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Analysis and Review of Downregulated Actin Cytoskeletal Proteins in Non-Small Cell Lung Cancer
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作者 Hala M. Abdel Mageed Praveen Sahu Raji Sundararajan 《Journal of Biosciences and Medicines》 2024年第4期89-115,共27页
Actin, a highly conserved protein, plays a dominant role in Non-small cell lung cancer (NSCLC). Late diagnosis and the aggressive nature of NSCLC pose a significant threat. Studying the clinic pathological properties ... Actin, a highly conserved protein, plays a dominant role in Non-small cell lung cancer (NSCLC). Late diagnosis and the aggressive nature of NSCLC pose a significant threat. Studying the clinic pathological properties of NSCLC proteins is a potential alternative for developing treatment strategies. Towards this, 35 downregulated actin cytoskeletal proteins on NSCLC prognosis and treatment were studied by examining their protein-protein interactions, gene ontology enrichment terms, and signaling pathways. Using PubMed, various proteins in NSCLC were identified. The protein-protein interactions and functional associations of these proteins were examined using the STRING database. The focal adhesion signaling pathway was selected from all available KEGG and Wiki pathways because of its role in regulating gene expression, facilitating cell movement and reproduction, and significantly impacting NSCLC. The protein-protein interaction network of the 35 downregulated actin cytoskeleton proteins revealed that ACTG1, ACTR2, ACTR3, ANXA2, ARPC4, FLNA, TLN1, CALD1, MYL6, MYH9, MYH10, TPM1, TPM3, TPM4, PFN1, IQGAP1, MSN, and ZXY exhibited the highest number of interactions. Whereas HSPB1, CTNNA1, KRT17, KRT7, FLNB, SEPT2, and TUBA1B displayed medium interactions, while UTRN, TUBA1B, and DUSP23 had relatively fewer interactions. It was discovered that focal adhesions are critical in connecting membrane receptors with the actin cytoskeleton. In addition, protein kinases, phosphatases, and adapter proteins were identified as key signaling molecules in this process, greatly influencing cell shape, motility, and gene expression. Our analysis shows that the focal adhesion pathway plays a crucial role in NSCLC and is essential for developing effective treatment strategies and improving patient outcomes. 展开更多
关键词 Non-Small Cell Lung Cancer NSCLC actin actin Cytoskeletal proteins Focal Adhesion KEEG Pathway
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Actin Visualization in Living Immature Pollen of Rice Using a GFP-Mouse Talin Fusion Protein
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作者 徐是雄 王凌健 +2 位作者 丘志平 叶永健 余旭红 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第6期642-648,共7页
Green fluorescent protein (GFP) fused to the F_actin binding domain of mouse talin labels the actin cytoskeleton in the immature pollen of stable transformed rice (Oryza sativa L.) plants. Actin microfilaments could b... Green fluorescent protein (GFP) fused to the F_actin binding domain of mouse talin labels the actin cytoskeleton in the immature pollen of stable transformed rice (Oryza sativa L.) plants. Actin microfilaments could be visualized only in the late_developmental stage of the immature pollen. During this developmental stage, microfilaments, initially composed of very short fibrils, develop into a very complex and novel network that sometimes totally and sometimes partially encloses the vegetative nucleus and the spherical shaped generative cell in the central cytoplasm of the immature pollen. The behavior of the actin microfilamentous structure throughout the late_developmental stage of the immature pollen is extremely dynamic, and the likelihood of this structure in generating forces for vegetative nucleus and generative cell movement in the immature pollen has been discussed. No actin filaments were visualized in the spherical generative cells. 展开更多
关键词 Oryza sativa POLLEN green fluorescent protein (GFP) mouse talin actin MICROFILAMENT
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F-Actin Visualization in Generative and Sperm Cells of Living Pollen of Rice Using a GFP-Mouse Talin Fusion Protein
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作者 徐是雄 叶秀麟 +2 位作者 王凌健 丘志平 叶永健 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第8期949-958,共10页
Green fluorescent protein (GFP) fused to the F-actin binding domain of mouse talin labels the actin cytoskeleton in the living generative and sperm cells of a third generation transgenic rice (Oryza sativa L.) plant, ... Green fluorescent protein (GFP) fused to the F-actin binding domain of mouse talin labels the actin cytoskeleton in the living generative and sperm cells of a third generation transgenic rice (Oryza sativa L.) plant, A005-G-T-1-2. Observations were made on pollen at four major developmental stages, viz. I. uni-nucleate microspore stage; II. early bi-cellular pollen stage; III. late bi-cellular pollen stage; and IV. tri-cellular pollen stage. At each of these developmental stages vegetative nucleus, generative nucleus/ cell, and sperm cells were seen undergoing continuous and coordinated motion and migration. These movements seemed to be influenced by associated microfilament networks existing in the pollen. Based on these observations we propose that it is the interaction between the microfilament networks (usually one existing in the central cytoplasm and another in the cortex) that controls the dynamic movement of the vegetative nucleus, generative nucleus/cell and sperm cells. Furthermore, we have also observed that there is an array of microfilaments (oriented mostly parallel to the long axis of the cell) existing in the generative and sperm cells. As far as we are aware, this is the first report showing the existence of microfilaments in living generative and sperm cells of rice pollen. The implication and significance of the existence of microfilaments in generative and sperm cells in rendering self-propelled motion of these cells in relation to their passage and movement in the pollen tube and embryo sac for fertilization were discussed. 展开更多
关键词 Oryza sativa living pollen green fluorescent protein (GFP) actin microfilament generative cell sperm cells
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Actin-binding Rho activating protein is expressed in the central nervous system of normal adult rats 被引量:2
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作者 Lihua Liu Mingying Luo +7 位作者 Baolin Yang Xiaoqiong Wu Wu Zhu Yinglu Guan Weijun Cai Kerstin Troidl Wolfgang Schaper Jutta Schaper 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第13期965-970,共6页
Previous studies show that actin-binding Rho activating protein (Abra) is expressed in cardiomyocytes and vascular smooth muscle cells. In this study, we investigated the expression profile of Abra in the central ne... Previous studies show that actin-binding Rho activating protein (Abra) is expressed in cardiomyocytes and vascular smooth muscle cells. In this study, we investigated the expression profile of Abra in the central nervous system of normal adult rats by confocal immunofluorescence. Results showed that Abra immunostaining was located in neuronal nuclei, cytoplasm and processes in the central nervous system, with the strongest staining in the nuclei; in the cerebral cortex, Abra positive neuronal bodies and processes were distributed in six cortical layers including molecular layer, external granular layer, external pyramidal layer, internal granular layer, internal pyramidal layer and polymorphic layer; in the hippocampus, the cell bodies of Abra positive neurons were distributed evenly in pyramidal layer and granular layer, with positive processes in molecular layer and orien layer; in the cerebellar cortex, Abra staining showed the positive neuronal cell bodies in Purkinje cell layer and granular layer and positive processes in molecular layer; in the spinal cord, Abra-immunopositive products covered the whole gray matter and white matter; co-localization studies showed that Abra was co-stained with F-actin in neuronal cytoplasm and processes, but weakly in the nuclei. In addition, in the hippocampus, Abra was co-stained with F-actin only in neuronal processes, but not in the cell body. This study for the first time presents a comprehensive overview of Abra expression in the central nervous system, providing insights for further investigating the role of Abra in the mature central nervous system. 展开更多
关键词 actin-binding Rho activating protein actin cytoskeleton confocal immunofluorescence striated muscle nervous tissue neural regeneration
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西藏地区结直肠癌免疫治疗和靶向治疗相关分子标志物的检测及意义 被引量:1
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作者 罗含欢 刘斌云 +7 位作者 霍真 边巴扎西 王倩 多布啦 尼玛卓玛 达珍 王寒 郭平平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期184-192,共9页
目的研究西藏地区结直肠癌中SWI/SNF相关、基质相关、肌动蛋白依赖性染色质调节因子A亚科成员4(SMARCA4)/Brahma相关基因1、V-raf鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B(BRAF)、P53、程序性死亡受体1(PD-1)及程序性死亡配体1(PD-L1)免疫组织化学表... 目的研究西藏地区结直肠癌中SWI/SNF相关、基质相关、肌动蛋白依赖性染色质调节因子A亚科成员4(SMARCA4)/Brahma相关基因1、V-raf鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B(BRAF)、P53、程序性死亡受体1(PD-1)及程序性死亡配体1(PD-L1)免疫组织化学表达和BRAF、神经营养因子酪氨酸受体激酶(NTRK)基因改变情况,为西藏地区结直肠癌患者的靶向治疗及免疫治疗提供依据。方法收集2015年1月至2021年7月西藏自治区人民医院经手术切除病理确诊为结直肠癌病例64例,全部病例均进行SMARCA4、BRAF、P53、PD-1、PD-L1免疫组织化学染色和NTRK1、NTRK2、NTRK3融合基因荧光原位杂交检测及BRAF V600E基因突变PCR检测。结果64例结直肠癌病例男女比例1.21∶1,平均年龄(56.59±13.27)岁;46例(71.88%)位于结肠,18例(28.12%)位于直肠;60例(93.75%)为腺癌,4例(6.25%)为其他类型;11例(17.19%)为T1或T2期,53例(82.81%)为T3或T4期;24例(37.50%)出现淋巴结转移。免疫组织化学方面,64例中1例(1.56%)SMARCA4部分肿瘤细胞表达减弱或缺失,4例(6.25%)BRAF肿瘤细胞阳性表达,35例(54.69%)P53为突变型表达;45例(70.31%)PD-1肿瘤相关免疫细胞阳性比例分数<10%,19例(29.69%)≥10%;52例(81.25%)PD-L1联合阳性分数<10,12例(18.75%)≥10。64例NTRK1、NTRK2、NTRK3融合基因检测均为阴性;4例(6.25%)检测到BRAF V600E基因突变;1例SMARCA4表达缺失病例未检测到SMARCA4基因改变。PD-L1的表达与错配修复缺陷/高度微卫星不稳定和PD-1的高表达呈显著正相关(χ^(2)=10.223,P=0.001;χ^(2)=11.979,P=0.001)。结论西藏地区结直肠癌中较少出现SMARCA4表达减弱或缺失及NTRK融合基因改变,少数病例有BRAF V600E基因突变,Pan-TRK和BRAF免疫组织化学可作为NTRK融合基因及BRAF基因突变的初筛方法。错配修复缺陷/高度微卫星不稳定的病例中更容易出现PD-L1蛋白高表达,这部分患者有望获益于免疫治疗。P53突变与PD-L1表达无相关性,PD-1的高表达和PD-L1的高表达呈正相关。 展开更多
关键词 西藏地区 结直肠癌 SWI/SNF相关、基质相关、肌动蛋白依赖性染色质调节因子A亚科成员4 程序性死亡受体1 程序性死亡配体1 V-raf鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B 神经营养因子酪氨酸受体激酶
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血清长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1水平与钙化性主动脉瓣狭窄病人左心室功能的相关性研究
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作者 许国磊 吴宝 +3 位作者 吴欣芳 王吉元 姜北 侯玮琼 《安徽医药》 CAS 2024年第3期542-547,共6页
目的 分析血清长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)表达水平与钙化性主动脉瓣狭窄(CAS)病人左心室收缩及舒张功能的相关性。方法 于2020年1月至2021年12月,选取中国中医科学院广安门医院就诊的CAS病人129... 目的 分析血清长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)表达水平与钙化性主动脉瓣狭窄(CAS)病人左心室收缩及舒张功能的相关性。方法 于2020年1月至2021年12月,选取中国中医科学院广安门医院就诊的CAS病人129例作为CAS组[左心室射血分数(LVEF)≥50%],同期该院健康志愿者130例作为对照组。收集病人人口学资料、超声及实验室生化指标,检测血清lncRNA AFAP1-AS1表达。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清lncRNA AFAP1-AS1诊断CAS效能。结果 对照组血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.15±0.18)低于CAS组(1.58±0.30)(P<0.001)。轻度狭窄者血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.37±0.26)低于中、重度狭窄者,而中度狭窄者lncRNA AFAP1-AS1表达水平(1.59±0.30)低于重度狭窄者(1.79±0.34)(P<0.001)。ROC结果显示,血清lncRNA AFAP1-AS1诊断CAS、重度狭窄的曲线下面积分别为0.86[95%CI:(0.82,0.91)]、0.88[95%CI:(0.82,0.94)]。CAS组AVA水平低于对照组(P<0.001),左室舒张末期内径(LVEDD)、左室舒张末期容积(LVEDV)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、左房前后径(LAD)、主动脉瓣平均压差(PGmean)、主动脉瓣峰值流速(Vmax)水平高于对照组(均P<0.001)。相关性分析显示,血清lncRNA AFAP1-AS1与LVEDD、Vmax、二尖瓣口舒张早期血流速度峰值(E峰)、二尖瓣口舒张晚期血流速度峰值(A峰)、LVEDV、PGmean、LVESD呈正相关(r=0.60、0.66、0.72、0.68、0.56、0.57、0.50,均P<0.001),与LVEF、AVA呈负相关(r=-0.78、-0.62,均P<0.001)。结论 CAS病人血清lncRNA AFAP1-AS1表达水平升高,与CAS病情严重程度以及左心室舒张、收缩功能有关,并可作为无创血清标志物辅助临床诊断CAS。 展开更多
关键词 主动脉瓣狭窄 肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1 钙质沉着症 左心室功能 严重程度 相关性
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苎麻Actin1基因克隆及其在韧皮部纤维不同发育阶段的表达 被引量:13
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作者 马雄风 喻春明 +5 位作者 唐守伟 朱爱国 王廷周 朱四元 刘建新 熊和平 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期101-108,共8页
通过cDNA文库的PCR筛选法获得苎麻内源肌动蛋白基因片段,采用苎麻[Boehmeria nivea(L.)Gaud]中苎1号为材料,结合RACE技术获得了苎麻的Actin1蛋白编码基因(BnACTIN1)的cDNA全长序列(GenBank登录号为DQ665832,2009年8月1日公布),该基因全... 通过cDNA文库的PCR筛选法获得苎麻内源肌动蛋白基因片段,采用苎麻[Boehmeria nivea(L.)Gaud]中苎1号为材料,结合RACE技术获得了苎麻的Actin1蛋白编码基因(BnACTIN1)的cDNA全长序列(GenBank登录号为DQ665832,2009年8月1日公布),该基因全长cDNA序列1782bp,编码区长1134bp,编码377个氨基酸残基。Blastn分析表明,BnACTIN1基因与桑树(Morusalba:DQ785808)、蓖麻子(Ricinus communis:AY360221)、棉花(Gossypium hirsutum:AY305723-305736)等植物的肌动蛋白基因序列有高度的同源性。对推导的氨基酸序列进行分子进化分析表明,该基因与棉花Actin蛋白家族AAP73451.1、AAP73457.1聚为一类,三者之间的亲源关系最近。建立荧光定量PCR体系,用18SrRNA和Histone3内参基因对表达水平均一化,分析BnACTIN1基因在苎麻纤维细胞伸长过程中的表达水平变化。结果表明,在株高97cm时最高,约为株高11、150和220cm时表达量的230倍以上,是株高47cm时期的20倍。本研究揭示的所获得BnACTIN1序列为苎麻的Actin1蛋白编码基因,其最高表达时期开始于纤维快速伸长时期,但稍早于纤维发育的高峰期,推测该基因可能与韧皮部纤维伸长过程中的肌细胞骨架形成有关。 展开更多
关键词 苎麻 肌动蛋白 基因克隆 实时定量PCR
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紧密连接蛋白ZO-1、occludin和actin参与缺氧缺血诱导的血脑屏障通透性增加 被引量:24
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作者 吴丽文 尹飞 +2 位作者 彭镜 王卫东 甘娜 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2008年第4期513-516,共4页
目的探讨血脑屏障紧密连接(blood-brain barrier-tight junction,BBB-TJ)蛋白ZO-1、occludin和ac-tin在缺氧缺血诱导的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性增加中的变化及其机制。方法利用人脐静脉内皮细胞系ECV304与星形胶质细胞(... 目的探讨血脑屏障紧密连接(blood-brain barrier-tight junction,BBB-TJ)蛋白ZO-1、occludin和ac-tin在缺氧缺血诱导的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性增加中的变化及其机制。方法利用人脐静脉内皮细胞系ECV304与星形胶质细胞(astrocytes,AS)共培养建立体外BBB模型,模型随机分为正常对照组和缺氧缺血两组。透射电镜观察两组间BBB-TJ的变化,直接免疫荧光观察细胞骨架蛋白actin分布的改变。γ计数仪检测大分子物质125I-牛血清白蛋白(125I-BSA)通透曲线观察BBB通透性的改变,Western blot检测细胞骨架蛋白actin,胞浆附着蛋白ZO-1,跨膜蛋白occludin的表达量的改变。结果透射电镜观察培养第10天的体外BBB模型,可见内皮细胞连接紧密,细胞间形成光滑、连续、较高密度的紧密连接。缺氧缺血后5 h,内皮细胞间连接开放,形成裂隙。直接免疫荧光下检测可见周边Actin丝带模糊,部分断裂,形成细胞间裂隙。缺氧缺血组125I-BSA的通透量增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。同时ZO-1的表达量显著减少,而occludin和actin的表达量无明显改变。结论缺氧缺血诱导occludin的位置分布改变和ZO-1的表达量减少进而促使actin蛋白发生重排,是导致缺氧缺血后BBB通透性增加的可能机制之一。 展开更多
关键词 血脑屏障 紧密连接蛋白 actin ZO-1 OCCLUDIN 通透性 细胞培养
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唐鱼β-actin基因近端和远端启动子的鉴定及其启动活性分析 被引量:7
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作者 王海英 叶星 +3 位作者 劳海华 夏仕玲 白俊杰 简清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1768-1775,共8页
利用高保真PCR技术获得唐鱼(Tanichthys albonubes)长为1.3 kb的β-肌动蛋白(β-actin)近端启动调控序列(TA,1.3 kb)。在此基础上采用基因组步移技术(Genome walker)获得5′侧翼上游序列1.7 kb,再根据所获的近端启动子序列和上游序列设... 利用高保真PCR技术获得唐鱼(Tanichthys albonubes)长为1.3 kb的β-肌动蛋白(β-actin)近端启动调控序列(TA,1.3 kb)。在此基础上采用基因组步移技术(Genome walker)获得5′侧翼上游序列1.7 kb,再根据所获的近端启动子序列和上游序列设计引物,扩增获得全长为3.0 kb的唐鱼β-actin基因远端启动调控序列(TLA,3.0 kb)。此1.3 kb和3.0 kb启动调控序列均包含3个转录活性元件:CAAT Box(-89^-85),CArG Box(-59^-49),TATA Box(-26^-20)。利用启动子分析软件TRANSFAC 6.0分析,结果显示启动调控序列(-105~1261)中含有E-Box、NF-Y、Sp1等多个重要转录因子结合位点,在远端启动调控序列(-1719~1261)中还含有更多的重要转录因子结合位点。将这两个序列分别定向克隆到红色荧光蛋白(Red fluorescent protein,RFP)表达载体中,构建重组表达载体pTLA-DsRed和pTA-DsRed,并分别注射到唐鱼受精卵中,结果显示转pTLA-DsRed基因唐鱼的阳性率较转pTA-DsRed的高,且所发出的红色荧光的强度也比后者的强。采用RT-PCR检测孵化后第15天的转基因唐鱼中RFP的mRNA,结果显示转pTLA-DsRed基因唐鱼中RFP mRNA的表达量比转pTA-DsRed基因唐鱼高35.7%。结果表明两种长度的启动调控序列均能有效驱使外源基因在唐鱼体内表达,且长度为3.0 kb的启动子序列具有更强的驱动活性。 展开更多
关键词 唐鱼 β-肌动蛋白启动子 红色荧光蛋白 显微注射 表达 转录活性
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强化铁营养对缺铁大鼠耳蜗膜性组织actin、myosin、desmin和HSP表达的影响 被引量:2
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作者 周怀恩 孙爱华 +5 位作者 岳波 王宝东 范静平 林顺涨 邓月 杨毓梅 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期575-579,共5页
目的应用蛋白质组学技术研究强化铁营养对缺铁大鼠耳蜗膜性组织肌动蛋白(actin)、肌球蛋白(myosin)、结蛋白(desmin)和热休克蛋白(heat shock protein,HSP)表达的影响。方法体重25~35g、健康、无耳疾、ABR阈值正常的1~2周龄Wistar大鼠... 目的应用蛋白质组学技术研究强化铁营养对缺铁大鼠耳蜗膜性组织肌动蛋白(actin)、肌球蛋白(myosin)、结蛋白(desmin)和热休克蛋白(heat shock protein,HSP)表达的影响。方法体重25~35g、健康、无耳疾、ABR阈值正常的1~2周龄Wistar大鼠120只,随机分成正常对照组20只,喂以标准饲料16周;缺铁大鼠组100只,喂以缺铁饲料8周后,复制出至少有一耳ABR阈值改变≥15dB的大鼠共41只,再将该41只大鼠随机分成缺铁耳聋组20只和强化铁治疗组21只,缺铁耳聋组继续喂以缺铁饲料8周、强化铁治疗组喂以强化铁饲料8周后,取大鼠耳蜗膜性组织进行蛋白质组学分析,对各组间actin、myosin、desmin和HSP表达的差异进行比较。结果缺铁耳聋组大鼠耳蜗膜性组织中的actin、myosin及HSP种类较正常对照组减少,并出现特异蛋白质desmin;强化铁治疗组大鼠耳蜗膜性组织myosin和HSP种类较缺铁耳聋组增加,actin种类未见明显改变,desmin消失。结论铁缺乏导致的耳蜗actin、myosin及HSP种类减少,以及出现特异性蛋白质desmin,可能与缺铁性聋的发生发展有关;强化铁营养可使缺铁耳聋大鼠耳蜗myosin和HSP种类增加,desmin消失。 展开更多
关键词 铁缺乏 蛋白质组学 耳聋 肌动蛋白 热休克蛋白
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糖络宁调控细胞骨架干预糖尿病周围神经病变脱髓鞘的作用机制
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作者 闫仕祺 刘东齐 +1 位作者 刘浩龙 杨鑫伟 《环球中医药》 CAS 2024年第10期1919-1929,共11页
目的 基于PDZ和LIM结构域蛋白7(PDZ and LIM domain protein 7,Pdlim7)和突触极蛋白(synaptopodin-2,Synpo2)调控的丝状肌动蛋白(filamentous actin, F-actin)探讨糖络宁改善糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)... 目的 基于PDZ和LIM结构域蛋白7(PDZ and LIM domain protein 7,Pdlim7)和突触极蛋白(synaptopodin-2,Synpo2)调控的丝状肌动蛋白(filamentous actin, F-actin)探讨糖络宁改善糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)脱髓鞘的干预作用及机制。方法 采用腹腔注射链脲佐菌素建立高血糖大鼠模型。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组(α-硫辛酸,20 mg/kg)和糖络宁组(10.9 g/kg),每组12只。干预12周后,观察透射电镜观察大鼠坐骨神经超微结构并统计髓鞘相对面积和G-ratio;检测鼠尾热痛阈值与坐骨神经神经传导速度,观察各组大鼠神经功能;4D-label free蛋白质组学联合生物信息学分析筛选DPN大鼠坐骨神经的差异性蛋白。采用蛋白免疫印迹法与免疫荧光法检测坐骨神经细胞骨架相关胶质纤维酸性蛋白、微管蛋白、F-actin和Pdlim7、Synpo2的表达。结果 与空白组比较,模型组坐骨神经髓鞘相对面积和G-ratio数值降低(P<0.05),热痛阈值增加(P<0.01),运动和感觉神经传导速度均降低(P<0.01);与模型组比较,糖络宁组髓鞘相对面积和G-ratio数值显著升高(P<0.01),热痛阈值降低(P<0.01),运动和感觉神经传导速度均增加(P<0.01)。蛋白质组学显示,糖络宁干预12周后,DPN大鼠坐骨神经差异蛋白多与细胞骨架、肌动蛋白结合及PDZ结构域和LIM结构域蛋白相关。与空白组比较,模型组坐骨神经中F-actin、Pdlim7和Synpo2表达降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01);与模型组比较,糖络宁组F-actin、Pdlim7和Synpo2表达明显升高(P<0.01)。共定位结果表明,与空白组比较,模型组髓鞘上F-actin表达显著降低(P<0.01),与F-actin共定位的Pdlim7表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,糖络宁组髓鞘上F-actin表达显著升高(P<0.01),与F-actin共定位的Pdlim7表达明显升高(P<0.01)。结论 糖络宁改善DPN坐骨神经脱髓鞘与调控细胞骨架相关,机制与增加Pdlim7和Synpo2的表达,进而增加细胞骨架蛋白F-actin生成而促进髓鞘生成有关。 展开更多
关键词 糖尿病周围神经病变 丝状肌动蛋白 PDZ和LIM结构域蛋白7 突触极蛋白 糖络宁
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CD2AP突变对肾小球足细胞骨架蛋白F-actin分布的影响 被引量:1
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作者 赵彩霞 潘晓霞 +4 位作者 冯晓蓓 隆琦 王伟铭 王朝晖 陈楠 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期747-751,共5页
目的构建突变型CD2相关蛋白(CD2AP)荧光表达载体并转染肾小球足细胞,观察细胞内骨架蛋白F-actin分布的变化。方法定点诱变真核表达质粒pcDNA6-V5-CD2AP致CD2AP第2外显子160G>A杂合突变,测序鉴定。利用野生型和突变型质粒和pEGFP-C1... 目的构建突变型CD2相关蛋白(CD2AP)荧光表达载体并转染肾小球足细胞,观察细胞内骨架蛋白F-actin分布的变化。方法定点诱变真核表达质粒pcDNA6-V5-CD2AP致CD2AP第2外显子160G>A杂合突变,测序鉴定。利用野生型和突变型质粒和pEGFP-C1荧光表达载体,分别构建野生型和突变型重组质粒pEGFP-C1-CD2AP荧光表达载体并转染小鼠肾小球足细胞,荧光显微镜观察处于不同细胞周期的足细胞内F-actin分布情况。结果测序结果显示,pcDNA6-V5-CD2AP真核表达载体CD2AP的2号外显子第160位碱基G诱变为A,而其他碱基未发生改变。在细胞分裂间期,未转染足细胞内F-actin平行排列成纤维束;野生型重组质粒转染足细胞内F-actin在细胞核周围呈点、块状浓聚;而突变型重组质粒转染足细胞内F-actin主要在细胞膜上勾出轮廓。在细胞分裂中期,野生型重组质粒转染足细胞内F-acin纤维丝呈粗纤维状,环细胞浓聚;突变型重组质粒转染足细胞则仅见胞质内F-acin纤维丝增多,部分区域浓聚。结论成功构建野生型和突变型重组CD2AP荧光表达载体。CD2AP基因160G>A杂合突变使肾小球足细胞分裂间期和分裂中期的F-actin纤维骨架发生改变。 展开更多
关键词 CD2相关蛋白 F-actin 表达载体 肾小球足细胞 突变
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猪瘟病毒N^(pro)蛋白与宿主蛋白β-actin相互作用的鉴定 被引量:1
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作者 冯烁 李素 +3 位作者 王竞晗 董泓 何文瑞 仇华吉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期602-605,共4页
为研究与猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白相互作用的宿主蛋白,本研究采用酵母双杂交方法从猪外周血单个核细胞cDNA表达文库中筛选获得与Npro蛋白相互作用的宿主蛋白β-actin,经共转化试验和免疫共沉淀试验表明两者存在特异的相互作用,激光共聚... 为研究与猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白相互作用的宿主蛋白,本研究采用酵母双杂交方法从猪外周血单个核细胞cDNA表达文库中筛选获得与Npro蛋白相互作用的宿主蛋白β-actin,经共转化试验和免疫共沉淀试验表明两者存在特异的相互作用,激光共聚焦试验显示两者共定位于细胞浆。本研究表明Npro蛋白与宿主细胞β-actin蛋白存在相互作用的关系。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 N^pro蛋白 Β-actin 相互作用
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尼罗罗非鱼β-actin基因启动子的分离及其在真核细胞中的活性验证 被引量:1
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作者 邹芝英 王茂元 +1 位作者 李大宇 杨弘 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2011年第1期78-82,共5页
采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,... 采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,荧光显微镜下观察外源基因EGFP在细胞中的表达情况。结果显示:β-actin基因启动子调控区具有典型的启动子特征,含有TATA Box、CArG和CCAAT Box 3个重要的顺式作用元件。荧光显微镜下观察到50%~60%的HEK 293T细胞中发出绿色荧光,显示尼罗罗非鱼β-actin基因启动子能够驱动EGFP的转录和表达,具有较好的活性,为构建"全鱼"转基因罗非鱼的研究奠定基础。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) Β-肌动蛋白 启动子 绿色荧光蛋白 转染
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CT-1C末端多肽对昆明小鼠心肌肌小节α-Actin、α-Actinin及UCP_2表达的影响 被引量:1
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作者 陈淑芬 张卫 +3 位作者 魏桃枝 许闽广 董战玲 张惠 《海南医学院学报》 CAS 2014年第4期448-452,457,共6页
目的:观察心脏营养素-1(CT-1)慢性作用所诱导的小鼠重构心肌中,肌小节收缩性蛋白α-Actin、细胞骨架蛋白α-Actinin及线粒体解偶联蛋白-2(UCP2)的表达情况。方法:实验组昆明小鼠腹腔注射CT-1C末端肽(carboxy-terminal polypeptide of ca... 目的:观察心脏营养素-1(CT-1)慢性作用所诱导的小鼠重构心肌中,肌小节收缩性蛋白α-Actin、细胞骨架蛋白α-Actinin及线粒体解偶联蛋白-2(UCP2)的表达情况。方法:实验组昆明小鼠腹腔注射CT-1C末端肽(carboxy-terminal polypeptide of cardiotrophin-1,CT-1-CP)1、2、3、4周(每组10只,雌雄各半)后,对照组小鼠(10只,雌雄各半)腹腔注射生理盐水4周后,摘取小鼠心脏标本,石蜡包埋,切5μm厚切片,采用SABC检测肌小节结构蛋白α-Actin、α-Actinin与UCP2在小鼠心肌中的表达情况;同时采用Western blot检测小鼠心肌组织中3种蛋白质的相对表达量。结果:免疫组化结果显示,α-Actin的阳性颗粒主要集中于细胞核的周围,α-Actinin则趋于向肌节的横纹处汇聚,而UCP2则较均匀地散布于肌细胞浆中。结合Western blot相对灰度的比较分析,在对照组,α-Actin的表达水平略高于α-Actinin和UCP2,但3者之间并无明显的差异(WB:F=0.249,P>0.05)。注射CT-1-CP后,α-Actin的表达基本呈逐渐减弱的趋势,但对照组与4个注射组之间并无明显差异(χ2=7.386,P>0.05);与之相反,α-Actinin的表达则呈逐渐增强的趋势,阳性细胞数的百分比和阳性颗粒的染色强度都逐渐增多,而且各组间呈现出明显差异(χ2=21.977,P<0.01);UCP2的表达则在1周后增强,2周后达最高值,随后出现降低,4周后降至接近对照组的水平。结论:CT-1-CP的慢性作用可导致肌小节不同结构蛋白的比例发生改变,α-Actin的表达减少,α-Actinin的表达增多;而线粒体UCP2的表达达到一定峰值后即开始降低。 展开更多
关键词 CT一1c末端多肽(CT一1CP) α一肌动蛋白(d-actin) α一辅肌动蛋白(α-actinin) 线粒体解耦联蛋白-2(UCP )
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细胞外基质蛋白ABI3BP抗水疱性口炎病毒初步作用研究
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作者 孟祥博 陈美桦 +5 位作者 许诺 李天琪 李帅臣 周孙欣 陈欢 张彤 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2024年第1期1-8,I0001,共9页
目的探讨细胞外基质蛋白ABI3BP对水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)基因组复制和先天免疫信号通路的影响。方法在人皮肤成纤维细胞BJ-5ta中转染小干扰RNA(siRNA)敲低ABI3BP基因,建立ABI3BP基因缺失的VSV-GFP病毒感染细胞... 目的探讨细胞外基质蛋白ABI3BP对水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)基因组复制和先天免疫信号通路的影响。方法在人皮肤成纤维细胞BJ-5ta中转染小干扰RNA(siRNA)敲低ABI3BP基因,建立ABI3BP基因缺失的VSV-GFP病毒感染细胞模型。通过鬼笔环肽细胞免疫荧光实验,检测敲低ABI3BP后细胞内肌动蛋白(F-actin)形态结构的变化。在ABI3BP基因缺失的VSV-GFP病毒感染细胞模型上,利用RT-qPCR方法检测细胞中病毒mRNA水平的变化。利用免疫印迹法(Western blotting)检测IRF3和TBK1磷酸化水平的变化。结果成功建立敲减ABI3BP基因的VSV-GFP感染的细胞模型。鬼笔环肽细胞免疫荧光染色表明,敲减ABI3BP基因后,细胞内F-actin的表达发生结构重排。采用不同剂量的病毒感染细胞,与对照组相比,ABI3BP敲低细胞中基因拷贝数分别增加2.5~3.5倍(P<0.01)和2.2~4倍(P<0.01),VSV-GFP病毒蛋白表达水平显著上调;在ABI3BP基因敲低的细胞模型上,VSV-GFP病毒感染导致Ⅰ型干扰素免疫通路关键免疫分子p-IRF3和p-TBK1蛋白磷酸化水平明显下调。结论本研究表明细胞外基质蛋白ABI3BP对维持细胞内F-actin纤维网状结构具有重要作用。ABI3BP缺失促进RNA病毒的复制,ABI3BP是I型干扰素通路激活的重要调控分子。 展开更多
关键词 细胞外基质蛋白 肌动蛋白 水疱性口炎病毒 病毒复制
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猪瘟病毒C蛋白与宿主β-actin相互作用的鉴定 被引量:1
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作者 董泓 李丹 +7 位作者 陈佳宁 李素 何文瑞 冯烁 贺番 廖亚金 孙元 胡永浩 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1995-1999,共5页
为了研究猪瘟病毒(CSFV)和宿主间的相互作用,采用Co-IP方法,利用CSFV C蛋白从PK-15细胞中钓取与其相互作用的宿主蛋白质,经SDS-PAGE电泳,银染,选取差异条带,进行质谱分析,选取β-actin蛋白作为研究的对象。经内源性Co-IP试验和GST pulld... 为了研究猪瘟病毒(CSFV)和宿主间的相互作用,采用Co-IP方法,利用CSFV C蛋白从PK-15细胞中钓取与其相互作用的宿主蛋白质,经SDS-PAGE电泳,银染,选取差异条带,进行质谱分析,选取β-actin蛋白作为研究的对象。经内源性Co-IP试验和GST pulldown试验进一步证实CSFV C蛋白和β-actin可以特异性结合,激光共聚焦试验表明两者共定位于细胞质。本研究表明CSFV C蛋白与宿主细胞β-actin蛋白存在相互作用,为深入研究CSFV蛋白质与宿主蛋白质间相互作用提供了实验依据。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 C蛋白 Β-actin 病毒-宿主相互作用
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骨形态发生蛋白2介导同型半胱氨酸促进血管钙化 被引量:1
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作者 裴建升 杨文娟 +3 位作者 何静 燕茹 黄晖 贾绍斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第25期4027-4033,共7页
背景:高同型半胱氨酸血症与血管钙化之间存在一定的内部联系。但是,目前有关高同型半胱氨酸血症促进血管钙化的发病机制还不清楚。目的:探讨骨形态发生蛋白2在高同型半胱氨酸血症诱导血管钙化中的作用。方法:人颈动脉蜡块标本根据有无... 背景:高同型半胱氨酸血症与血管钙化之间存在一定的内部联系。但是,目前有关高同型半胱氨酸血症促进血管钙化的发病机制还不清楚。目的:探讨骨形态发生蛋白2在高同型半胱氨酸血症诱导血管钙化中的作用。方法:人颈动脉蜡块标本根据有无钙化斑块分为钙化组(n=29)与非钙化组(n=13)。16只ApoE-/-小鼠随机分为对照组和高同型半胱氨酸血症组,每组8只。骨形态发生蛋白2转染大鼠胸大动脉平滑肌A7r5细胞,然后应用梯度浓度同型半胱氨酸(50,100,200,400μmol/L)干预A7r5细胞。茜素红染色和苏木精-伊红染色法检测钙化反应,免疫荧光法检测骨形态发生蛋白2与Runt相关转录因子2相互作用关系,免疫组化法和Western blot检测骨形态发生蛋白2、Runt相关转录因子2、α-平滑肌肌动蛋白的表达。结果与结论:①人体颈动脉组织染色显示,与非钙化组比较,钙化组炎性细胞增多,钙化阳性率增加(P<0.05);与非钙化组比较,钙化组骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2表达量均上调,α-平滑肌肌动蛋白表达量下降(P均<0.05);②小鼠动脉标本染色显示,高同型半胱氨酸血症组钙化面积阳性率高于对照组(P<0.05);高同型半胱氨酸血症组血清同型半胱氨酸水平明显高于对照组(P<0.05);与对照组比较,高同型半胱氨酸血症组骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2表达量均上调,α-平滑肌肌动蛋白表达量下降(P均<0.05);③A7r5细胞培养分析,随着同型半胱氨酸浓度梯度增加,A7r5细胞钙化程度、骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2的蛋白表达增加(P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达降低(P<0.05);④过表达骨形态发生蛋白2的A7r5细胞培养分析,骨形态发生蛋白2过表达组较相对应的对照组、β-甘油磷酸钠组和同型半胱氨酸组钙化程度增加;Runt相关转录因子2表达上调(P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白表达下调(P<0.05);⑤同型半胱氨酸钙化培养基培养的骨形态发生蛋白2过表达A7r5细胞中骨形态发生蛋白2表达量增加,且Runt相关转录因子2表达量随骨形态发生蛋白2表达量增加而增加;⑥结果表明,骨形态发生蛋白2是高同型半胱氨酸血症调控平滑肌细胞表型转化导致血管钙化的关键靶基因。靶向调控骨形态发生蛋白2可降低高同型半胱氨酸诱导的血管钙化。 展开更多
关键词 血管钙化 同型半胱氨酸 骨形态发生蛋白2 Runt相关转录因子2 平滑肌肌动蛋白
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不同转移潜能的肝细胞肝癌细胞中EMS1/cortactin的表达与定位 被引量:1
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作者 周家名 陈莉 +2 位作者 叶蕴瑶 王桂兰 吴圆圆 《南通大学学报(医学版)》 2012年第4期255-257,244,共3页
目的:研究不同转移潜能的肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中株中EMS1/cortactin的表达与定位,探讨EMS1/cortactin与HCC细胞生物学行为的相关意义。方法:在不同生物学特性的HCC细胞株[较高转移潜能的MHCC-97H(97H),惰性潜... 目的:研究不同转移潜能的肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中株中EMS1/cortactin的表达与定位,探讨EMS1/cortactin与HCC细胞生物学行为的相关意义。方法:在不同生物学特性的HCC细胞株[较高转移潜能的MHCC-97H(97H),惰性潜能的SMMC-7721(7721)和HepG2]中采用RT-QPCR、Western Blot和免疫荧光方法检测EMS1基因和cortactin蛋白的表达,在共聚焦显微镜下观察cortactin蛋白在细胞中的定位。结果:97H、7721、HepG2细胞中EMS1 mRNA水平分别为正常肝细胞株L02的23.5倍、15.3倍和10.5倍;cortactin水平分别为L02的3.6倍、2.7倍和2.6倍(均P<0.05)。HCC细胞株中cortactin蛋白表达高于L02。97H细胞中EMS1/cortactin的表达均高于其他两株HCC细胞。各型HCC细胞株中cortactin蛋白聚集在细胞膜下的皮质区。L02细胞中cortactin蛋白弥散分布在胞质中。结论:HCC细胞中EMS1基因和cortactin蛋白高表达在癌细胞膜下的皮质区,与癌转移潜能相关。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 细胞皮质区肌动蛋白结合蛋白 转移潜能
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P38MAPK通路在内皮细胞F-actin蛋白表达中的作用及通络药物的影响 被引量:2
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作者 高怀林 王玲玲 +4 位作者 贾振华 朱慧明 刘克剑 王宏涛 吴以岭 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期769-771,共3页
目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路在络气虚滞型血管内皮功能障碍模型大鼠血清诱导的内皮细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)表达中的作用及通络药物保护血管内皮,防治血管病变的作用机制。方法:首先建立络气虚滞型血管内皮功能障... 目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路在络气虚滞型血管内皮功能障碍模型大鼠血清诱导的内皮细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)表达中的作用及通络药物保护血管内皮,防治血管病变的作用机制。方法:首先建立络气虚滞型血管内皮功能障碍(VED)大鼠模型,用模型大鼠血清体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞株,实验分为空白对照组、正常血清组、模型血清组、通心络(TXL)组、SB203580组5组。采用Western blot技术检测各组中F-actin、p38、磷酸化p38(phospho-p38)蛋白表达的变化。结果:与空白对照组和正常血清组比较,模型血清组F-actin的蛋白表达明显下调(P<0.05),phospho-p38蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05);与模型血清组比较,通心络组和SB203580组F-actin的蛋白表达明显升高(P<0.01),phospho-p38蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:p38 MAPK信号通路的激活可能参与了络气虚滞型血管内皮功能障碍模型大鼠血清诱导的F-actin蛋白表达的变化及通心络可能通过抑制p38 MAPK信号通路而对内皮功能起保护作用的,这可能是通心络防治血管病变的机制之一。 展开更多
关键词 丝裂原活化蛋白激酶 模型大鼠血清 络气虚滞 细胞骨架 纤维状肌动蛋白 通心络
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