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Development of an Integrated Disposable Device for SARSCoV-2 Nucleic Acid Extraction and Detection
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作者 Jing Ma Yanzhe Hao +11 位作者 Meiling Hou Xiaoshan Zhang Jingduan Liu Haodi Meng Jiangbo Chang Xuejun Ma Jihua Liu Qingjie Ying Xianhua Wang Hongxia Li Yuxi Cao Xiaoguang Zhang 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期639-646,共8页
Objective To develop a highly sensitive and rapid nucleic acid detection method for the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2).Methods We designed,developed,and manufactured an integrated disposab... Objective To develop a highly sensitive and rapid nucleic acid detection method for the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2).Methods We designed,developed,and manufactured an integrated disposable device for SARS-CoV-2 nucleic acid extraction and detection.The precision of the liquid transfer and temperature control was tested.A comparison between our device and a commercial kit for SARS-Cov-2 nucleic acid extraction was performed using real-time fluorescence reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR).The entire process,from SARS-CoV-2 nucleic acid extraction to amplification,was evaluated.Results The precision of the syringe transfer volume was 19.2±1.9μL(set value was 20),32.2±1.6(set value was 30),and 57.2±3.5(set value was 60).Temperature control in the amplification tube was measured at 60.0±0.0℃(set value was 60)and 95.1±0.2℃(set value was 95)respectively.SARS-Cov-2 nucleic acid extraction yield through the device was 7.10×10^(6) copies/mL,while a commercial kit yielded 2.98×10^(6) copies/mL.The mean time to complete the entire assay,from SARS-CoV-2 nucleic acid extraction to amplification detection,was 36 min and 45 s.The detection limit for SARS-CoV-2 nucleic acid was 250 copies/mL.Conclusion The integrated disposable devices may be used for SARS-CoV-2 Point-of-Care test(POCT). 展开更多
关键词 An integrated disposable device SARS-Cov-2 Nucleic acid detection
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Study on the correlation between abdominal infection and psychological stress in children based on nucleic acid detection
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作者 Gui-Bo Wang Xue-Feng Zhang +2 位作者 Bing Liang Jie Lei Jun Xue 《World Journal of Psychiatry》 SCIE 2024年第11期1728-1734,共7页
BACKGROUND Diagnosing and treating abdominal infection in children remains a challenge.Nucleic acid detection,as a rapid and accurate diagnosis tool,has great significance in this field.AIM To investigate the diagnosi... BACKGROUND Diagnosing and treating abdominal infection in children remains a challenge.Nucleic acid detection,as a rapid and accurate diagnosis tool,has great significance in this field.AIM To investigate the diagnosis and treatment of abdominal infection by nucleic acid detection and its possible correlation with psychological stress in children.METHODS A total of 50 pediatric patients diagnosed with abdominal infections between September 2020 and July 2021 were included in this study.Intra-abdominal pus samples were collected for pathogen culture,drug susceptibility testing,and broad-spectrum bacterial nucleic acid testing.Psychological stress,anxiety,depression,and coping styles were assessed using the coping with a disease(CODI)scale.RESULTS Based on susceptibility testing,a regimen of cefazoxime,piperacillin/tazobactam,and metronidazole or ornidazole achieved 100%effectiveness in treating appendicitis.Psychological assessments revealed a positive correlation between pressure level and both anxiety(r=0.324,P=0.001)and depressive disorders(r=0.325,P<0.001).Acceptance and distancing as coping strategies were negatively correlated with anxiety and depression,while negative emotional responses were strongly associated with increased anxiety(r=0.574,P<0.001)and depression(r=0.511,P=0.001).Coping strategies such as illusion and escape showed no significant correlation with emotional outcomes.CONCLUSION Nucleic acid testing helps in the diagnosis of abdominal infections in children,and also focuses on children's mental health. 展开更多
关键词 Broad-spectrum bacterial nucleic acid detection CHILDREN Abdominal infection Diagnosis and treatment Psychological stress
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Development of an Integrated CMUTs-Based Resonant Biosensor for Label-Free Detection of DNA with Improved Selectivity by Ethylene-Glycol Alkanethiols
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作者 Zhikang Li Yihe Zhao +7 位作者 Gian Luca Barbruni Jie Li Zixuan Li Jiawei Yuan Ping Yang Libo Zhao Zhuangde Jiang Sandro Carrara 《Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第10期231-241,共11页
Gravimetric resonant-inspired biosensors have attracted increasing attention in industrial and point-ofcare applications,enabling label-free detection of biomarkers such as DNA and antibodies.Capacitive micromachined ... Gravimetric resonant-inspired biosensors have attracted increasing attention in industrial and point-ofcare applications,enabling label-free detection of biomarkers such as DNA and antibodies.Capacitive micromachined ultrasonic transducers(CMUTs)are promising tools for developing miniaturized highperformance biosensing complementary metal–oxide–silicon(CMOS)platforms.However,their operability is limited by inefficient functionalization,aggregation,crosstalk in the buffer,and the requirement for an external high-voltage(HV)power supply.In this study,we aimed to propose a CMUTs-based resonant biosensor integrated with a CMOS front–end interface coupled with ethylene–glycol alkanethiols to detect single-stranded DNA oligonucleotides with large specificity.The topography of the functionalized surface was characterized by energy-dispersive X-ray microanalysis.Improved selectivity for onchip hybridization was demonstrated by comparing complementary and non-complementary singlestranded DNA oligonucleotides using fluorescence imaging technology.The sensor array was further characterized using a five-element lumped equivalent model.The 4 mm^(2) application-specific integrated circuit chip was designed and developed through 0.18 lm HV bipolar-CMOS-double diffused metal–oxide–silicon(DMOS)technology(BCD)to generate on-chip 20 V HV boosting and to track feedback frequency under a standard 1.8 V supply,with a total power consumption of 3.8 mW in a continuous mode.The measured results indicated a detection sensitivity of 7.943×10^(-3) lmol·L^(-1)·Hz^(-1) over a concentration range of 1 to 100 lmol·L^(-1).In conclusion,the label-free biosensing of DNA under dry conditions was successfully demonstrated using a microfabricated CMUT array with a 2 MHz frequency on CMOS electronics with an internal HV supplier.Moreover,ethylene–glycol alkanethiols successfully deposited self-assembled monolayers on aluminum electrodes,which has never been attempted thus far on CMUTs,to enhance the selectivity of bio-functionalization.The findings of this study indicate the possibility of full-on-chip DNA biosensing with CMUTs. 展开更多
关键词 Capacitive micromachined ultrasonic transducers(CMUTs) dna detection Self-assembled monolayer(SAM) Ethylene-glycol alkanethiols Application-specific integrated circuit(ASIC)
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不同核酸提取方法对HBV-DNA检测性能验证情况分析 被引量:1
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作者 周文娟 林真 徐建萍 《现代医药卫生》 2024年第4期575-580,共6页
目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、... 目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、正确度、线性范围、检出限及抗干扰能力等性能进行验证和评价。结果达安全自动核酸提取仪提取达安试剂检测、手工提取达安试剂检测和手工提取圣湘试剂检测在精密度、正确度、线性范围、检出限方面验证结果均达标;达安全自动核酸提取仪提取圣湘试剂检测在低值检测中变异系数大于5%,最低检测限验证不合格;抗干扰能力方面,全自动核酸提取仪提取的2.0 g/dL血红蛋白浓度的样本用达安和圣湘试剂检测结果均不受影响。手工提取甘油三酯浓度达3000 mg/dL的样本用达安和圣湘试剂检测的结果均不受影响。结论不同厂家的提取和检测试剂避免混用,达安和圣湘试剂对HBV-DNA定量检测的结果均符合要求。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒-dna定量检测 全自动核酸提取仪法 手工提取法 性能验证
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血清CYFRA21-1、CA125联合HPV DNA检测在宫颈癌早期筛查中的价值及病理特征研究
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作者 李彦英 黄平 +3 位作者 张玲 苏梦亚 李玲玲 张纪妍 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第4期700-703,708,共5页
目的分析血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原125(CA125)联合HPV DNA检测在宫颈癌早期筛查中的价值及病理特征。方法选取2019年8月至2023年6月沧州市中心医院收治的宫颈癌患者152例为观察组,另选取同期在本院行体检且各项正常女... 目的分析血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原125(CA125)联合HPV DNA检测在宫颈癌早期筛查中的价值及病理特征。方法选取2019年8月至2023年6月沧州市中心医院收治的宫颈癌患者152例为观察组,另选取同期在本院行体检且各项正常女性80名为对照组;对比两组血清CYFRA21-1、CA125水平以及HPV DNA检测结果;对比观察组不同手术病理结果及血清CYFRA21-1、CA125表达水平以及HPV DNA检测结果;以病理学检查为金标准,分析血清CYFRA21-1、CA125水平以及HPV DNA检测单独以及联合诊断宫颈癌的一致性;绘制ROC曲线,分析血清CYFRA21-1、CA125联合HPV DNA单独检测及联合检测宫颈癌的效能。结果152例患者中,鳞状细胞癌104例,腺癌患者48例;其中轻度不典型增生66例、中度不典型增生57例、重度不典型增生29例。观察组血清CYFRA21-1、CA125水平以及HPV DNA阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清CYFRA21-1、CA125水平:鳞状细胞癌<腺癌,轻度不典型增生<中度不典型增生<重度不典型增生,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组不同分期、不同肿瘤增生类型的HPV DNA阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);血清CYFRA21-1、CA125水平、HPV DNA检测单独以及联合诊断宫颈癌与病理学检查结果的一致性Kappa值分别为0.677、0.731、0.756、0.902;CA125+CYFRA21-1+HPV DNA联合检测的AUC为0.894,高于CA125、CYFRA21-1、HPV DNA单独检测(P>0.05)。结论血清CYFRA21-1、CA125联合HPV DNA检测的诊断效能高于单一检测,提示三指标联合检测可显著提高宫颈癌早期筛查的诊断价值,可为制定临床治疗方案提供参考资料。 展开更多
关键词 CYFRA21-1 CA125 HPV dna检测 宫颈癌
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氧化石墨烯-DNA纳米探针用于三磷酸腺苷的检测与药物递送
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作者 张越 梁蕊 +1 位作者 赵灿男 李春梅 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期118-127,共10页
癌细胞内三磷酸腺苷(ATP)浓度异常与肿瘤发生发展过程密切相关,因此,快速、准确地检测细胞内外ATP水平具有重要意义。盐酸阿霉素(DOX)是一种广泛使用的抗癌药物,能嵌入DNA碱基对,并通过抑制DNA复制和转录诱导细胞凋亡。氧化石墨烯(Graph... 癌细胞内三磷酸腺苷(ATP)浓度异常与肿瘤发生发展过程密切相关,因此,快速、准确地检测细胞内外ATP水平具有重要意义。盐酸阿霉素(DOX)是一种广泛使用的抗癌药物,能嵌入DNA碱基对,并通过抑制DNA复制和转录诱导细胞凋亡。氧化石墨烯(Graphene oxide, GO)由于具有毒性低、比表面积大和易功能化,可以有效、稳定地负载DNA纳米探针进入细胞等优点而被广泛应用。然而,复杂环境中的生物分子容易通过物理吸附竞争性结合到GO表面,导致假阳性信号。基于此,提出了一种新型的GO-DNA纳米探针,并将其应用于ATP的检测与抗癌药物DOX靶向递送。以ATP的核酸适配体与其互补链杂交形成双链DNA(dsDNA),并通过G-C碱基对负载DOX,利用互补链延伸的poly A序列吸附到GO表面构建了GO-dsDNA-DOX纳米探针,能极大程度地降低复杂环境中物理吸附引起的干扰,减少假阳性信号产生。ATP与适配体特异性结合会导致DOX释放,根据其荧光“off-on”实现ATP的定量分析,DOX荧光强度与ATP含量在0.08~8.0 mmol/L范围内呈现良好的线性关系,线性方程为IF=3.0897c+129.08,检测限(3σ/k)为0.059 mmol/L,且方法具有良好的选择性和抗干扰能力。细胞毒性及荧光成像结果表明,负载DOX的纳米探针在人乳腺癌细胞(MCF-7)内有明显的药物释放,显著诱导细胞凋亡。该研究建立了一种免修饰、简单和快速的ATP含量检测分析方法,并利用癌细胞内高浓度ATP实现靶向药物递送,降低了对正常细胞的毒副作用,为癌症的治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 dna纳米探针 氧化石墨烯 荧光检测 盐酸阿霉素 药物递送
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A brief review of novel nucleic acid test biosensors and their application prospects for salmonids viral diseases detection 被引量:1
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作者 Xiaofei Liu Songyin Qiu +5 位作者 Haiping Fang Lin Mei Hongli Jing Chunyan Feng Shaoqiang Wu Xiangmei Lin 《Journal of Semiconductors》 EI CAS CSCD 2023年第2期49-56,共8页
Viral diseases represent one of the major threats for salmonids aquaculture.Early detection and identification of viral pathogens is the main prerequisite prior to undertaking effective prevention and control measures... Viral diseases represent one of the major threats for salmonids aquaculture.Early detection and identification of viral pathogens is the main prerequisite prior to undertaking effective prevention and control measures.Rapid,sensitive,efficient and portable detection method is highly essential for fish viral diseases detection.Biosensor strategies are highly prevalent and fulfill the expanding demands of on-site detection with fast response,cost-effectiveness,high sensitivity,and selectivity.With the development of material science,the nucleic acid biosensors fabricated by semiconductor have shown great potential in rapid and early detection or screening for diseases at salmonids fisheries.This paper reviews the current detection development of salmonids viral diseases.The present limitations and challenges of salmonids virus diseases surveillance and early detection are presented.Novel nucleic acid semiconductor biosensors are briefly reviewed.The perspective and potential application of biosensors in the on-site detection of salmonids diseases are discussed. 展开更多
关键词 salmonids virus detection nucleic acid test biosensors SEMICONDUCTOR
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Ultrathin metal-organic framework nanosheets (Cu-TCPP)-based isothermal nucleic acid amplification for food allergen detection 被引量:1
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作者 Jiale Gao Xiaodong Sun +3 位作者 Yongxin Liu Bing Niu Qin Chen Xueen Fang 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CSCD 2023年第5期1788-1798,共11页
The rapid and accurate detection of peanuts and soybeans allergen is important to the food safety. In this study, Cu-TCPP nanosheet, a kind of ultra-thin metal-organic framework(MOF)was synthesized and applied in loop... The rapid and accurate detection of peanuts and soybeans allergen is important to the food safety. In this study, Cu-TCPP nanosheet, a kind of ultra-thin metal-organic framework(MOF)was synthesized and applied in loop-mediated isothermal amplification(named Cu-TCPP@LAMP), which can inhibit the non-specific amplification by absorbing and precise temperature releasing of single primer. As thus, Cu-TCPP@LAMP can achieve high sensitivity and specific amplification of the target gene. As a result, peanut and soybean allergens genes contained in food were successfully detected with a favorable detection sensitivity(5 ng/μL for peanuts and 10 ng/μL for soybeans)and reliable repeatability(The coefficient of variation was 3.38% for peanuts and 3.33% for soybeans). Moreover, the established method was utilized for detection of several commercial products, and had a high consistency with the standard method. Apart from food allergens, this novel assay can be widely used in other areas, such as pathogen detection, tumor nucleic acid detection and so on. 展开更多
关键词 Cu-TCPP nanosheet Plant allergen Nucleic acid detection Loop-mediated isothermal amplification
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基于DNA步行器的传感器技术在食品安全检测中的研究进展 被引量:1
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作者 宋思青 司晓夏 +3 位作者 胡聚峰 杜子沫 陈历俊 刘继超 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第12期395-404,共10页
随着DNA纳米技术的快速发展,各种结构和功能的DNA分子被用于构建具有动态行为的可编程纳米机器。其中,DNA步行器因其能够借助驱动力在预定轨道上自主、逐步移动以产生级联信号放大的优势,成为了生物传感、生物成像以及药物递送等领域日... 随着DNA纳米技术的快速发展,各种结构和功能的DNA分子被用于构建具有动态行为的可编程纳米机器。其中,DNA步行器因其能够借助驱动力在预定轨道上自主、逐步移动以产生级联信号放大的优势,成为了生物传感、生物成像以及药物递送等领域日益增长的研究热点,在食品污染物快速超灵敏检测方面展现出巨大的应用潜力。本综述首先简要介绍了DNA步行器的基本原理,并着重阐述了提升DNA步行器行走效率的策略,然后总结了其在食品安全检测中的应用,最后对DNA步行器未来研究方向进行了展望,为推动其实际应用提供了理论指导。 展开更多
关键词 食品安全 dna 步行器 信号放大 核酸适配体 生物传感器
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循环肿瘤DNA的检测技术及在癌症诊疗中的应用价值
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作者 张洁洁 牛春艳 +3 位作者 董莲华 杨怡 李会杰 杨靖亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第2期345-354,共10页
循环肿瘤DNA(ctDNA)来源于肿瘤,能很好地反映肿瘤的基因信息,并且会随着肿瘤的进展发生相应的改变。近年来,ctDNA独特的能力备受人们关注并被广泛研究,本文在总结ctDNA的来源、性质和样品处理的基础上,对ctDNA的检测技术及在癌症诊疗中... 循环肿瘤DNA(ctDNA)来源于肿瘤,能很好地反映肿瘤的基因信息,并且会随着肿瘤的进展发生相应的改变。近年来,ctDNA独特的能力备受人们关注并被广泛研究,本文在总结ctDNA的来源、性质和样品处理的基础上,对ctDNA的检测技术及在癌症诊疗中的应用进行综述,阐述了ctDNA标准物质在二代测序中的作用及重要性,并指出ctDNA样品的收集、存储、定量检测以及数据分析等各个流程中建立统一标准及规范的迫切性。 展开更多
关键词 循环肿瘤dna 液体活检 检测技术 应用 生物标志物
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基于多靶点粪便FIT-DNA联合检测技术的结直肠癌早筛应用研究
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作者 王杰 侯明星 +4 位作者 程海东 刘永强 苗杰 李淑雯 陈璐 《肿瘤防治研究》 CAS 2024年第7期578-582,共5页
目的评价多靶点粪便FIT-DNA联合检测技术在结直肠癌早期筛查中的效果并进一步分析其应用前景。方法选取内蒙古医科大学附属医院就诊人群,每位受试者分别行血清肿瘤标志物检测、多靶点粪便FIT-DNA联合检测、肠镜检查,以接受多靶点粪便FIT... 目的评价多靶点粪便FIT-DNA联合检测技术在结直肠癌早期筛查中的效果并进一步分析其应用前景。方法选取内蒙古医科大学附属医院就诊人群,每位受试者分别行血清肿瘤标志物检测、多靶点粪便FIT-DNA联合检测、肠镜检查,以接受多靶点粪便FIT-DNA联合检测人群为实验组,以接受肠镜检查及血清肿瘤标志物检测人群为对照组,以病理结果为金标准,评价新型粪便分子检测技术对于结直肠癌筛查的效果,对筛出的阳性人群给予及时干预。结果共分析了115例患者。血清肿瘤标志物检测敏感度63.2%(43/68),特异度74.5%(35/47);肠镜检查敏感度97.1%(66/68),特异度80.7%(38/47);而多靶点粪便FIT-DNA联合检测敏感度89.7%(61/68),特异度87.2%(41/47)。多靶点粪便FIT-DNA联合检测敏感度、特异度等均优于血清肿瘤标志物检测,敏感度虽低于肠镜检查,但相较肠镜检查操作简单,可居家自测。 展开更多
关键词 多靶点粪便FIT-dna联合检测 血清肿瘤标志物 结直肠癌 早筛 肠镜检查
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雅鲁藏布江中游拉萨裸裂尻鱼环境DNA检测及生物量评估
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作者 李冰 冯秀 +3 位作者 朱仁 隋晓云 贾银涛 陈毅峰 《水生态学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期84-91,共8页
建立快速和准确的环境DNA(eDNA)检测方法,可为鱼类的长期监测提供便利,为鱼类资源保护和管理提供技术支撑。2019年在雅鲁藏布江中游干流及拉鲁湿地和茶巴朗湿地采集了20种鱼和水样,针对拉萨裸裂尻鱼(Schizopygopsis younghusbandi young... 建立快速和准确的环境DNA(eDNA)检测方法,可为鱼类的长期监测提供便利,为鱼类资源保护和管理提供技术支撑。2019年在雅鲁藏布江中游干流及拉鲁湿地和茶巴朗湿地采集了20种鱼和水样,针对拉萨裸裂尻鱼(Schizopygopsis younghusbandi younghusbandi)设计Cytb基因的特异性引物和探针,利用微滴式数字PCR(ddPCR)检测水样中e DNA拷贝数,并分析其与生物量和丰度之间的相关性。结果显示,正反向引物及探针序列与其他19种鱼之间的平均错配碱基数分别为6.8、6.9和3.6,且对其基因组DNA进行ddPCR扩增没有荧光信号。通过对比ddPCR和网捕2种方法,70%样点中检测结果相同,剩余30%样点都是网捕未捕获但ddPCR检出的情况。在拉鲁湿地和雅鲁藏布江干流的样点中,水样eDNA拷贝数与拉萨裸裂尻鱼生物量和丰度之间均具有显著的相关性,拉鲁湿地水样e DNA与二者的相关系数分别为0.987和0.647,雅鲁藏布江水样eDNA与二者的相关系数分别为0.786和0.756,表明eDNA技术是鱼类分布和生物量监测的有效方法。eDNA检测易受到近缘物种和水体理化性质的影响。 展开更多
关键词 环境dna 微滴式数字PCR 拉萨裸裂尻鱼 物种检测 雅鲁藏布江中游
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DNA存储系统中的数据写入
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作者 张宣梁 李青婷 王飞 《合成生物学》 CSCD 北大核心 2024年第5期1125-1141,共17页
世界的数字化给人们的生活带来了极大的变化,但与此同时,史无前例的数据激增使得信息存储面临的挑战日益严峻。随着全球数据总量的指数级增长,传统存储介质将无法满足数字化带来的存储需求。使用DNA分子作为基本载体的信息存储展现出高... 世界的数字化给人们的生活带来了极大的变化,但与此同时,史无前例的数据激增使得信息存储面临的挑战日益严峻。随着全球数据总量的指数级增长,传统存储介质将无法满足数字化带来的存储需求。使用DNA分子作为基本载体的信息存储展现出高存储密度、低维护成本和易于化学修饰等独特优势。DNA存储主要包括编码、写入、保存、检索、读取和解码六个主要步骤,其中数据的写入是实现DNA存储功能的基础。本文首先介绍DNA存储系统中体外写入数据的策略方法,主要分为将数据写入DNA序列和写入DNA结构两个部分,接着概述体内写入数据技术的发展,最后将讨论DNA存储系统中数据写入面临的写入成本高、写入速度慢等挑战,并对大规模合成高纯度DNA、改进生物酶等具有前景的应用技术进行展望。 展开更多
关键词 dna存储 dna合成 核酸序列 dna纳米技术 框架核酸材料
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3种褐黄血蜱基因组DNA提取方法的比较
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作者 焦雪丽 张鑫 +1 位作者 杨惠 苏婧 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2024年第4期354-358,共5页
目的在保持褐黄血蜱Haemaphysalis flava寄生蜱虫体形态完整的前提下,综合比较95℃水浴法、改良碱裂解法、离心柱法3种提取方法对蜱组织DNA提取质量的差异,筛选适用于蜱鉴定分型的高效稳定基因组DNA提取方法。方法取蜱标本的一只足作为... 目的在保持褐黄血蜱Haemaphysalis flava寄生蜱虫体形态完整的前提下,综合比较95℃水浴法、改良碱裂解法、离心柱法3种提取方法对蜱组织DNA提取质量的差异,筛选适用于蜱鉴定分型的高效稳定基因组DNA提取方法。方法取蜱标本的一只足作为实验样本,通过95℃水浴法、改良碱裂解法和离心柱法分别提取样品中基因组DNA,检测提取物浓度以及A260/A280和A260/A230比值,并通过PCR技术检测蜱分型相关基因16S rDNA(16S ribosoma DNA,16S核糖DNA)、ITS2(internal transcribed spacer 2,内转录间隔区2)的片段扩增效率,综合分析3种提取方法的优劣。多组之间使用单因素方差分析(ANOVA检验),两组之间比较采用t检验分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果3种提取方法均可获得足量的蜱基因组DNA,改良碱裂解法提取效率显著高于其他2种方法(P<0.05),A260/A280和A260/A230比值结果表明离心柱提取法获得的DNA纯度更高,进一步的PCR实验表明,在模板量一致的情况下,以离心柱法提取的DNA为模板扩增产生的16S rDNA、ITS2片段扩增效率更高,而以95℃水浴法提取的DNA为模板扩增产生的16S rDNA、ITS2片段效率较低。结论离心柱法是提取蜱基因组DNA高效且实用的方法,能够在保持虫体形态完整的情况下满足对寄生蜱进行后续基因分型实验的要求。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 寄生蜱 基因组dna 核酸提取 PCR
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DNA损伤效应主动监测的抗氧化基因缺失微生物传感器的构建及性能评价
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作者 俞悦 李安一 +5 位作者 王文甲 姜浩 邓玉林 李晓琼 吕雪飞 戴荣继 《航天医学与医学工程》 CAS 2024年第2期73-77,共5页
目的活性氧基团(ROS)水平升高会引起生物体的DNA氧化损伤,监测DNA的氧化损伤程度,能够实现ROS损伤效应的有效评价。基于微生物传感器监测DNA损伤效应可以定量评价氧化损伤程度,但微生物本身具有的ROS清除机制,会影响监测灵敏度。本研究... 目的活性氧基团(ROS)水平升高会引起生物体的DNA氧化损伤,监测DNA的氧化损伤程度,能够实现ROS损伤效应的有效评价。基于微生物传感器监测DNA损伤效应可以定量评价氧化损伤程度,但微生物本身具有的ROS清除机制,会影响监测灵敏度。本研究旨在敲除细菌ROS清除机制的关键基因,构建抗氧化基因缺失微生物传感器,实现对DNA损伤效应的灵敏监测,评价ROS对生物体的损伤效应。方法本研究基于λ-Red同源重组的方法敲除细菌抗氧化损伤相关基因ahpCF、katE与katG,构建抗氧化基因缺失微生物传感器,并评价传感器对萘啶酮酸钠和紫外照射的响应。结果成功构建ΔahpCF、ΔahpCF/ΔkatE与ΔahpCF/ΔkatE/ΔkatG三种抗氧化基因缺失的微生物传感器,工程菌ΔahpCF/ΔkatE/ΔkatG对DNA损伤试剂萘啶酮酸钠的响应灵敏度最高,检测限为0.40μmol/L,另外,1.80 min的紫外照射(254 nm)可诱导工程菌产生显著的荧光表达效应。结论本研究构建了抗氧化基因缺失微生物传感器,实现了对DNA损伤试剂和紫外照射等DNA损伤效应的主动灵敏监测,可为未来空间辐射效应的评价提供一种主动、有效、灵敏的潜在监测方法。 展开更多
关键词 dna损伤效应 基因敲除 微生物传感器 空间辐射 萘啶酮酸钠 紫外照射
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Recent advances in living cell nucleic acid probes based on nanomaterials for early cancer diagnosis
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作者 Xuyao Liu Qi Shi +7 位作者 Peng Qi Ziming Wang Tongyue Zhang Sijia Zhang Jiayan Wu Zhaopei Guo Jie Chen Qiang Zhang 《Asian Journal of Pharmaceutical Sciences》 SCIE CAS 2024年第3期22-40,共19页
The early diagnosis of cancer is vital for effective treatment and improved prognosis. Tumor biomarkers, which can be used for the early diagnosis, treatment, and prognostic evaluation of cancer, have emerged as a top... The early diagnosis of cancer is vital for effective treatment and improved prognosis. Tumor biomarkers, which can be used for the early diagnosis, treatment, and prognostic evaluation of cancer, have emerged as a topic of intense research interest in recent years. Nucleic acid, as a type of tumor biomarker, contains vital genetic information, which is of great significance for the occurrence and development of cancer. Currently, living cell nucleic acid probes, which enable the in situ imaging and dynamic monitoring of nucleic acids, have become a rapidly developing field. This review focuses on living cell nucleic acid probes that can be used for the early diagnosis of tumors. We describe the fundamental design of the probe in terms of three units and focus on the roles of different nanomaterials in probe delivery. 展开更多
关键词 Nucleic acid NANOMATERIALS In situ detection Living cell Early cancer diagnosis
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适用于RPA-LFD技术检测对虾肝胰腺DNA样品的快速制备试剂研究
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作者 姚梦丽 白昌明 +1 位作者 王崇明 辛鲁生 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第4期166-174,共9页
为摆脱常规核酸样品提取步骤繁琐、耗时等问题,实现真正的现场快速检测,本研究致力于研制和优化一种对虾肝胰腺中DNA样品的核酸快速制备试剂,即核酸释放剂,适用于重组酶聚合酶扩增技术(recombinasepolymeraseamplication,RPA)与侧向流... 为摆脱常规核酸样品提取步骤繁琐、耗时等问题,实现真正的现场快速检测,本研究致力于研制和优化一种对虾肝胰腺中DNA样品的核酸快速制备试剂,即核酸释放剂,适用于重组酶聚合酶扩增技术(recombinasepolymeraseamplication,RPA)与侧向流层析试纸条技术(lateralflow dipstick, LFD)结合的RPA-LFD技术检测。实验优选20~100 mmol/L Tris-HCl、50~250 mmol/L KCl、0.01%~0.10%十二烷基硫酸锂(LDS)、0.5%~2.0%聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)、1~5mmol/L乙二胺四乙酸二钠(EGTA2Na)、0.5~5.0 mmol/L牛血清白蛋白(BSA)、1~5 mg/mL明胶、0.01%~0.10%海藻糖、1%~5%甜菜碱等配制成核酸释放剂。以对虾肝肠孢虫(Enterocytozoonhepatopenaei,EHP)阳性样本和阴性样本对核酸释放剂各组分间配比进行优化,采集绿豆大小的对虾肝胰腺组织加入100μL核酸释放剂,100℃加热3 min,取上清液进行RPA-LFD反应,测试各组分不同浓度配比;并以对虾急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)阳性样品及阴性样品作为检测模板对优化后核酸释放剂再次验证。结果显示,核酸释放剂的各组分最佳配比为100 mmol/L Tris-HCl、100 mmol/L KCl、0.02%LDS、0.5%Triton X-100、1 mmol/L EGTA2Na、0.05%海藻糖、1 mg/mL明胶、0.5 mmol/L BSA、2%甜菜碱。RPA-LFD方法检测可显著区分阳性和阴性样品。本研究优化的核酸释放剂,适用于RPA-LFD检测对虾肝胰腺病原DNA样品的制备,有效避免了常规DNA样品繁琐、耗时的制备步骤,极大地提高了核酸水平病原检测效率。 展开更多
关键词 核酸释放剂 重组酶聚合酶扩增(RPA) 侧流层析试纸条(LFD) 虾肝胰腺 病原快速检测
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基于纳米孔读取的DNA存储发展与展望 被引量:1
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作者 林艺生 武瑞君 +1 位作者 钱珑 张成 《集成技术》 2024年第3期54-73,共20页
现代社会正处于数据爆炸的时代,全球对数据存储的需求已经远远超过了已有的存储能力。DNA是一种天然的遗传信息载体,可实现稳定、高效、低功耗的数据存储。目前的DNA存储过程主要分为6个环节:编码、写入、保存、检索、读取、解码。纳米... 现代社会正处于数据爆炸的时代,全球对数据存储的需求已经远远超过了已有的存储能力。DNA是一种天然的遗传信息载体,可实现稳定、高效、低功耗的数据存储。目前的DNA存储过程主要分为6个环节:编码、写入、保存、检索、读取、解码。纳米孔测序技术被广泛应用于读取DNA中所存储的信息。该文系统性地介绍了纳米孔分子检测技术的原理和发展历史,及其在DNA存储中的应用。此外,该文总结了机器学习在纳米孔检测技术中的应用,着重介绍了结合机器学习的新型纳米孔检测技术。该文为纳米孔检测技术的发展提供了新方向,也为新型实用化DNA存储系统的发展奠定了基础。 展开更多
关键词 纳米孔测序 纳米孔检测 dna存储 机器学习
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乙肝患者HBV-DNA载量与血清标志物水平的相关性及其对抗病毒疗效的预测价值
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作者 隋娟 钟芳芳 郑秀霞 《中国民康医学》 2024年第10期148-150,154,共4页
目的:观察乙型肝炎(简称乙肝)患者HBV-DNA载量与血清标志物[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒核心抗体(HBcAb)、HBcAb-免疫球蛋白M(IgM)]水平的相关性及其对抗病毒疗效的预测价值。方法:选取2020年7月至2022年7月... 目的:观察乙型肝炎(简称乙肝)患者HBV-DNA载量与血清标志物[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒核心抗体(HBcAb)、HBcAb-免疫球蛋白M(IgM)]水平的相关性及其对抗病毒疗效的预测价值。方法:选取2020年7月至2022年7月该院收治的154例乙肝患者进行前瞻性研究,测定其入院时、抗病毒治疗1个月后HBV-DNA载量与血清标志物水平。采用Pearson相关性分析,分析乙肝患者入院时HBV-DNA载量与血清标志物水平的相关性;比较抗病毒治疗6个月不同疗效患者抗病毒治疗1个月时HBV-DNA载量与血清标志物水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析抗病毒治疗1个月HBV-DNA载量与血清标志物水平单项及联合检测对抗病毒治疗6个月后疗效的预测价值。结果:Pearson相关性分析结果显示,入院时,乙肝患者HBVDNA载量与血清HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBcAb-IgM水平均呈正相关(r>0,P<0.05);抗病毒治疗6个月后完全应答患者治疗1个月时HBV-DNA载量和血清HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBcAb-IgM水平均低于未完全应答患者,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,乙肝患者抗病毒治疗1个月后HBV-DNA载量与血清HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBcAb-IgM水平联合检测对抗病毒治疗6个月后的疗效预测价值[曲线下面积(AUC)=0.905]高于五者单项检测(AUC=0.779、0.802、0.792、0.739、0.831)。结论:乙肝患者HBV-DNA载量与血清HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBcAb-IgM水平均呈正相关,且乙肝患者抗病毒治疗1个月后HBV-DNA载量与血清HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBcAb-IgM水平联合检测对抗病毒治疗6个月后的疗效预测价值高于五者单项检测。 展开更多
关键词 HBV-dna载量 血清标志物 抗病毒疗效 检测 预测 价值
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吲哚羧酸类Dy(Ⅲ)配合物与DNA作用机制研究
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作者 罗思雨 朱小双 +2 位作者 何秋蓉 王思茗 李冰 《石油化工应用》 CAS 2024年第1期105-107,121,共4页
以7-氮杂吲哚-3-羧酸(7AI_(3)CAH_(2))为配体构筑了一例新型稀土Dy(Ⅲ)配合物[Dy(7AI_(3)CAH)_(2)(NO_(3))(H_(2)O)_(2)],利用元素分析、红外光谱、热重分析等对其进行结构表征。黏度法和荧光光谱表明该配合物与小牛胸腺DNA(CT-DNA)间... 以7-氮杂吲哚-3-羧酸(7AI_(3)CAH_(2))为配体构筑了一例新型稀土Dy(Ⅲ)配合物[Dy(7AI_(3)CAH)_(2)(NO_(3))(H_(2)O)_(2)],利用元素分析、红外光谱、热重分析等对其进行结构表征。黏度法和荧光光谱表明该配合物与小牛胸腺DNA(CT-DNA)间结合模式为嵌插结合,配合物与CT-DNA表现出良好结合作用。 展开更多
关键词 配合物 7-氮杂吲哚-3-羧酸 小牛胸腺dna
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