Application of CD45/SSC Gating Multiparameter Flow Cytometry in the Classification of Acute Leukemia——An Analysis of 139 Cases

In order to study the significance of flow cytometry immunophenotyping in the diagnosis of acute leukemia, CD45/SSC gating multiparameter flow cytometry (FCM) was utilized to analyze the immunophenotypes of 139 cases of acute leukemia. 139 cases of acute leukemia were enrolled in our hospital from April 1998 to April 2000. Morphological analysis and FCM immunophenotypic tests were conducted on all cases. Our results showed that CD45/SSC gating multiparameter flow cytometry immunophenotyping could reflect the origin of leukemic cells specifically. It is one of the important methods for the diagnosis of ALL, AML, and HAL. CD45/SSC gating multiparameter FCM analysis is a good technique for immunophenotyping. FCM immunophenotypic analysis can help improve the diagnosis and classification of acute leukemia, and extend the use of FCM in clinical practice.

多参数流式细胞术检测急性白血病患儿CD14表达的意义

为了探讨CD14在小儿白血病中的表达及其在白血病诊断和鉴别诊断中的意义 ,本文采用CD45/SSC多参数散点图设门多色流式细胞术分析158例小儿急性白血病 (AL)患儿白血病细胞的CD14及其它白血病相关抗原的表达情况。结果 :158例中有9例 (5.7 %)表达CD14,且均为急性髓系白血病 (AML)。CD14在M4/M5患儿中的阳性率明显高于非M4/M5患儿 (P<0.01) ;M4和M5b患儿CD14的阳性率明显高于M2及M5a(P均<0.01);CD11b在M2的阳性率 (6/20例,30 %)明显低于M5(7/9例,77.8 % ,P<0.05) ;CD15在M5a的阳性率明显低于M5b (P<0.05)、M2 (P<0.01)及M4 (P<0.05)。在AML组中 ,CD14的表达与CD11b、CD15呈正相关 (P均<0.01)。提示CD14有助于淋巴系白血病、髓系白血病及单核细胞相关性白血病 (MLIL)的诊断与鉴别诊断 ,其对单核细胞相关性白血病免疫分型诊断中的特异性为100% ,敏感性为64.3 %。CD14和CD15有助于M5亚型的区分及M2与M5a、M2与M4的鉴别诊断 。

儿童急性髓系白血病早期流式微小残留病检测与预后相关性的临床研究

目的:探索应用多参数流式细胞术(MFC)监测儿童急性髓系白血病(AML)诱导化疗后骨髓微小残留病(MRD)对预测预后的价值。方法:回顾性分析2015年8月-2022年12月武汉儿童医院血液科97例初诊AML患儿接受诱导化疗第Ⅰ周期和第Ⅱ周期后采用MFC检测骨髓MRD的结果,并分析其与预后的相关性。结果:97例AML患儿诱导治疗Ⅰ后57名患儿MRD阳性(MRD1^(+),58.8%),诱导治疗Ⅱ后仍有19名患儿MRD阳性(MRD2^(+),19.6%)。Kaplan-Meier生存分析结果显示37例(64.9%)MRD1^(+)接受移植治疗患儿预计3年总生存(OS)率明显高于20例(35.1%)未接受移植治疗患儿(84.6%vs 40.0%,P=0.0001)。35例MRD1^(+)MRD2^(-)患儿中,接受移植的25例患儿3年OS率高于10例未移植患儿(87.2%vs 70.0%,P=0.3229)。19例MRD1^(+)MRD2^(+)患儿3年OS率低于35例MRD1^(+)MRD2^(-)患儿(57.4%vs 81.8%,P=0.059)。12例MRD2^(+)移植治疗患儿3年OS率高于MRD2+7例未移植患儿(80.8%vs 14.3%,P=0.0007)。12例MRD1^(+)MRD2^(+)移植患儿和25例MRD1^(+)MRD2-移植患儿3年OS差异无统计学意义(80.8%vs 87.2%,P=0.8868)。7例MRD1^(+)MRD2^(+)未移植患儿3年OS明显低于10例MRD1^(+)MRD2^(-)未移植患儿(14.3%vs 70.7%,P=0.0114)。进一步多因素分析结果显示MRD2^(+)和移植治疗是患儿预后的独立影响因素(P=0.031,0.000),MRD1^(+)对预测97例患儿总体生存无统计学差异(P=0.902)。结论:诱导化疗Ⅱ后MRD阳性是AML患儿预后不良的独立危险因素。MRD2^(+)预示着更差的预后,可筛选出需接受移植的患儿。MRD2^(+)不是患儿移植治疗禁忌症尽早移植明显改善高危患儿的预后。

多参数流式细胞技术分析髓系白血病细胞相关免疫表型

目的 探讨常见的急性髓系白血病细胞相关免疫表型,并阐述其在临床中的应用价值。方法 应用多参数流式细胞技术分析47例急性髓系白血病(AML)患者骨髓标本中白血病细胞相关免疫表型,并对其免疫分型结果与治疗、预后的相关性进行统计分析,进而探讨AML免疫分型在临床中的应用。结果 47例AML患者阳性高表达的髓系抗原有CD33(93.62%)、CD13(89.36%)、MPO(89.36%)、CD117(82.98%)、CD64(38.30%);造血干/祖细胞CD分子阳性表达以CD38(93.62%)、CD34(65.96%)、HLA-DR(51.06%)为主;其他抗原以CD56(48.94%)、CD7(23.40%)、CD19(19.15%)为主。经相同时间治疗后,23例(48.94%)AML患者病情得到完全缓解,患者阳性表达T细胞系抗原CD7的完全缓解率显著低于阴性患者(P<0.05)。6例(26.09%)患者在1 a内复发,没有任何一种抗原表达情况与之有关(P>0.05)。随访结束后,有26例(55.32%)患者死亡,阳性表达NK细胞系抗原CD56和T细胞系抗原CD7患者的死亡率显著性高于阴性表达的患者,阳性表达B细胞系抗原CD19的患者死亡率显著性低于阴性表达的患者(P<0.05),幼稚标志与成熟标志不同步的患者死亡率高于幼稚标志与成熟标志同步的患者(P<0.05)。结论 髓系抗原CD33、CD13、MPO、CD117、CD64是AML诊断中可靠的抗原标志物,AML患者的免疫分型结果可为临床医生确定治疗方案和判断预后提供参考。

67例儿童急性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的探讨儿童急性白血病流式细胞术(flow cytometry)免疫分型的特点。方法选择67例儿童急性白血病,采用CD45/SSC双参数散点图设门法流式细胞术进行急性白血病免疫表型检测,分析儿童急性白血病细胞的抗原表达规律。结果①FAB分型与免疫分型相符率为92.5%(62/67)。②B细胞系列急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中CD19敏感性最高,HLA-DR、cCD79a特异性强。T细胞系列急性淋巴细胞白血病(T-ALL)中cCD3、CD7敏感性最高,cCD3特异性强。③急性髓细胞白血病(AML)中CD117、CD13、CD33敏感性高,CD117、cMPO的髓系特异性强。④急性淋巴细胞白血病(ALL)中伴髓系抗原表达(My+-ALL)占50.0%,主要表达的髓系抗原为CD33、CD13。AML中伴淋系抗原表达(Ly+-AML)占35.0%,主要表达的淋系抗原为CD7。结论①免疫学分型弥补了FAB分型的不足,更能反映白血病细胞的异质性,提高了诊断的准确性。②儿童B-ALL最具有诊断价值的抗原是CD19、HLA-DR、cCD79a,T-ALL最具有诊断价值的抗原是cCD3、CD7。My+-ALL主要表达的髓系抗原为CD33、CD13。③儿童AML最具有诊断价值的抗原为CD117、CD13、CD33,而CD117的髓系特异性优于CD13、CD33,是鉴别ALL、AML的重要标志,Ly+-AML主要表达的淋系抗原为CD7。

急性白血病各亚型共刺激分子CD_(80)和CD_(137)L的表达特点

目的 :研究急性白血病 (AL)各亚型肿瘤细胞表面共刺激分子CD80 (B7 1)和CD137L(4 1BBL)的表达特点及其在急性白血病发病学和治疗学中的重要作用。方法 :应用流式细胞术 (FACS)检测了 5 0例AL患者 (其中ANLLM18例 ,M2 11例 ,M37例 ,M4 3例 ,M510例 ,M6 2例 ,ALL 9例 )肿瘤细胞表面两种重要的共刺激分子CD80 和CD137L的表达。结果 :1)所有病例中 ,CD80 和CD137L的表达倾向相同 ,即单核细胞起源之AL表达阳性率最高 (4 0 % ;5 0 % ) ,粒细胞起源之最低 (0 ;0 ) ,淋巴细胞起源之属中(11% ;11% ) ;CD137L表达稍高于CD80 ,但差异无显著意义 ,P >0 0 5 ;2 )同一病例CD80 和CD137L的表达不尽相同 ,即同一白血病标本中不存在二者同时表达阳性。结论 :AL细胞表面CD80 和CD137L的共表达是激活T细胞介导的抗肿瘤免疫反应所必需的 ,其缺陷是急性白血病尤其是急性髓性白血病 (AML)细胞逃避宿主免疫监视的重要原因 。

流式细胞术监测儿童急性B-淋巴细胞白血病微小残留病的临床价值

目的:探讨流式细胞术检测微小残留病(MRD)对判断儿童B淋巴细胞白血病(B-ALL)的预后价值。方法:回顾性分析2011年7月至2014年6月在我院初诊的196例B-ALL患儿,通过流式细胞术监测以上患儿诱导化疗第15天、第33天、第12周的骨髓MRD。结果:MRD阳性组中中危和高危分型的比例明显高于标危组,差异有统计学意义(P<0.05);分析各时间点MRD,显示MRD水平越高,患儿的复发率越高,3年EFS越低。其中第15天MRD≥10^(-2)组、第33天MRD≥10^(-4)、第12周MRD≥10^(-3)组的患儿预后不佳;经多因素分析显示,第12周MRD≥10^(-3)为独立的预后不良因素。结论:流式细胞术检测MRD对儿童B-ALL具有重要的临床预后判断意义;需动态监测MRD,第15天MRD≥10^(-2)、第33天MRD≥10^(-4)、第12周MRD≥10^(-3)的患儿预后不佳,需调整危险分层及化疗强度;第12周MRD≥10^(-3)为独立的预后不良因素。

急性白血病细胞膜和细胞质抗原的流式细胞术检测

目的应用流式细胞仪检测急性白血病(AL)患者细胞膜及细胞质抗原,探讨其在白血病免疫分型中的作用。方法采用三色直接免疫荧光法检测290例AL患者16种膜抗原及3种细胞质抗原表达。结果134例急性髓细胞白血病(AML)中以CD13(89.6%)、CD33(77.6%)表达为主,髓过氧化物酶(MPO)表达也较高,占99.25%;125例B系列急性淋巴细胞白血病(B-ALL)主要表达CyCD79a(97.6%)、CD19(84%)、CD22(84%)、CD10(68.8%);31例T系列急性淋巴细胞白血病(T-ALL)以CyCD3(96.8%)、CD2(71%)、CD3(80.6%)、CD5(87.1%)、CD7(83.9%)为主。CD34在AML组表达47%,急性淋巴细胞白血病(ALL)组62.8%;ALL组髓系抗原表达以CD13、CD33多见;AML组淋系抗原表达以CD7多见。结论利用流式细胞仪进行细胞膜、细胞质抗原检测对AL的诊断分型有重要价值。

45例儿童急性淋巴细胞性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的研究儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫表型的特点。方法采用流式细胞仪对45例初治儿童急性淋巴细胞性白血病进行免疫表型分析。结果①45例ALL中T淋巴细胞性ALL(T-ALL)5例(11.1%),B淋巴细胞性ALL(B-ALL)36例(79.9%);ALL1型(L1)9例(20%),ALL2型(L2)27例(60%),ALL3型(L3)5例(11.1%);②45例ALL中4例符合急性混合性白血病(HAL)的诊断标准(8.9%),25例(55.6%)为髓系抗原阳性的ALL(My+ALL),其中CD13阳性率最多,为44.4%(20例),CD33为22.2%(10例),CD15为22.2%(10例)。B-ALL中My阳性率为55.6%,T-ALL中My阳性率为20%,有明显差异;L1中My阳性率为22.2%(2/9),L2中My阳性率为70.4%(19/27),L3中My阳性率为40%(2/5),L2中My阳性率明显高于L1和L3(P<0.05)。结论结合免疫表型分析与细胞形态学检验能为儿童急性淋巴细胞性白血病的诊断提供更可靠和更有价值的分型依据。

急性髓细胞性白血病细胞表面CD分子表达及临床意义研究

目的探讨急性髓细胞性白血病(AML)细胞表面CD分子的表达情况。方法采用CD45分子作为靶目标抗原,应用多参数流式细胞术检测300例AML患者细胞表面的CD分子,分析患者的免疫表型。结果以表达百分比﹥20%作为阳性,300例AML患者的CD抗原表达均不相同,cyt-MPO、CD33、CD117和CD38表达最强,为强阳性(80%~100%)。以CD抗原表达>60%为阳性,结果显示:CD33、CD117、CD13、cyt-MPO四种抗原阳性表达的患者,阳性细胞所占的比例高于其他抗原,差异有统计学意义(P﹤0.05)。CD15/CD64、CD15/CD33和CD33/CD64抗原的阳性表达比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);CD33/cyt-MPO抗原的阳性表达比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论 AML细胞表面的CD抗原表达具有差异性,CD13、cyt-MPO、CD33、CD117呈高表达。CD分子在AML细胞中阳性表达的差异性可为治疗提供有价值的线索。

儿童急性白血病骨髓单个核细胞内细胞因子与其病理变化关系及临床意义

目的研究儿童急性白血病(AL)骨髓单个核细胞内IL-3、GM-CSF、TNFα和TGFβ1的表达与白血病细胞增殖、分化与病理变化的关系,并观察上述细胞因子在治疗过程中变化的临床意义。方法抽取43例AL患儿在诱导缓解化疗前、化疗后、缓解及复发时骨髓,提取单个核细胞,用免疫荧光流式细胞术检测其细胞内上述细胞因子的表达,同期还以32例非AL患儿骨髓作对照研究。结果无论是急性淋巴细胞白血病(ALL)还是急性髓性白血病(AML),化疗前骨髓单个核细胞内IL-3和GM-CSF的表达均高于对照组(P<0.01),而在TNFα和TGFβ1的表达均低于对照组(P<0.01)。化疗后缓解患儿IL-3和GM-CSF的表达与化疗前比较均有所下降(P<0.01),与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),TNFα和TGFβ1的表达与化疗前比较均有所上升(P<0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后未缓解和复发患儿IL-3和GM-CSF的表达均高于对照组(P<0.01),且TNFα和TGFβ1的表达均低于对照组(P<0.01)。结论AL患儿骨髓单个核细胞内IL-3和GM-CSF的表达较多,TNFα和TGFβ1的表达较少,与骨髓白血病细胞增殖失控、分化障碍所产生的病理变化有关。在治疗儿童AL时,骨髓单个核细胞内IL-3、GM-CSF、TNFα和TGFβ1可作为病情转归的参考指标。

流式细胞术在急性淋巴细胞性白血病微小残留病检测中的应用

目的 用流式细胞术检测急性淋巴细胞性白血病 (ALL)患者的微小残留病 (MRD) ,为临床MRD的检测提供科学依据 ,并在此基础上 ,探讨MRD的临床意义。方法 3 3例初发白血病患者均接受 4～ 6周诱导化疗 ,获得完全缓解后 ,进行巩固化疗。在诱导化疗结束时 ,巩固化疗第 12、2 4、3 6周 ,应用流式细胞仪 (FCM)以ALL患者白血病细胞的特异分化抗原为标志监测MRD。结果 初诊时FCM检测 3 3例患者骨髓均有淋巴系分化抗原表达 ,在诱导化疗结束时 ,巩固化疗第 12、2 4、3 6周 ,FCM检测MRD检出率分别为 42 4%、3 1 3 %、13 8%、12 5 %。在按年龄 (以 18岁为界 )、性别、初发病时白细胞计数 (5 0×10 9/L为界 )、Ph染色体、My表达、CNSL等因素分别分组中 ,各个时间段MRD的检出率均无差别。MRD阳性及白细胞计数大于 5 0× 10 9/L(P <0 10 )为复发的高危因素。结论 ①白细胞分化抗原可作为免疫学标志用FCM方法检测ALL患者的MRD。②MRD与临床复发高度相关。③MRD可能为ALL患者一个独立的预后不良的因素。

儿童急性淋巴细胞性白血病细胞中细胞周期相关因子Cdt1的表达

目的研究细胞周期相关因子Cdt1在儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)细胞中的表达。方法以15例首次确诊的儿童ALL为实验组,以10例同期住院非肿瘤患者作为对照组,应用流式细胞术检测实验组治疗前、后及对照组细胞中Cdt1表达水平,并进行比较。结果儿童ALL治疗后(3.56±2.43)与治疗前(4.12±2.47)比较Cdt1表达明显下降(P<0.01);儿童ALL治疗前Cdt1表达显著高于对照组(2.33±1.32,P<0.05);儿童ALL治疗后与对照组比较Cdt1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论Cdt1可能参与儿童ALL的发生发展。可以通过监测ALL治疗前、后细胞中Cdt1表达水平,判断疗效。

流式细胞术在急性白血病免疫分型中的应用探讨

目的应用多参数流式细胞术检测急性白血病细胞表面CD抗原分子的表达水平,探讨AML和ALL中CD抗原的表达规律,为临床个体化治疗累积分子机制研究材料。方法应用流式细胞术检测44例急性髓细胞白血病患者和18例急性淋巴细胞白血病患者,以CD45/SSC设门,应用13种单克隆抗体对CD45弱表达的细胞群进行免疫分型,测定多种CD分子的表达率,并通过χ~2检验比较不同的高表达CD分子的相关性。结果 44例AML患者中表达且高表达CD33(79.6%),CD38(70.5%),CD117(52.3%),cyt-MPO(50.0%);16例B-ALL患者中CD10(75.0%),CD19(81.25%)以及CD22(81.25%)阳性表达率较高;比较AML患者高表达CD抗原,结果显示CD33/CD38、CD33/cyt-MPO的抗原表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论不同的CD分子在急性白血病细胞上表达有差异性,或将为靶向治疗和临床个体化治疗提供有用的线索。

儿童与成人急性B淋巴细胞白血病免疫表型的差异分析

目的 探讨儿童与成人急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)免疫表型的差异,为临床制定合适的治疗方案提供依据。方法 选择行白血病免疫分型检测的B-ALL患者190例作为研究对象,其中儿童98例和成人92例。应用流式细胞术检测初诊儿童和成人患者骨髓标本,进行免疫表型检测,分析抗原表达情况。结果 在B-ALL免疫分型分类中,普通B-ALL(Com-B-ALL)和前B-ALL(Pre-B-ALL)类型儿童与成人患者所占比例相比,差异无统计学意义(P>0.05);早前B-ALL(Pro-B-ALL)类型患者中儿童所占比例(2.04%)低于成人(9.78%),差异有统计学意义(P<0.05);在全部的B-ALL患者中,B系抗原CD19阳性率最高,儿童与成人均为100.00%,其次为CD22(儿童100.00%、成人98.91%)、cyCD79a(儿童100.00%、成人96.74%);儿童与成人B-ALL患者CD20(30.61%和34.78%)、CD22(100.00%和98.91%)、cyIgM(23.47%和17.39%)、cyCD79a(100.00%和96.74%)、cTdT(94.90%和90.22%)、HLA-DR(97.96%和98.91%)、CD38(98.98%和96.74%)、CD13(20.41%和19.57%)、CD117(2.04%和0.00%)阳性率相当,差异无统计学意义(P>0.05);儿童B-ALL的CD10阳性率(97.96%)高于成人患者(88.04%),CD34、CD33、CD15阳性率(70.41%、15.31%、3.06%)低于成人患者(84.78%、30.43%、10.87%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 儿童与成人B-ALL存在特异性免疫表型特点,有助于临床预测疾病预后,展开更具针对性的治疗。

t(8;21)急性髓系白血病的免疫表型特点

目的 研究用流式细胞术免疫表型分析t(8;2 1) (q2 2 ;q2 2 )急性髓系白血病 (AML)的免疫表型特点。方法 采用常规细胞形态学 /细胞化学、流式细胞术间接免疫荧光标记技术和R显带核型分析 (MIC)进行分型 ,部分加用RT PCR检测AML1/ETO融合基因。结果 ① 2 94例初治AML患者中 ,6 4例t(8;2 1)AML ,占 2 1.8% ,在M2 中高达 5 4.7%。 6 4例t(8;2 1)AML中M2 占 81.3% ;②与对照组比较 ,t(8;2 1)AML高表达CD19和CD3 4,低表达CD3 3 (P <0 .0 0 1) ;③以 2 0 %阳性细胞作为阳性标准 ,CD19阳性率在AML为 13.6 % (2 94例中 40例 ) ,t(8;2 1)AML为 5 0 % (6 4例中 32例 ) ,显著高于无t(8;2 1)AML组的 3 5 % (2 30例中 8例 ) (P <0 .0 0 1) ;④在t(8;2 1)AML患者中 ,CD19+ 和 (或 )CD3 4+ 5 8例 (90 .6 % )、CD19-和 (或 )CD3 4-6例 (9.4% )。结论 t(8;2 1)AML特别是M2 /t(8;2 1)高表达CD19与CD3 4,CD19与t(8;2 1)密切相关 ,CD19是预测t(8;2 1)

CD_(45)单抗在急性白血病免疫分型中的作用

目的 :探讨 CD45设门在急性白血病免疫分型中的可行性和实用价值。方法 :采用CD45单抗直接免疫荧光标记和流式细胞仪对 3 2名健康人外周血白细胞及 5 6例急性白血病患者骨髓中的细胞进行了检测和分析。结果 :淋巴细胞门内 ,正常对照组相对急性白血病患者组 CD45-F ITC阳性细胞的百分比和平均荧光道数值分别为 (x± s) :(99.1± 0 .5 ) %对 (85 .2± 4.3 ) % (P<0 .0 5 )和 3 1.66±8.47对 2 .46± 1.0 7(P<0 .0 0 1) ;CD45-PE为 (99.3± 0 .7) %对 (90 .2± 6.6) % (P<0 .0 5 )和 10 6.99±2 5 .94对 13 .86± 9.5 1(P<0 .0 0 1)。急性白血病患者的原始幼稚细胞与外周血白细胞 1∶ 10 0 0混合稀释后 ,CD45/SSC参数图上 ,可清楚地对原始幼稚细胞设门。结论 :利用 CD45设门方法 ,能简单、快速、准确地识别混在外周血中的少量原始幼稚细胞 ,敏感度高达 10 -3 。

儿童急性白血病免疫分型特点分析

目的探讨多色流式细胞术在儿童急性白血病(AL)免疫分型中的应用价值,对AL各抗原表达规律、分布情况进行分析。方法选取2012年10月至2013年12月厦门大学附属第一医院40例初发儿童AL患者,采用流式细胞术直接或间接免疫荧光法检测CD13、CD14、CD33、CD117、CD56、CD15、CD2、CD3、CD5、CD7、CD10、CD19、CD20、CD22、CD79a、CD34、HLA-DR等细胞表面抗原的表达。对40例儿童AL进行免疫表型分析。结果 40例儿童白血病经免疫学分型检测,急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)占65﹪(26/40),急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)占7.5﹪(3/40),急性髓系白血病(AML)占22.5﹪(9/40),急性混合性白血病占2.5﹪(1/40),未分化型1例,占2.5﹪。ALL中,髓系相关抗原阳性率为51.7﹪,分别为CD13(13/29)、CD15(5/29)、CD33(4/29)。AML中,22.2﹪有淋系抗原表达,以CD7阳性率最高。CD117在AML中表达率为44.4﹪(4/9),在ALL中未检测到。B-ALL中CD19表达率为100﹪,CD22表达率为92.3﹪,敏感性最高。结论应用多色流式细胞术可弥补法、美、英分型系统分型的不足,提高AL诊断分型的准确性,尤其是对于混合型白血病及抗原交叉表达者更有意义。

儿童急性B淋巴细胞白血病外周血Treg和Th17细胞比值的平衡关系研究

目的探讨急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿外周血中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)的表达情况及其比值变化规律。方法选取2017年2月至2019年10月首都儿科研究所附属儿童医院初发急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿54例为研究对象,年龄4.9(3.1,7.4)岁。分为治疗前组和治疗后组,治疗后根据疾病转归分为完全缓解组45例,复发/难治组9例,选取20名查体儿童为对照组。运用流式细胞术(FCM)分别检测B-ALL患儿治疗前后和查体儿童外周血中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞和Th17细胞占CD4^(+)T细胞的比例,并计算Treg/Th17细胞比值。在治疗前后分别比较复发/难治组、完全缓解组和对照组之间Treg、Th17细胞比例及Treg/Th17比值。分别比较完全缓解组和复发/难治组同一患儿治疗前后检测指标差异。结果B-ALL患儿治疗前,复发/难治组和完全缓解组外周血Treg细胞比例(分别为6.11±0.48,6.20±1.16)高于对照组(4.89±1.46),Treg/Th17细胞比值(分别为8.34±2.14,5.91±1.92)高于对照组(3.55±1.68),复发/难治组外周血Treg/Th17细胞比值高于完全缓解组,其差异均有统计学意义(P<0.05)。B-ALL患儿治疗后,复发/难治组外周血Treg细胞比例(6.09±0.80)高于完全缓解组(5.25±0.87)及对照组(4.89±1.46),Treg/Th17细胞比值(7.37±1.19)高于完全缓解组(4.22±1.50)及对照组(3.55±1.68),其差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,完全缓解组患儿外周血Treg细胞比例及Treg/Th17细胞比值均低于治疗前,Th17细胞比例(1.38±0.49)高于治疗前(1.14±0.39),其差异均有统计学意义(P<0.05)。复发/难治组外周血Treg细胞及Treg/Th17细胞比率与治疗前比较,其差异均无统计学意义(P>0.05)。结论B-ALL患儿外周血存在CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞升高和Th17细胞比例降低所致的Treg/Th17细胞比值改变,随疾病的缓解而趋于正常。定期检测Treg细胞及Th17细胞比例有助于对B-ALL患儿进行免疫状态监测及预后判断,可能为B-ALL的免疫治疗提供依据。

急性B淋巴细胞白血病儿童化疗后微小残留病灶免疫表型改变的分析

目的:分析儿童急性B淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)化疗过程中首次微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)免疫表型的变化规律及特点,为临床诊断及后续微小残留病的监测提供依据。方法:回顾性分析我院2013年1月至2018年4月收治的393例B-ALL患儿的免疫分型结果及诱导化疗第15天首次MRD数据。结果:(1)在393例白血病中,B-ALL相关特征性免疫表型的出现频率为:CD19+/CD10+/34+64.4%;CD19+/CD10+/34部分表达,15.5%;CD19+/CD34+/CD20+,58.5%;CD19+/CD10+/CD13+,13.2%;CD19+/CD10+/CD33+,5.9%;CD19+/CD10+/CD117+,0.7%;CD19+/CD10+/CD123+,50.1%;CD19+/CD10-/34±,5.9%;CD19+/CD10-/CD20-,2.5%;CD34bright,12.2%;(2)共有285例首次MRD检测结果呈阳性,有181例(63.5%)MRD检测结果至少有1个抗原荧光强度发生改变,其中出现一个抗原强度变化的为83例(29.1%),2个抗原荧光强度变化的为57例(20.0%),3个抗原荧光强度变化为31例(10.9%),4个及4个以上抗原荧光强度变化为10例(3.5%)。抗原荧光强度变化频率最高的依次为CD45、CD34、CD20;(3)共有7例患儿复发,复发时行免疫分型检测,其中4例与初发时有抗原荧光强度变化。结论:(1)儿童B-ALL远高于其他白血病类型,且具有独特的相关特征性免疫表型。初发B-ALL免疫分型结果不仅可完善白血病MICM分型,更是化疗后MRD监测的线索及客观依据;(2)在儿童B-ALL化疗过程中,免疫表型极有可能会发生变化,在后续的微小残留病灶检测过程中应注意对变化抗原的判断和追踪。