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Adaptor Protein Crk is Implicated in Mucus Formation in Mucinous Epithelial Ovarian Cancer (mEOC) Cells MCAS
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作者 徐冬梅 令狐华 +2 位作者 Masumi Tsuda Shinya Tanaka Kazuo Nagashima 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2008年第2期121-125,共5页
Objective: The mucus production is an indicator for the histological grade of mucinous epithelial ovarian cancer (mEOC). In our previous study, Crk expression was targeted in the human ovarian mucinous adenocarcino... Objective: The mucus production is an indicator for the histological grade of mucinous epithelial ovarian cancer (mEOC). In our previous study, Crk expression was targeted in the human ovarian mucinous adenocarcinoma cell line MCAS through RNA interference, resulting in the establishment of Crk knock down cells. These cells exhibited decreased tumorigenic potential both in vitro and in vivo. The purpose of this study was to investigate if there is any change in the capability of forming mucus in these Crk knock down cells. Methods: Cytoplasmic periodic acid Schiff (PAS) staining and particle excluding assay were conducted to assess the mucus formation within and around cells, respectively. Additionally, the amount of mucus formed in tumor lumps from nude mice model was measured following HE and PAS staining. Results: The increased mucus production in Crk knockdown mEOC cells (MCAS) was manifested by increased number of enlarged cells filled with vacuoles-like mucus observed by phase-contrast microscope and cytoplasmic PAS staining; and enhanced mucus secretion was represented by the assembly of pericellular matrix in particle excluding assay and increased mucus area in tumor lumps from nude mice models. Conclusion: The course of carcinogenesis in mEOC is associated with the altered pattern of mucus production and secretion. The adaptor protein Crk is implicated in both pathways. 展开更多
关键词 adaptor protein crk MCAS cell Mucinous epithelial ovarian cancer(Meoc)
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接合物蛋白CrkⅠ在卵巢癌恶性潜能中的作用 被引量:2
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作者 车亚玲 王瑾 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期675-678,共4页
目的证实接合物蛋白CrkⅠ在卵巢癌恶性潜能中的作用。方法采用Western blot法检测卵巢癌组织、卵巢良性肿瘤组织、正常卵巢组织中Crk和Dock180蛋白的表达;用免疫沉淀法检测3种卵巢癌细胞株中Crk与Dock180蛋白的内源性结合;用小干扰RNA敲... 目的证实接合物蛋白CrkⅠ在卵巢癌恶性潜能中的作用。方法采用Western blot法检测卵巢癌组织、卵巢良性肿瘤组织、正常卵巢组织中Crk和Dock180蛋白的表达;用免疫沉淀法检测3种卵巢癌细胞株中Crk与Dock180蛋白的内源性结合;用小干扰RNA敲低SKOV3细胞中内源性的Crk,检测Crk表达缺失性细胞Crk蛋白表达水平、Rac1酶活性和侵袭力的变化。结果 Dock180与CrkⅠ的表达强度呈现明显的一致性,卵巢癌组织中二者的表达均显著高于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织(P<0.05);而在卵巢良性肿瘤组织与正常卵巢组织之间未发现明显差异(P>0.05)。3个卵巢癌细胞株中Dock180主要表现出与CrkⅠ的内源性结合。和对照相比,敲低Crk基因的细胞表现出侵袭能力和Rac1酶活性明显下降(P<0.05),而敲低CrkⅠ的细胞和同时敲低CrkⅠ和CrkⅡ的细胞相比无明显差异(P>0.05)。结论卵巢癌的恶性生物学行为与Crk/Dock180/Rac1信号通路相关,其中CrkⅠ在卵巢癌中扮演着主要角色。 展开更多
关键词 信号接合物蛋白crk Dock180 人卵巢癌
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Crk在胃癌中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 冯润华 毕任达 +6 位作者 陆晟 袁菲 许海敏 刘炳亚 燕敏 李琛 朱正纲 《外科理论与实践》 2018年第3期258-262,共5页
目的:探讨接头蛋白Crk在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理因素及预后的关系。方法 :采用免疫组织化学方法检测368例胃癌病人肿瘤组织和配对癌旁组织Crk蛋白表达水平,分析其表达与临床病理因素及预后之间的关系。结果:与癌旁组织相比... 目的:探讨接头蛋白Crk在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理因素及预后的关系。方法 :采用免疫组织化学方法检测368例胃癌病人肿瘤组织和配对癌旁组织Crk蛋白表达水平,分析其表达与临床病理因素及预后之间的关系。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中Crk蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。其表达水平与肿瘤大小(P<0.05)、浸润深度(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)、TNM分期(P<0.05)密切相关。Crk蛋白表达水平越高,病人预后越差(P<0.05)。多因素分析表明,Crk蛋白是影响胃癌病人预后的独立危险因素。结论:Crk蛋白在胃癌的发生、发展中起重要作用,可作为预测胃癌预后的分子标志物。 展开更多
关键词 接头蛋白crk 胃癌 免疫组织化学 预后
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接合物蛋白Crk和CrkL在上皮性卵巢癌中的表达及意义 被引量:5
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作者 沈太敏 赵纯全 +1 位作者 赵涌 令狐华 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第11期940-942,共3页
目的探讨接合物蛋白Crk和CrkL在上皮性卵巢癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法,观察Crk和CrkL蛋白在上皮性卵巢癌不同临床病理指标内的表达,并与卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织进行比较。结果上皮性卵巢癌中Crk和CrkL蛋白的表... 目的探讨接合物蛋白Crk和CrkL在上皮性卵巢癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法,观察Crk和CrkL蛋白在上皮性卵巢癌不同临床病理指标内的表达,并与卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织进行比较。结果上皮性卵巢癌中Crk和CrkL蛋白的表达与卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织比较差异有统计学意义(P<0.05)。不同分化程度、临床分期的上皮性卵巢癌Crk蛋白的表达间差异有统计学意义(P<0.05)。不同分化程度、临床分期的上皮性卵巢癌CrkL蛋白的表达情况间差异无统计学意义(P>0.05)。不同组织病理类型的上皮性卵巢癌Crk和CrkL蛋白的表达间差异无统计学意义(P>0.05)。结论Crk和CrkL蛋白可能在上皮性卵巢癌的发生、发展中发挥某种作用,与CrkL蛋白相比,Crk蛋白的过度表达可能更直接影响着卵巢癌浸润、转移等恶性生物学行为。 展开更多
关键词 crk crkL 上皮性卵巢癌 接合物蛋白
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接合物蛋白Crk与CrkL在卵巢癌细胞株MCAS细胞增殖中的不同作用 被引量:1
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作者 李文燕 高一萌 +3 位作者 张瑜 王瑾 车亚玲 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1185-1188,共4页
目的探讨接合物蛋白Crk和CrkL在卵巢癌细胞株MCAS细胞增殖中的不同作用。方法采用免疫共沉淀法检测上皮性卵巢癌细胞株MACS中Crk和CrkL蛋白与已知的与肿瘤增殖相关的上下游结合蛋白的内源性结合;用可调节性siRNA敲低MACS细胞中内源性的... 目的探讨接合物蛋白Crk和CrkL在卵巢癌细胞株MCAS细胞增殖中的不同作用。方法采用免疫共沉淀法检测上皮性卵巢癌细胞株MACS中Crk和CrkL蛋白与已知的与肿瘤增殖相关的上下游结合蛋白的内源性结合;用可调节性siRNA敲低MACS细胞中内源性的Crk及CrkL,观察二者对细胞生长及存活能力的影响。结果免疫共沉淀显示卵巢癌细胞株MACS中,Crk与影响细胞生长增殖的上游蛋白p130Cas及下游蛋白Sos的结合明显强于CrkL,尽管Crk与CrkL表现出部分相同的免疫原性。免疫印迹显示在加入Dox后即Crk或CrkL表达沉默被启动。Crki/CrkLi细胞中加入Dox后Crk与CrkL表达明显降低[Dox+:Crk(0.021±0.001),CrkL(0.676±0.005);Dox-:Crk(0.544±0.003),CrkL(1.282±0.007),P<0.05]。对可调节性siRNA构建之可控性Crki/CrkLi细胞的连续动态观察发现,Crki细胞表现出细胞增殖力受限仍保存生存活力,而CrkLi细胞则表现出逐渐脱壁至死亡。结论 Crk及CrkL在卵巢癌细胞MCAS的恶性增殖中扮演着不同的作用,Crk蛋白的过度表达可能直接影响着卵巢癌细胞恶性增殖,而CrkL则可能更多地参与了细胞基本生存相关的生物行为。 展开更多
关键词 crk crkL 接合物蛋白 卵巢癌细胞株MCAS
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接头蛋白c-Crk单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:2
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作者 田方艳 黄欢 +2 位作者 周文婷 曹辉 张培湘 《肿瘤药学》 CAS 2011年第5期431-433,共3页
目的制备接头蛋白c-Crk单克隆抗体。方法以c-Crk为抗原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌抗c-CrkmcAb的杂交瘤细胞,用ELISA,western-blot等鉴定其生物活性。结果获得两株能稳定分泌c-CrkmcAb的杂交瘤细胞(3C7、3G11),亚类均为Ig... 目的制备接头蛋白c-Crk单克隆抗体。方法以c-Crk为抗原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌抗c-CrkmcAb的杂交瘤细胞,用ELISA,western-blot等鉴定其生物活性。结果获得两株能稳定分泌c-CrkmcAb的杂交瘤细胞(3C7、3G11),亚类均为IgG1;腹水效价为1∶105;western-blot、免疫组织化学分析和ELISA检测证实两株mcAb均与c-Crk有较高的特异性。结论本实验成功制备了两株抗c-Crk特异性的mcAb,可用于c-Crk免疫检测方法的建立。 展开更多
关键词 接头蛋白c-crk 单克隆抗体 WESTERN-BLOT
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接头蛋白Crk与肿瘤
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作者 田玉瑶 刘淑清 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1092-1097,共6页
Crk是一种重要的细胞内信号接头蛋白,含有SH2和SH3结构域,在信号传递过程中不仅承上启下,对信号强度还有着调控作用.迄今主要发现了4种Crk分子,即v-Crk、CrkⅠ、CrkⅡ和CrkL(Crk-Like).CrkⅡ和CrkL在分子结构上具有高度同源性,但对信号... Crk是一种重要的细胞内信号接头蛋白,含有SH2和SH3结构域,在信号传递过程中不仅承上启下,对信号强度还有着调控作用.迄今主要发现了4种Crk分子,即v-Crk、CrkⅠ、CrkⅡ和CrkL(Crk-Like).CrkⅡ和CrkL在分子结构上具有高度同源性,但对信号分子却具有不同的偏好性,从而体现出功能差异.本文就接头蛋白Crk的结构、Crk与相互作用蛋白质的作用机制以及与肿瘤的发生发展关系进行了阐述. 展开更多
关键词 crk crk相关信号分子 接头蛋白 结构域 肿瘤
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