基于元气亏虚浅析针灸“标本配穴”法防治糖尿病的理论内涵

元气亏虚是贯穿糖尿病整个过程的根本病机,是导致糖尿病发生和发展的重要因素,也是导致其迁延日久、难以根治的病理基础。因此,以元气亏虚为治疗靶点显得尤为重要。本研究以治未病思想为指导,以“双固一通”针灸法为核心,强调“正气”在疾病防治中的重要作用,提出“标本配穴”法,推测此法运用于防治糖尿病可通过固护先、后天之气针对性地治疗元气亏虚这一根本病机,但其中具体的作用机制还需进一步研究。

“标本配穴”针灸治疗联合西药对反复移植失败患者卵巢储备功能的影响

目的:观察“标本配穴”针灸治疗联合雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片对反复体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败后患者的卵巢储备功能及焦虑抑郁状态的影响。方法:选择2020年10月-2021年10月于武汉艾德华兹妇科门诊进行治疗的符合研究条件的32例卵巢储备功能低下(DOR)患者,采用随机数字表法将32例患者分为治疗组(n=16)和对照组(n=16),比较其在单纯接受药物治疗和药物配合针灸治疗前后的抗缪勒管激素(AMH)、窦卵泡计数(AFC)、血清雌二醇(E_(2))及焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)的变化。结果:“标本配穴”针灸治疗方法联合雌二醇片/雌二醇屈地孕酮片对提高患者AMH、AFC、E_(2)水平较单纯使用雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片更明显;经“标本配穴”针灸治疗方法联合雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片治疗,患者焦虑抑郁状态较治疗前有改善,较单纯使用雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片改善效果更好。结论:“标本配穴”针灸治疗联合雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片能够改善DOR患者的卵巢储备功能,缓解患者焦虑、抑郁状态,为此类患者再次移植提供良好先决条件。

标本配穴针灸对腹泻型肠易激综合征大鼠血清心脏ANP BNP的影响

目的探讨标本配穴针灸对IBS大鼠血清、心脏ANP、BNP的影响。方法随机将40只SD大鼠分为对照组、模型组、标本配穴组、常规配穴组。采用急、慢性应激结合的方法制备IBS-D模型。治疗组给予针刺结合艾灸干预,1次/d,共28 d。4组大鼠进行内脏敏感阈值测定、行为学观察,检测血清、心脏ANP、BNP含量。结果模型组大鼠内脏疼痛阈值低于对照组(P<0.01),提示造模成功。模型组大鼠出现焦虑、抑郁状态,标本配穴组大鼠焦虑、抑郁状态改善。标本配穴组、常规配穴组大鼠血清ANP、BNP含量低于模型组(P<0.01);常规配穴组大鼠心脏组织ANP、BNP含量高于标本配穴组(P<0.05)。结论标本配穴针灸能够抑制ANP、BNP活性,改善大鼠精神心理状态。

标本配穴电针预处理对心肌缺血模型大鼠心电图及心肌酶谱的影响

目的:观察不同组的心电图及心肌酶谱,比较哪种穴位配伍对抗心肌缺血的作用更明显。方法:将经心电图筛查无异常的SPF级雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组各10只:正常组(A)、模型组(B)、标本配穴防治组(C)、远近配穴对照组(D)。采用连续7 d盐酸异丙肾上腺素(ISO)皮下注射的方法造模。标本配穴防治组和远近配穴对照组,在造模前分别予以双内关、双足三里、关元穴,和双内关、膻中穴电针治疗10 min,1次/d,治疗持续21 d。实验结束后检测各组心电图和心肌酶谱(CK、CK-MB、AST、LDH)。结果:1模型组心电图S-T段显著提高;标本配穴防治组心电图S-T段提高幅度明显下降,明显低于模型组和远近配穴对照组(P<0.05)。2标本配穴组的心肌酶CK、CK-MB、AST、LDH的活性显著降低,明显低于对照组和模型组(P<0.05)。结论:标本配穴电针预处理明显抑制心肌缺血所致的ST段上抬和心肌酶活性的升高,优于常规配穴,能有效对抗心肌缺血。

不同配穴预处理对心肌缺血模型大鼠抗自由基酶的影响

目的观察不同配穴电针预处理对心肌缺血模型大鼠丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的影响。方法将经过筛查心电图无异常的50只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、标本配穴防治组、标本配穴对照组、远近配穴对照组,每组10只。以盐酸异丙肾上腺素(ISO)注射大鼠皮下的方法制作心肌缺血模型;所有配穴针刺组在造模前进行电针针刺预处理,10min,1m A,疏密波,2-100Hz。治疗后,检测MDA、SOD及GSH-PX。结果标本配穴防治组的心肌组织MDA含量明显低于模型组、标本配穴对照组和远近配穴对照组(均P<0.01),与正常组间无明显差异(P>0.05);而总SOD活力、GSH-PX酶活力则均高于模型组、标本配穴对照组和远近配穴对照组(P<0.01),低于正常组(P<0.01)。结论标本配穴对抗氧自由基的效果更明显优于其他配穴组,能有效预防心肌内脂质过氧化,能更好的保护心肌细胞线粒体免受损伤。

“标本配穴”电针对遗传性胰岛素抵抗大鼠股四头肌中氧化应激相关性指标表达的影响

目的:观察"标本配穴"电针干预方法对遗传性胰岛素大鼠模型股四头肌中氧化应激相关产物活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和抑制氧自由基相关酶超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法:7周龄Zucker fa/fa大鼠8只,随机分为电针治疗组(A组)及模型对照组(B组),另选其同窝瘦鼠(Zucker+fa/L)4只为空白对照组(C组)。A组按"标本配穴"法取"关元"、"中脘"、双侧"足三里"、"丰隆"穴,通电强度1m A,频率2Hz,每次10min,每周3次,共3周;治疗3周后大鼠处死,取其股四头肌,提取蛋白,采用紫外分光光度计法检测各组指标。结果:治疗结束后,A组大鼠体重较B组显著降低(P<0.05),股四头肌组织中SOD活性升高,ROS、MDA含量也明显降低(P<0.05)。结论:"标本配穴"电针能减少氧化应激,促进抗氧化物SOD的表达,清除氧自由基,减少脂质过氧化物MDA的产生,使机体免受氧自由基的损伤,从而减轻或控制胰岛素抵抗。

肾经标本配穴为主针灸治疗肾虚痰浊证轻度认知功能障碍临床研究

目的:观察肾经标本配穴为主针灸治疗肾虚痰浊证轻度认知功能障碍(MCI)的临床疗效。方法:将MCI患者60例随机分为2组各30例,治疗组予以肾经标本配穴为主针灸治疗,对照组予以尼莫地平口服治疗,疗程均为8周;应用中医证候积分、简易智力状态检查量表(MMSE)、蒙特利尔认知量表(MoCA)进行评估治疗效果。结果:总有效率治疗组为90.00%;对照组为36.67%,2组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗后2组中医证候积分、MMSE、MoCA量表评分均较治疗前明显改善(P <0.05),且治疗组上述各项积分改善较对照组更显著(P <0.05)。结论:肾经标本配穴为主针灸治疗MCI肾虚痰浊证疗效显著,值得临床推广应用。

“标本配穴”电针疗法配合行为疗法治疗单纯性肥胖疗效及对胰岛素抵抗、血脂水平的影响

目的：探讨“标本配穴”电针疗法配合行为疗法治疗单纯性肥胖患者的临床疗效，并研究分析对患者血清胰岛素抵抗及血脂水平的影响，为治疗有胰岛素抵抗及血脂异常的肥胖患者提供理论依据。方法：根据随机数字法将来医院进行治疗的90例患者分为电针组、行为组及综合组，于患者接受治疗前及治疗2个疗程后分别测试患者空腹状态腰围、臀围、身高、体质量、空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、总胆固醇（Tc）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C），并以此计算出腰臀围比（WHR）、体重指数（BMI），胰岛素抵抗指数（irt），收集数据进行统计学比较分析。结果：3组患者经治疗后皆有一定的疗效，而综合治疗组在臀围比及体重指数方面总有效率（96．9％、96．9％）显著优于电针组（81．3％、78．1％）及行为疗法组（64．5％、67．7％），差异有统计学意义（P〈0．05）；3组治疗前后比较，血清指标中FPG水平无明显变化（P〉0．05），FINS、TC、TG、LDL—C均较治疗前显著降低，HDL—C水平升高；治疗后，3组上述指标改善情况比较，综合治疗组显著优于电针组及行为疗法组（P〈0．05）。结论：针对有胰岛素抵抗及血脂异常的患者，应用标本配穴电针疗法或进行行为疗法治疗，皆可取得一定的治疗效果，而在行标本配穴电针疗法的基础上，在配合日常生活中的行为疗法，则可取得事半功倍的临床疗效，值得临床推广。

“标本配穴”电针对糖尿病肾病的改善作用及肾脏SIRT1蛋白表达水平的影响

目的:观察"标本配穴"电针干预方法对糖尿病肾病大鼠模型肾功能、超微结构的改善作用及肾脏SIRT1蛋白表达的影响。方法:Zucker fa/fa大鼠12只按随机数字表法分为模型对照组及非电针刺激组、电针治疗组,另选其同窝瘦鼠(Zucker+/?)4只作为空白对照组。非电针刺激组和电针治疗组分别治疗3周,于治疗后第21天测其4组大鼠的饮水量、进食量、体质量和空腹血糖、餐后血糖;治疗3周后大鼠处死,观察血清白蛋白、血肌酐、血尿素、血尿氮、肾脏超微结构及SIRT1蛋白表达水平。结果:与模型对照组比较,"标本配穴"电针治疗组大鼠进食量减少,体质量降低,空腹血糖、餐后血糖降低,血肌酐、血尿素、血尿氮水平降低,肾脏超微结构得到明显改善,SIRT1蛋白表达增多。结论:"标本配穴"电针能够改善糖尿病肾病肾功能和超微结构,可能与其上调肾脏SIRT1蛋白表达水平有关。

电针对胰岛素抵抗大鼠认知功能与下丘脑PI3K、Akt2蛋白表达的影响

目的:观察电针对胰岛素抵抗模型大鼠学习记忆能力与下丘脑中PI3K、Akt2及其磷酸化蛋白表达的影响。方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、预防组和电针组,以标本配穴法电针治疗。检测各组大鼠FBG、FIN;空间学习记忆能力;下丘脑Aβ1-42阳性表达、PI3K、Akt2及其磷酸化蛋白表达。结果:(1)较正常组大鼠,模型组大鼠FBG、FINS、ISI升高,IRI降低(P<0.01);定位航行与空间探索时间延迟,跨越次数减少(P<0.01);下丘脑Aβ1-42阳性表达减少,PI3K、Akt2及其磷酸化蛋白表达减少(P<0.01)。(2)较模型组大鼠,预防组和电针组大鼠FBG、FIN、IRI降低,ISI升高(P<0.01);定位航行与空间探索时间缩短,跨越平台次数增加(P<0.01);下丘脑Aβ1-42阳性表达增加,PI3K、Akt2及其磷酸化蛋白表达增加(P<0.01)。(3)较电针组大鼠,预防组大鼠FBG、FIN、IRI降低,ISI升高(P<0.01);定位航行时间缩短(P<0.01);下丘脑PI3K、Akt2及其磷酸化蛋白表达增加(P<0.01)。结论:电针改善胰岛素抵抗模型大鼠学习记忆能力的作用机制可能与改善中枢胰岛素抵抗状态相关。

补肾生肌中药结合“标本配穴”电针治疗肾阳虚型压疮的疗效观察

目的探讨应用补肾生肌中药结合“标本配穴”电针治疗肾阳虚型高龄患者骶尾部压疮的临床疗效观察。方法选取2016年1月至2020年6月我院就诊的肾阳虚型高龄骶尾部压疮患者60例,随机分两组,治疗组30例,对照组30例。压疮行清创处理后,对照组应用凡士林纱布换药,治疗组应用补肾生肌中药结合“标本配穴”电针治疗。两组治疗过程中,以7 d、14 d、28 d为时间点,进行McGill疼痛评分,测算创面愈合率,免疫组化法检测创面组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、促红细胞生成素(EPO)的表达,组内及组间比较,并评估其临床疗效。结果两组患者经过7 d、14 d、28 d的治疗,组内比较,McGill疼痛评分逐渐降低,创面愈合率、TGF-β1和EPO的表达逐渐升高(P<0.05);组间比较,在各个时间点上,治疗组均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用补肾生肌中药结合“标本配穴”电针治疗肾阳虚型高龄患者骶尾部压疮,补肾助阳,祛腐生肌,可有效缓解疼痛,促进压疮创面的愈合,效果满意。

标本配穴针灸法对腹泻型肠易激综合征模型大鼠紧密连接及血清炎症因子表达的影响

目的观察标本配穴针灸对腹泻型肠易激综合征模型大鼠一般体征、胃排空率、小肠推进率、肠组织形态学及血清中白介素-6(IL-6)/白介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法选取40只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、标本配穴组、常规配穴组。以急慢性应激相结合CAS方法制备腹泻型肠易激综合征大鼠模型。造模同时测定大鼠粪便含水量、胃排空率、小肠推进率、透射电镜观察大鼠肠黏膜超微结构、Elisa法检测大鼠血浆中IL-6、IL-8和TNF-α的含量。结果与空白组相比其他3组的粪便含水量升高(P<0.05)标本配穴组和常规配穴组较模型组粪便含水量降低(P<0.05)且标本配穴组低于常规配穴组(P<0.05)。与空白组比较其他3组胃排空率均降低小肠推进率均增高(P<0.05);标本配穴组与常规配穴组较模型组大鼠胃排空率增高小肠推进率降低(P<0.05);与空白组相比,模型组大鼠肠黏膜结构损伤,治疗后标本配穴组和常规配穴组较模型组大鼠的肠黏膜超微结构相对完整,且标本配穴组优于常规配穴组。与空白组相比其他3组血清中IL-6、IL-8和TNF-α含量均增高(P<0.05)标本配穴组和常规配穴组较模型组血清中IL-6、IL-8和TNF-α含量均降低(P<0.05),且标本配穴组低于常规配穴组(P<0.05)。结论标本配穴针灸可以改善腹泻型肠易激大鼠一般行为学体征、胃排空率、小肠推进率及肠组织形态学,降低血清炎症因子IL-6、IL-8和TNF-α的表达从而改善腹泻型肠易激综合征患者的症状。

“标本配穴”艾灸与针刺对腹泻型肠易激综合征大鼠肠道敏感性和自主神经功能影响的比较

目的:基于“标本配穴”探讨艾灸与针刺治疗腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠的效应差异。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组与针刺组,每组各10只。通过急-慢性应激刺激联合番泻叶灌胃28 d的方法制备IBS-D大鼠模型。艾灸组大鼠予以艾灸双侧“足三里”“关元”“内关”,针刺组予以针刺“足三里”“关元”“内关”,两组均15 min/次,每日1次,治疗21 d。观察各组大鼠稀便率,自制气囊导管测定大鼠肠道疼痛阈值、容量阈值,旷场实验观察大鼠活动总路程和方格间穿行次数,电生理记录仪采集大鼠心电图,并分析心率变异性(HRV)的时域指标R-R间期平均值的标准差(SDANN)和相邻R-R间期>50 ms的个数占总窦性心搏个数百分比(PNN50),HE染色法观察结肠组织病理形态学变化,ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠稀便率升高(P<0.05),旷场实验活动总路程及方格间穿行次数减少(P<0.05),疼痛阈值及容量阈值降低(P<0.05),SDANN、PNN50降低(P<0.01,P<0.05),血清IL-6、IL-8及TNF-α的含量显著升高(P<0.05)。与模型组比较,艾灸组与针刺组的稀便率降低(P<0.05),旷场实验活动总路程及方格间穿行次数增加(P<0.05),疼痛阈值及容量阈值升高(P<0.05),SDANN、PNN50升高(P<0.05),血清IL-6、IL-8及TNF-α含量降低(P<0.05)。与针刺组比较,艾灸组治疗后稀便率降低(P<0.05),旷场实验活动总路程及方格间穿行次数增加(P<0.05),疼痛阈值及容量阈值升高(P<0.05),SDANN、PNN50升高(P<0.05),血清IL-6、IL-8及TNF-α含量降低(P<0.05)。各组大鼠结肠组织未见明显病理形态改变。结论:“标本配穴”艾灸更能有效调节IBS-D模型大鼠HRV及血清IL-6、IL-8、TNF-α含量。基于“标本配穴”的选穴方法,艾灸对IBS-D的治疗效果优于针刺。

基于TM广靶代谢组学探讨标本配穴针灸对肠易激综合征大鼠代谢模式的影响

目的:基于TM广靶代谢组学的技术,探讨标本配穴针灸对肠易激综合征(IBS)大鼠代谢模式的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组和标本配穴组,每组10只。通过慢性、急性应激结合的方法制备IBS模型。标本配穴组给予针刺+艾灸“内关”“足三里”“关元”,每次15 min,1次/d,共28 d。测定腹壁撤退反射(AWR)压力阈值,评价Bristol粪便性状评分,计算小肠推进率,旷场实验对大鼠的行为学进行评定,HE染色法观察结肠的病理改变。利用TM广靶代谢组学技术对3组大鼠的血清样品进行代谢轮廓分析,利用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等多元统计分析方法,并结合数据库筛选差异代谢物,利用KEGG数据库进行代谢通路富集分析。结果:治疗后与对照组比较,模型组AWR压力阈值显著降低(P<0.01),Bristol粪便性状评分和小肠推进率显著升高(P<0.01)。与模型组比较,标本配穴组AWR压力阈值显著升高(P<0.01),Bristol粪便性状评分和小肠推进率显著降低(P<0.01,P<0.05)。旷场实验中,对照组大鼠的运动轨迹自由且总路程长,模型组大鼠的运动轨迹多在外围且总路程短;与对照组比较,模型组运动总距离、中央运动距离、速度、运动持续时间、穿格次数减少(P<0.01,P<0.05),休息持续时间增加(P<0.01);与模型组比较,标本配穴组运动总距离、速度、运动持续时间、中央运动距离、中央格停留时间、穿格次数增加(P<0.01),休息片段、休息持续时间减少(P<0.05,P<0.01)。模型组大鼠结肠组织黏膜层内可见大量炎性细胞浸润,且肠腺厚度变薄,溃疡严重;标本配穴组大鼠结肠组织肠腺结构基本完整,杯状细胞数量较丰富,中度溃疡。与对照组比较,模型组共筛选出差异代谢物有123个;与模型组比较,标本配穴组共筛选出差异代谢物有57个。利用KEGG富集分析得出模型组与对照组有6条差异代谢通路,标本配穴组与模型组比较有8条差异代谢通路,均包含花生四烯酸代谢通路。结论:花生四烯酸代谢通路可能是标本配穴防治IBS的潜在生物标记物和潜在靶点。

“标本配穴”针灸对腹泻型肠易激综合征模型大鼠心率变异性及结肠SP表达的影响

目的观察标本配穴针灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠心率变异性(HRV)及结肠P物质(SP)表达的影响。方法将40只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、标本配穴组与常规配穴组,每组10只。除正常组外,其余三组采用急-慢性的应激刺激结合番泻叶灌胃的方法来制备IBS-D大鼠模型,待模型建立成功后进行针灸治疗。观察各组大鼠体重变化,并进行水迷宫行为学检测,通过电生理记录仪采集心电图并分析HRV,透射电镜观察结肠组织超微结构,Western blot法和免疫荧光法检测大鼠结肠组织SP的表达。结果与模型组相比,两针灸治疗组大鼠体重增加(P<0.01)、水迷宫实验逃避潜伏期、目标象限探索时间和平台跨越次数均显著好转(P<0.05),HRV的时域指标明显升高(P<0.05),结肠超微结构明显改善,结肠组织中SP的表达显著降低(P<0.01),且标本配穴组的影响效果更显著。结论标本配穴针灸治疗可以有效调节IBS-D大鼠的HRV及结肠组织中SP的表达,从而达到防治IBS-D的效用。

“标本配穴”电针调控脂肪组织自噬改善肥胖大鼠炎症

目的观察“标本配穴”电针对高脂饮食诱导的肥胖模型大鼠脂肪组织炎症及自噬功能的影响。方法40只雄性Wistar大鼠随机选取6只作为正常组,其余大鼠给予高脂饲料建立肥胖模型。将模型建立成功的大鼠随机分为模型组、电针组、假电针组三组,每组各6只。电针组大鼠选取“中脘”“关元”“足三里”“丰隆”每日电针10 min,每周治疗3次,总疗程为8周;假电针组给予电针组同样针刺治疗,但不接电针。治疗结束后测量各组大鼠体质量、Lee’s指数;全自动生化仪检测各组大鼠总胆固醇(TG)、甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;ELISA法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-6、IL-10)水平;HE染色观察各组大鼠脂肪组织形态变化;Western blot检测各组大鼠脂肪组织自噬相关蛋白p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1表达水平。结果标本配穴电针能显著减低肥胖大鼠体质量、Lee’s指数(P<0.05),显著降低TG、TC、LDL-C水平(P<0.05),减小脂肪细胞体积,降低脂肪组织中炎症因子TNF-α、IL-6水平(P<0.05),下调脂肪组织中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1蛋白的表达(P<0.05),显著提高HDL-C、IL-10水平(P<0.05),上调p62蛋白的表达(P<0.05)。结论标本配穴电针可能是通过降低脂肪组织自噬水平,从而降低大鼠全身炎症状态,发挥改善肥胖症状的作用。

标本配穴电针干预对慢性心肌缺血模型大鼠凋亡相关蛋白表达与线粒体超微结构的影响

目的:观察标本配穴电针治疗对慢性心肌缺血模型大鼠凋亡相关蛋白表达及线粒体超微结构的效应及机制。方法:将70只SPF级Wistar雄性大鼠根据随机数字表法分为7组。采用盐酸异丙肾上腺素(ISO)注射制作慢性心肌缺血模型,LY294002组和IGF-1组分别加注LY294002和IGF-1溶液,所有针刺组在造模前进行电针针刺预处理。最后检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的表达及心肌线粒体超微结构的变化。结果:各组大鼠心肌组织内凋亡相关蛋白表达相比正常组均有不同程度升高(P<0.01),且心肌超微结构有不同程度损伤。与模型组比较,标本配穴组Caspase-3、Caspase-9、Bax均有明显下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01)。经电针治疗后,标本配穴组与IGF-1组心肌线粒体损伤程度一致明显改善,且优于内关组。结论:"标本配穴"电针治疗可调节凋亡相关蛋白的表达,减轻心肌线粒体结构损伤,其调节过程及机制有可能通过PI3K/Akt信号通路来实现其保护心肌细胞的腧穴协同作用。

标本配穴电针治疗对慢性心肌缺血模型大鼠心肌梗死面积与细胞凋亡指数的影响

目的观察标本配穴针刺治疗对慢性心肌缺血大鼠心肌梗死面积及心肌细胞凋亡的影响,探讨其保护作用及机制。方法将70只SPF级Wistar雄性大鼠根据随机数字表法分为7组,每组10只。采用腹部皮下注射ISO制作心肌缺血模型。LY294002组和IGF-1组分别在造模当日给予LY294002溶液和IGF-1溶液注射,所有针刺组在造模前进行电针针刺预处理。试验结束后采用Evans Blue-TTC双染法检测心肌梗死面积指标IS/LV(梗死心肌面积/左心室心肌)和ARR/LV(危险心肌/左心室心肌),TUNEL技术测定心肌细胞AI(凋亡指数)。结果其他各组IS/LV、ARR/LV和AI均比正常组相明显增高,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。IGF-1组、内关组和标本配穴组IS/LV、ARR/LV和AI均比模型组有所下降,差异有显著性意义(P<0.01);LY294002组和标本配穴+LY294002组的IS/LV、ARR/LV和AI明显升高,差异有统计学意义(P<0.01或<0.05)。IGF组IS/LV、ARR/LV和AI比标本配穴组有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05);内关组、LY294002组和标本配穴+LY294002组的IS/LV、ARR/LV和AI高于标本配穴组,差异有显著性意义(P<0.01)。结论标本配穴电针治疗在对大鼠慢性心肌缺血梗死面积及细胞凋亡的改善作用上优于单取内关穴,其作用机制有可能是通过激活PI3K/Akt通路起到保护心肌的作用。

“标本配穴”电针对慢性心肌缺血大鼠心电保护效应及代谢组学的影响

目的:观察"标本配穴"电针对慢性心肌缺血大鼠心电图ST段振幅、心肌组织及血清标志代谢物的影响,探讨"标本配穴"电针对慢性心肌缺血大鼠心电活动的保护效应及可能调控的代谢途径。方法:将45只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、电针组,每组15只。连续7d皮下注射盐酸异丙肾上腺素(5mg/kg)制备慢性心肌缺血大鼠模型。电针组大鼠自造模之日起予电针干预"内关""足三里""关元",疏密波,频率2Hz/100Hz,电流强度1mA,每次10min,每日1次,连续21d。分别于造模前、造模后、干预后对大鼠进行心电图检测,HE染色法观察心肌组织结构变化,核磁共振质谱技术检测代谢物信息,利用偏最小二乘分析(PLS-DA)判别大鼠血清代谢组学的特点及其生物标记物。结果:在造模后,模型组、电针组大鼠心电图ST段振幅均高于正常组(P<0.01),且电针组低于模型组(P<0.01);干预后电针组大鼠心电图ST段振幅较造模后降低(P<0.05),明显低于模型组大鼠心电图ST段振幅(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠心肌组织结构破坏明显,出现坏死、水肿等变化;与模型组比较,电针组心肌组织结构损伤程度明显减轻。PLS-DA得分图横坐标上空白组和电针组轮廓接近,葡萄糖、乳酸、肌酸、乙酸、3-羟基丁酸是潜在的代谢差异生物学标志物质(VIP>1)。结论:"标本配穴"电针干预可以预防或降低缺血对大鼠心肌造成的损伤,其可能主要通过糖、脂代谢及能量代谢来对心肌缺血大鼠进行调控。

基于SIRT1/PGC-1α信号通路探讨“标本配穴”电针对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

目的:观察“标本配穴”电针通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)信号通路对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏线粒体氧化应激损伤的保护作用。方法:Wistar大鼠随机分为正常组10只、模型组12只和电针组11只。采用高糖高脂饮食喂养6周联合链脲佐菌素注射法建立DN大鼠模型。电针组予“足三里”“关元”“丰隆”“中脘”电针治疗,15 min/次,隔日1次,连续8周。检测并记录各组大鼠体质量、空腹血糖(FBG)、24小时尿蛋白定量(24-h UP);免疫比浊法检测血清糖化血红蛋白(HbA1c)水平;苦味酸法和脲酶法检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;全自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;黄嘌呤氧化法、二硫代二硝苯甲酸法、钼酸铵法检测肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)活性;硫代巴比妥钠法检测肾脏组织丙二醛(MDA)含量;苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸希夫(PAS)染色、马松(Masson)染色观察肾脏组织病理学改变;透射电镜观察肾组织超微结构;荧光定量PCR法、Western blot法检测大鼠肾脏组织中SIRT1、PGC-1αmRNA和蛋白表达;免疫组织化学法检测肾脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;免疫荧光染色法检测肾脏组织中胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)、胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)、纤维连接蛋白(FN)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠FBG、24-h UP显著升高(P<0.01),体质量显著降低(P<0.01);血清中HbA1c、BUN、Scr、TG、TC、LDL-C含量显著升高(P<0.01),HDL-C含量显著降低(P<0.01);肾脏组织中SOD、GSH、CAT活性显著降低(P<0.01,P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.01);肾脏组织中SIRT1、PGC-1αmRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),α-SMA、ColⅠ、ColⅣ、FN蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组FBG、24-h UP显著降低(P<0.05,P<0.01),体质量显著升高(P<0.05);血清中HbA1c、BUN、Scr、TG、TC、LDL-C含量显著降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C含量显著升高(P<0.05);肾脏组织中SOD、GSH、CAT活性显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.01);肾脏组织中SIRT1、PGC-1αmRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),α-SMA、ColⅠ、ColⅣ、FN蛋白表达显著降低(P<0.01)。模型组HE染色显示肾组织系膜扩张、肾小球肥大、系膜基质聚集,PAS染色显示肾小球细胞外基质沉积,Masson染色显示肾小球纤维化增强、间质间隙扩大,电镜显示肾组织出现足突融合、基底膜增厚、细胞器损伤;电针组上述损伤均有不同程度减轻。结论:“标本配穴”电针可能通过激活SIRT1/PGC-1α信号通路减轻肾脏氧化应激和线粒体功能障碍,改善DN大鼠肾组织纤维化。