展治疗思路进行治疗。 展开更多
关键词 络脉 新型冠状病毒感染(COVID-19) 嗅觉 血管紧张素转化酶2(ACE2) 中医治疗
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产品差异化和市场开放度对城市群空间结构的影响研究
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作者 薛领 张天骄 +1 位作者 张晓林 赵威 《管理现代化》 北大核心 2024年第4期1-8,共8页
城市群是提高地区经济增长和深入实施区域协调发展战略过程中的重要载体。本文尝试结合“新”新经济地理学模型和基于agent计算经济学对多重异质性下城市差异化对企业和人口的空间演化影响进行研究,建立了一个企业生产效率与规模、居民... 城市群是提高地区经济增长和深入实施区域协调发展战略过程中的重要载体。本文尝试结合“新”新经济地理学模型和基于agent计算经济学对多重异质性下城市差异化对企业和人口的空间演化影响进行研究,建立了一个企业生产效率与规模、居民工资等多重异质性的两区域空间经济模型对城市间人口和企业迁移进行动态模拟以研究空间经济演化过程。结果表明:(1)无论是否存在市场进入和退出机制,小城市内部工业产品的差异性越大,越有利于企业和人口向小城市迁移,企业和人口倾向于分散。但是存在市场机制能提高城市内产品差异化对人口和企业迁移的吸引力。(2)城市群中小城市要更多的企业和人口,需要继续鼓励创新生产差异化产品,使城市内的产品更加多样化和差异化。(3)为了使城市内产品差异化发挥更大的作用,整个地区需要更加健全企业进入和退出的市场机制,使得有利可图的资本可以进入市场,同时亏损的企业能够退出市场或者转型升级和改制。 展开更多
关键词 差异化 城市群 “新”新经济地理学 ACE
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ACES色彩管理流程及其在影视数字合成中的应用 被引量:1
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作者 顾春华 王少云 +2 位作者 平凯磊 符云飞 霍晓东 《现代电影技术》 2024年第4期22-30,共9页
目前,学院颜色编码系统(ACES)已在影视视效制作领域频繁提及并广泛使用。然而,由于ACES的复杂性以及ACES色彩管理流程的专业性,人们对其理解尚不够全面细致。相较于影视数字合成线性工作流(Linear Workflow)的不足,ACES色彩管理流程更... 目前,学院颜色编码系统(ACES)已在影视视效制作领域频繁提及并广泛使用。然而,由于ACES的复杂性以及ACES色彩管理流程的专业性,人们对其理解尚不够全面细致。相较于影视数字合成线性工作流(Linear Workflow)的不足,ACES色彩管理流程更具完整性、先进性和前瞻性。本文梳理了同ACES紧密关联的色彩原理和相关概念,总结了ACES的产生原因、优势所在及其在影视数字合成中的具体应用。希望本文有助于视效从业者加深对ACES的全面理解,推进ACES色彩管理流程在剪辑、视效、调色以及虚拟摄制等领域的普及和规范应用。 展开更多
关键词 学院颜色编码系统 ACES色彩管理流程 Nuke数字合成 色域
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烹饪方式对草鱼肉蛋白消化特性及其消化产物降血压活性的影响
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作者 李小锋 张露 +4 位作者 罗晶 王思宇 温庆辉 尹红梅 涂宗财 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期186-195,共10页
为研究不同烹饪方式对草鱼肉蛋白消化特性及其消化产物降血压活性的影响,该文采用汽蒸(steam,SM)、水煮(boil,BO)、油炸(fry,FY)、烘烤(roast,RO)和低温真空烹饪(sous-vide,SV)5种方式对草鱼肉进行处理,比较鱼肉蛋白的消化率,以及消化... 为研究不同烹饪方式对草鱼肉蛋白消化特性及其消化产物降血压活性的影响,该文采用汽蒸(steam,SM)、水煮(boil,BO)、油炸(fry,FY)、烘烤(roast,RO)和低温真空烹饪(sous-vide,SV)5种方式对草鱼肉进行处理,比较鱼肉蛋白的消化率,以及消化产物的氨基酸组成、肽组成、体外抗氧化和血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制能力的差异,并对潜在活性肽进行合成和活性验证。结果表明,除SM样品外,所有样品的蛋白消化率均低于生鱼肉(raw,RW),FY样品的蛋白消化率最低,为44.42%;烹饪均改变了鱼肉消化后的氨基酸组成和多肽组成;消化产物在不同抗氧化活性模型中的活性变化趋势不同,SM、FY、SV处理鱼肉消化产物分别具有最高的羟自由基(·OH)清除、还原力和超氧阴离子(·O_(2)^(-))清除能力,但FY的ACE抑制活性被降低,RO则具有最高的Fe^(2+)螯合率和DPPH自由基清除活性。从消化产物中鉴定出4条新型ACE抑制肽LMF、LMW、LWM和FLW,其半抑制浓度(IC_(50))分别为48.1、2.9、12.5、87.0μg/mL。因而在日常饮食中,除了食品原料需要丰富多样外,烹饪方式的选择应具备多样性,以获得不同活性的肽段。 展开更多
关键词 草鱼 模拟消化 烹饪方式 抗氧化活性 ACE抑制活性
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ACE2对猪流行性腹泻病毒体外感染传代猪小肠上皮细胞的影响
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作者 任莉鑫 张静怡 +3 位作者 徐沙沙 杨柳 张兴翠 宋振辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1238-1248,共11页
为探究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染仔猪过程中发挥的作用,本研究通过转录组学分析仔猪肠道ACE2在PEDV感染前后表达的变化情况,然后利用猪... 为探究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染仔猪过程中发挥的作用,本研究通过转录组学分析仔猪肠道ACE2在PEDV感染前后表达的变化情况,然后利用猪小肠上皮细胞(porcine intestinal epithelial cells, IPEC-J2细胞)模型,通过RT-qPCR、Western blot检测PEDV感染后ACE2的mRNA、蛋白表达水平的变化。过表达与抑制表达ACE2后通过RT-qPCR、Western blot、TCID50检测PEDV复制水平。结果显示,PEDV感染IPEC-J2后ACE2的mRNA及蛋白表达水平均显著下调,与转录组学结果一致。过表达ACE2组PEDV感染量显著上升,抑制表达ACE2组PEDV感染量显著下降。本研究在细胞水平上验证了ACE2在PEDV感染过程中的作用,即PEDV感染能够使ACE2表达量下降,在IPEC-J2细胞中过表达ACE2能提高PEDV复制水平,抑制ACE2的表达可降低PEDV复制水平。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2 ACE2 猪流行性腹泻病毒 猪小肠上皮细胞
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猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA真核表达载体的构建
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作者 张燕迪 顾涛涛 +2 位作者 任红艳 毕延震 方桂杰 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期224-230,共7页
本文旨在研究猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA在猪睾丸支持细胞(ST)中的干扰作用。利用PCR法从ST细胞基因组中扩增猪睾丸ACE启动子,构建重组质粒ACE-pIRES2-DsRed、ACE-pGL3-basic,通过红色荧光蛋白表达和双荧光素酶报告基因检测试验... 本文旨在研究猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA在猪睾丸支持细胞(ST)中的干扰作用。利用PCR法从ST细胞基因组中扩增猪睾丸ACE启动子,构建重组质粒ACE-pIRES2-DsRed、ACE-pGL3-basic,通过红色荧光蛋白表达和双荧光素酶报告基因检测试验检测猪睾丸ACE启动子在ST细胞中的转录活性;根据SPAG6 mRNA靶序列设计合成3条siRNA序列,通过脂质体转染至ST细胞,利用实时荧光定量PCR及Western Blot检测siRNA的干扰效率;基于人miR-30a结构设计SPAG6 shRNA,构建重组载体ACE-sh-SPAG6-pcDNA3.1,Western Blot检测其对SPAG6的干扰效果。结果表明,成功构建重组质粒ACEpIRES2-DsRed、ACE-pGL3-basic,并证明猪睾丸ACE启动子在ST细胞中具有较强的转录活性;各试验组均能对靶基因SPAG6 mRNA的表达产生抑制作用,以siRNA-3的作用最佳。siRNA-3转染48 h后,SPAG6蛋白表达量显著下降(P<0.001),成功筛选出SPAG6基因的最佳干扰序列;成功构建重组质粒ACE-shSPAG6-pcDNA3.1,转染ST细胞48h后SPAG6蛋白表达量较阴性对照组显著下调(P<0.001)。本研究成功构建了猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA真核表达载体,并在ST细胞中验证了其具有较好的干扰效果。 展开更多
关键词 SPAG6 ACE SIRNA SHRNA 基因表达
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红曲糟源酶解蛋白肽的功能性评价
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作者 侯蕊 梁璋成 +3 位作者 林晓婕 林晓姿 张秀红 何志刚 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期354-361,共8页
【目的】研究不同蛋白酶对红曲糟酶解的效果,并对其酶解液进行功能性评价,为红曲糟源蛋白肽的研发制备提供理论支持。【方法】以提高蛋白含量后的红曲糟为原料,利用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白... 【目的】研究不同蛋白酶对红曲糟酶解的效果,并对其酶解液进行功能性评价,为红曲糟源蛋白肽的研发制备提供理论支持。【方法】以提高蛋白含量后的红曲糟为原料,利用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、复配酶制剂F106、酵母抽提酶等不同蛋白酶进行酶解,考察其酶解率、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除抗氧化能力、黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)和血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性等生物活性功能。【结果】蛋白酶解率最高的为动物蛋白酶和胰蛋白酶酶解处理,分别为(71.43±1.03)%和(70.20±0.32)%。DPPH自由基清除抗氧化能力最优的是胃蛋白酶、碱性蛋白酶和酵母抽提酶酶解处理,蛋白肽的半数效应浓度(Median effective concentration,EC50)分别为(2.78±0.34)mg·mL^(-1)、(3.02±0.03)mg·mL^(-1)、(3.24±0.65)mg·mL^(-1);ABTS自由基清除抗氧化能力、XOD抑制活性能力最优的均为胃蛋白酶和碱性蛋白酶酶解液,其蛋白肽的EC50值分别为(1.54±0.07)mg·mL^(-1)、(6.45±0.27)mg·mL^(-1)和(10.71±0.06)mg·mL^(-1)、(17.68±0.04)mg·mL^(-1),二者的XOD半数抑制指数分别为(1.28±0.01)、(1.78±0.03);ACE抑制活性最优的为碱性蛋白酶酶解液和木瓜蛋白酶酶解液,蛋白肽的EC50值均为(0.27±0.01)mg·mL^(-1),半数抑制指数分别为(118.40±3.53)、(98.35±1.95)。【结论】红曲糟源蛋白经不同蛋白酶酶解后的肽段具有不同的生物活性,其中以胃蛋白酶酶解的XOD抑制活性能力较强,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解的ACE抑制活性较优。 展开更多
关键词 红曲酒糟 酶解蛋白肽 酶解率 DPPH自由基清除抗氧化能力 ABTS自由基清除抗氧化能力 XOD抑制活性 ACE抑制活性
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青刺果ACE抑制肽的分离纯化、结构鉴定及其体外活性评价
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作者 张璐 甘雨嫣 +3 位作者 钟玉旺 黎依艳 范江平 王雪峰 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期321-331,共11页
以具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的青刺果蛋白酶解物为研究对象,采用超滤、强阴离子交换层析分离纯化ACE抑制肽,液相色谱-串联质谱鉴定其肽序列。采用傅里叶红外光谱、酶反应抑制剂动力学、MTT试验和分子对接技术解析其二级结构特... 以具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的青刺果蛋白酶解物为研究对象,采用超滤、强阴离子交换层析分离纯化ACE抑制肽,液相色谱-串联质谱鉴定其肽序列。采用傅里叶红外光谱、酶反应抑制剂动力学、MTT试验和分子对接技术解析其二级结构特征、体外活性以及与ACE的结合机制。结果表明,分子质量<3 ku的超滤组分活性较好(IC50=0.380 mg/mL),离子交换层析后以F-a组分活性最好(IC50=0.159 mg/mL)。质谱鉴定出4条肽序列,通过生物信息学分析确定肽PGDVF为潜在的ACE抑制肽[IC50=(0.56±0.1)mmol/L]。二级结构分析表明PGDVF由α-螺旋(20.28%)、β-折叠(6.21%)、β-转角(31.55%)和无规则卷曲(41.85%)构成,其抑制模型为非竞争性抑制,肽质量浓度小于1 mg/mL时,对HepG2细胞无毒性。分子对接显示PGDVF可通过氢键、疏水作用与ACE紧密结合,从而有效抑制ACE活性。研究结果可为青刺果降压肽的开发利用提供参考。 展开更多
关键词 青刺果 ACE抑制肽 液相色谱-串联质谱 二级结构 分子对接
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复合酶解南美白对虾虾头制备ACE抑制肽的工艺优化
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作者 秦莹 马丹妮 +3 位作者 陆节堃 朱虎 余炼 刘小玲 《食品研究与开发》 CAS 2024年第13期120-128,149,共10页
以南美白对虾虾头为原料,利用复合酶解法制备血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽。在传统酶解法基础上,对酶解效率较高的蛋白酶进行筛选和复配,结合双酶复合酶解法水解虾头蛋白。以ACE抑制率和水解度为指标,通... 以南美白对虾虾头为原料,利用复合酶解法制备血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽。在传统酶解法基础上,对酶解效率较高的蛋白酶进行筛选和复配,结合双酶复合酶解法水解虾头蛋白。以ACE抑制率和水解度为指标,通过单因素和响应面试验对制备工艺进行优化,确定复合蛋白酶组合方式及配比等工艺参数。得到虾头蛋白源ACE抑制肽的最佳酶解条件为料液比1∶7(g/mL)、酶添加量400 U/g、初始pH7.5、酶解温度50℃、复合酶(胰蛋白酶∶风味蛋白酶)配比2.29∶1(U/U)、酶解时间2.17 h,在此条件下虾头蛋白水解度达71.48%,ACE抑制率达83.57%,酶解效率与优化前的单酶水解相比提高35.05%。结果表明南美白对虾虾头经胰蛋白酶和风味蛋白酶酶解后具有较高的ACE抑制活性。 展开更多
关键词 虾头 复合酶解 ACE抑制率 水解度 工艺优化
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在小肠上皮细胞中稳定过表达ACE2的AAV血清型确立
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作者 杨卫利 赵莉莉 曹曦 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期524-530,共7页
血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2),是血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)的同源物,可将血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)裂解成血管紧张素1-7(angiotensin1-7,Ang1-7),后者通过G蛋白偶联... 血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2),是血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)的同源物,可将血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)裂解成血管紧张素1-7(angiotensin1-7,Ang1-7),后者通过G蛋白偶联受体Mas发挥作用,作为肾素-血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)的调节轴,与经典级联信号ACE/AngII/AT1(AngII type 1 receptor)相拮抗[1]。ACE2/Ang1-7/Mas信号途径的激活对维持胰岛、肝脏、骨骼肌、脂肪组织的代谢稳定性至关重要[2]。 展开更多
关键词 ACE2 血管紧张素转换酶2 G蛋白偶联受体 代谢稳定性 小肠上皮细胞 脂肪组织 AngⅡ 血清型
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规律运动在防治COVID-19中的研究进展
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作者 何玉敏 刘军 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2024年第2期107-115,共9页
新型冠状病毒病(coronavirus disease-19,COVID-19)是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染引起的以呼吸系统症状为主的疾病。多项研究证明,规律运动对预防COVID-19、增强治疗效果、避免不良预后具有重要作用。本文梳理了运动... 新型冠状病毒病(coronavirus disease-19,COVID-19)是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染引起的以呼吸系统症状为主的疾病。多项研究证明,规律运动对预防COVID-19、增强治疗效果、避免不良预后具有重要作用。本文梳理了运动在COVID-19防治前、中、后的作用及可能机制,运动可通过调节ACE2/Ang(1-7)/Mas轴、增强免疫力和心肺功能、抑制炎症因子和氧化应激、调节肠道菌群稳态以及改善心理状态等途径发挥作用,进而总结出COVID-19防治不同阶段的运动处方,在对运动防治COVID-19全面总结的同时,也为后疫情时代类似呼吸道传染疾病的预防和治疗提供借鉴和参考。 展开更多
关键词 规律运动 COVID-19 ACE2 免疫系统 炎症
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仿刺参不同部位ACE抑制活性分析及活性肽制备工艺优化
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作者 王扬铎 苏永昌 +2 位作者 王晓燕 施文正 刘智禹 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第10期187-197,共11页
本文对仿刺参具有高降血压活性部位进行筛选并优化其活性肽制备工艺。采用酶解法对仿刺参不同部位(体壁、肠、卵)进行水解,以血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率为指标筛选最适蛋白酶,通过对各酶解物ACE抑制率... 本文对仿刺参具有高降血压活性部位进行筛选并优化其活性肽制备工艺。采用酶解法对仿刺参不同部位(体壁、肠、卵)进行水解,以血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率为指标筛选最适蛋白酶,通过对各酶解物ACE抑制率的半数抑制浓度(IC_(50))测定比较筛选出最优抑制活性部位。经单因素实验与响应面试验优化确定活性肽最佳酶解制备条件,对蛋白酶解物进行分子量测定确定其分布范围,经超滤膜分离后对不同组分的ACE抑制活性分析。结果显示,选用碱性蛋白酶为最适水解酶,体壁、肠、卵各蛋白酶解物的ACE抑制率的IC50分别为1.11、4.02、0.65 mg/mL,仿刺参卵具有更好的ACE抑制效果,为最优抑制活性部位。其最佳的酶解制备工艺参数为:酶解时间5 h,加酶量3.5 U/mg,酶解温度65.26℃,底物浓度3.51%,酶解pH9.02,在该条件下仿刺参卵酶解产物的ACE抑制率为80.65%±0.52%,与预测值接近。蛋白酶解产物的分子量集中分布在3000 Da以下,占总含量的98.37%,其中1000~3000 Da占比9.50%,小于1000 Da占比88.87%。超滤膜分离所得低聚肽组分ACE抑制活性(IC_(50)=0.30 mg/mL)显著(P<0.05)强于经工艺优化后酶解物及截留液组分。本研究结果为仿刺参副产物高值化利用提供理论依据,可作为分离纯化制备降血压肽的优质资源。 展开更多
关键词 仿刺参 ACE抑制活性 降压活性肽 响应面 分子量分布 超滤膜分离
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料酒糟源新ACE抑制肽的分离纯化、活性评价与结构解析
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作者 何泽琪 温林凤 +5 位作者 崔鹏举 翁哲希 代晋 彭新安 陈大坤 曹庸 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第10期47-55,共9页
传统料酒以大米为原料发酵生产,料酒糟作为料酒酿造的主要产物,其中含有大量的营养物质。本文以料酒糟作为原料,通过一次醇沉分离,一次制备液相色谱分离和一次分析液相分离后,得到两个高活性ACE抑制肽单体F1和F2。在相同浓度下,单体F1... 传统料酒以大米为原料发酵生产,料酒糟作为料酒酿造的主要产物,其中含有大量的营养物质。本文以料酒糟作为原料,通过一次醇沉分离,一次制备液相色谱分离和一次分析液相分离后,得到两个高活性ACE抑制肽单体F1和F2。在相同浓度下,单体F1、F2的ACE抑制率分别高于市售降压肽产品约17%和14%。后续,利用LTQ Orbitrap Velos Pro质谱仪对两个单体的结构进行解析,结合Uniprot数据库搜索,鉴定出了多肽的序列分别为F1:LIIPQH,F2:IFSGFNNELLS。其中,F1为已报道过的降压肽序列,而F2为本实验首次报道的降压肽序列。研究为酒糟的高值化加工利用提供了理论依据,也为食源性降压肽提供了新证据。 展开更多
关键词 料酒糟 血管紧张素转化酶(ACE) 降血压 ACE抑制肽
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敲除aceE基因对猪链球菌丙酮酸代谢的影响
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作者 毛晨龙 樊擎莹 +5 位作者 左静 薛冰倩 李金朋 李静 张小玲 汪洋 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1416-1424,共9页
【目的】探究缺失编码丙酮酸脱氢酶蛋白的aceE基因对猪链球菌生长特性、三羧酸循环和丙酮酸代谢的影响。【方法】通过测量菌液的OD600值,绘制野生型菌株与aceE基因缺失突变株的生长曲线;利用试剂盒测定三羧酸循环和丙酮酸代谢旁路中乙酰... 【目的】探究缺失编码丙酮酸脱氢酶蛋白的aceE基因对猪链球菌生长特性、三羧酸循环和丙酮酸代谢的影响。【方法】通过测量菌液的OD600值,绘制野生型菌株与aceE基因缺失突变株的生长曲线;利用试剂盒测定三羧酸循环和丙酮酸代谢旁路中乙酰CoA、琥珀酸CoA、延胡索酸、草酰乙酸、丙酮酸、乳酸和ATP的含量,通过荧光定量qRT-PCR确定柠檬酸合酶基因、苹果酸脱氢酶基因、琥珀酸脱氢酶基因、异柠檬酸脱氢酶基因、丙酮酸脱羧酶基因、乳酸脱氢酶基因、乙醇脱氢酶基因和乙醛脱氢酶基因的表达水平。【结果】与野生株相比,菌株ΔaceE在平台期OD600值下降;添加1 g/L乙酸盐能够显著提升菌株ΔaceE平台期OD600值。菌株ΔaceE的丙酮酸含量上升,ATP含量下降;三羧酸循环代谢中乙酰CoA、琥珀酸CoA、延胡索酸含量降低;柠檬酸合酶基因和苹果酸脱氢酶基因表达水平上升,琥珀酸脱氢酶基因和异柠檬酸脱氢酶基因表达水平下调;在丙酮酸代谢旁路中丙酮酸脱羧酶基因、乳酸脱氢酶基因、乙醇脱氢酶基因和乙醛脱氢酶基因表达水平上升。【结论】结果显示,菌株ΔaceE三羧酸循环活性降低,虽然能够通过PDH旁路将部分丙酮酸分解为乙酸盐,进一步转化为乙酰CoA进入三羧酸循环,但ATP含量仍未恢复至野生株水平,这为进一步研究代谢改变与细菌表型的关系提供了理论基础。 展开更多
关键词 acee基因 猪链球菌 丙酮酸代谢 生长特性
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超声辅助酶解法制备小麦ACE抑制肽及其稳定性研究
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作者 张嫚 张国治 +1 位作者 张康逸 何梦影 《轻工学报》 CAS 北大核心 2024年第5期29-39,共11页
以谷朊粉为原料,采用超声辅助酶解法制备小麦血管紧张素转换酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)抑制肽,并以该抑制肽对ACE的抑制率为主要评价指标,以谷朊粉的水解度为次要评价指标,通过单因素试验结合响应面法对制备工艺进行优化,... 以谷朊粉为原料,采用超声辅助酶解法制备小麦血管紧张素转换酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)抑制肽,并以该抑制肽对ACE的抑制率为主要评价指标,以谷朊粉的水解度为次要评价指标,通过单因素试验结合响应面法对制备工艺进行优化,并研究该抑制肽的稳定性。结果表明:碱性蛋白酶是适宜酶解谷朊粉制备小麦ACE抑制肽的蛋白酶。最佳超声辅助酶解法制备小麦ACE抑制肽的条件为超声时间17 min、超声功率300 W、酶解温度60℃、酶解时间2.7 h、酶用量3600 U/g和谷朊粉质量分数5.1%,在此条件下,所制备的小麦ACE抑制肽对ACE的抑制率为72.90%,疏水性氨基酸含量为29.37 g/100 g。当该抑制肽的相对分子质量<3 kDa时,具有较好的强酸环境稳定性和热稳定性,在一定浓度K^(+)、Mg^(2+)环境中的稳定性也较好,且经体外模拟消化后仍能保持原活性的79.26%。因此,超声辅助酶解法是制备小麦ACE抑制肽的有效方法。 展开更多
关键词 超声辅助酶解法 小麦ACE抑制肽 谷朊粉 稳定性
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三种超声分类系统评估桥本甲状腺炎合并甲状腺结节良恶性效能研究 被引量:1
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作者 高净 邱爽 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第2期207-211,216,共6页
目的:研究三种超声分类系统对桥本甲状腺炎(HT)合并甲状腺结节良恶性的诊断效能。方法:回顾性选取行甲状腺超声检查且获得手术病理结果的92例(共126个结节)HT合并甲状腺结节患者,根据结节手术病理结果分为良性组(50例,67个结节)和恶性组... 目的:研究三种超声分类系统对桥本甲状腺炎(HT)合并甲状腺结节良恶性的诊断效能。方法:回顾性选取行甲状腺超声检查且获得手术病理结果的92例(共126个结节)HT合并甲状腺结节患者,根据结节手术病理结果分为良性组(50例,67个结节)和恶性组(42例,59个结节)。分别采用美国甲状腺协会(ATA)指南、美国临床内分泌医师学会/美国内分泌学会/意大利临床内分泌协会(AACE/ACE/AME)指南,美国放射学会《甲状腺影像报告与数据系统(TI-RADS)》(ACR TI-RADS)分类系统评估HT合并甲状腺结节的良恶性,分析三种不同超声分类系统评估甲状腺结节的恶性率。受试者工作特征(ROC)曲线分析三种不同超声分类系统对HT合并甲状腺恶性结节的诊断效能。结果:126个结节均经手术病理证实,良性67个,恶性59个。良性组结节的成分、回声、局灶强回声、边缘、形态等超声特征与恶性组结节比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。ACR TI-RADS分类TR4类和TR5类、AACE/ACE/AME指南高风险、ATA指南高度可疑结节恶性率明显增高(均P<0.05)。ACR TI-RADS分类、AACE/ACE/AME指南、ATA指南诊断结节良恶性的最佳截断点分别为TR4类、高等风险病变和高度可疑恶性,其对应诊断AUC值分别为0.896、0.879、0.876;灵敏度分别为93.2%、84.7%、86.4%;特异度分别为78.0%、88.1%、89.8%;准确度分别为80.2%、81.8%、82.5%。结论:三种不同超声分类系统评估HT合并甲状腺结节良恶性均具有较高的诊断效能,其中ACR TI-RADS分类系统诊断的AUC值及灵敏度高于AACE/ACE/AME指南和ATA指南,值得在临床推广应用。 展开更多
关键词 桥本甲状腺炎 甲状腺结节 超声分类系统 ACR TI-RADS分类 AACE/ACE/AME指南 ATA指南
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抗奥合剂通过p38 MAPK/NF-κB信号通路和ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解急性肺损伤研究
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作者 陈思琪 严佳煜 +1 位作者 李瑞 顾宁 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期446-456,共11页
目的探讨抗奥合剂(KAHJ)治疗小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制,为其可能作为缓解新型冠状病毒(COVID-19)感染后症状的药物提供依据。方法采用网络药理学方法预测KAHJ治疗ALI的主要活性成分、潜在靶点和相关信号通路。将C57BL/6J小鼠随... 目的探讨抗奥合剂(KAHJ)治疗小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制,为其可能作为缓解新型冠状病毒(COVID-19)感染后症状的药物提供依据。方法采用网络药理学方法预测KAHJ治疗ALI的主要活性成分、潜在靶点和相关信号通路。将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+KAHJ组。LPS+KAHJ组小鼠灌胃KAHJ(4.76 g·kg^(-1)·d^(-1),8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1)),其余组小鼠灌胃生理盐水(8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1))。14 d后,腹腔注射LPS(5 mg·kg^(-1))诱导ALI模型。收集小鼠血清和肺组织,通过组织病理学观察肺组织的病理变化。采用Western blot、qPCR、ELISA和IHC等方法评估KAHJ对ALI的改善作用。结果通过网络药理学筛选出疾病和药物共同的70个核心靶基因,并显示与多个信号通路密切相关,如MAPK、NF-κB、Apoptosis、COVID-19和肾素-血管紧张素系统(Ras)信号通路等。此外,通过实验验证发现KAHJ能改善小鼠ALI后的炎症和细胞凋亡,减少肺损伤和肺水肿,抑制肺纤维化。同时,KAHJ的作用机制与p38 MAPK和NF-κB的磷酸化以及ACE2/Ang1-7/Mas轴的调控也有着密切关系。结论KAHJ可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路和调控ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解ALI,为缓解COVID-19感染后症状提供了补充和替代药物。 展开更多
关键词 急性肺损伤 p38 MAPK/NF-κB信号通路 ACE2/Ang1-7/Mas轴 新型冠状病毒
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