AdipoR1在ApoE基因敲除小鼠粥样斑块中的表达及其变化

目的探讨脂联素(adiponectin)1型受体(AdipoR1)在载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成过程中的变化。方法取野生型C57BL/6J小鼠作为对照组,ApoE基因敲除小鼠分为10周龄、20周龄和30周龄组,观察不同组别小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)及脂联素的含量及主动脉斑块面积的变化。免疫组织化学染色法对AdipoR1进行半定量及定位分析。结果ApoE基因敲除小鼠的血清TG、TC、LDL水平与对照小鼠比较显著升高,并随小鼠周龄增加而升高;斑块面积也随小鼠周龄增加而增大。ApoE基因敲除小鼠血浆脂联素水平低于对照小鼠,免疫组织化学染色法显示AdipoR1在ApoE基因敲除小鼠血管内膜表达阳性减弱,其程度随周龄增加有减少趋势。结论ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的形成不仅与低脂联素血症相关,而且与主动脉血管组织中AdipoR1型脂联素受体表达下调也相关。

秦川肉牛AdipoR1和AdipoR2基因克隆、生物信息学分析及表达研究

试验旨在利用生物信息学方法对秦川牛肉用新品系(以下简称“秦川肉牛”)AdipoR1、AdipoR2基因的CDS区进行克隆及分析,并探究其在秦川肉牛不同组织及肌细胞诱导分化不同时间的表达情况。以秦川肉牛为研究对象,经PCR扩增得到AdipoR1、AdipoR2基因CDS区序列,运用生物信息学软件对其功能结构进行预测,同时采用实时荧光定量PCR术获得AdipoR1、AdipoR2基因在秦川肉牛15个组织和诱导分化后不同时间的表达量,再进行差异分析。结果显示,秦川肉牛AdipoR1基因编码序列全长为1128 bp,编码375个氨基酸,蛋白分子质量为42446.41 u,理论等电点为6.70,AdipoR1蛋白二级结构主要由α-螺旋构成,二、三级结构预测结果一致,属于亲水性蛋白,没有信号肽位点;AdipoR2基因编码序列全长1161 bp,编码386个氨基酸,蛋白分子质量为43707.70 u,理论等电点为6.27。亚细胞定位结果表明,AdipoR1蛋白有60.9%的可能定位在细胞膜,AdipoR2蛋白有73.9%的可能定位在细胞膜。不同物种氨基酸系统进化树结果显示,秦川肉牛AdipoR1、AdipoR2基因编码的氨基酸序列分别与瘤牛和野牦牛的亲缘性最近。实时荧光定量PCR结果显示,AdipoR1、AdipoR2基因在秦川肉牛心脏、肝脏、肌肉等15个组织中均有表达,且在肌肉组织中的表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01),在肌细胞诱导分化时序上也有明显差异。本试验揭示了AdipoR1和AdipoR2基因在秦川肉牛不同组织和肌细胞诱导分化后不同时间上的表达差异,以期为进一步探究AdipoR1、AdipoR2基因的生物学功能与调控机理奠定基础。

脂联素受体1基因-102T/G多态位点与山西省汉族人2型糖尿病的关系

目的研究脂联素受体1(AdipoR1)基因-102T/G多态位点与山西汉族人2型糖尿病的关系。方法应用序列特异性引物-聚合酶链反应技术(PCR-SSP)检测50例2型糖尿病患者和50名健康对照者AdipoR1-102T/G单核苷酸多态性位点基因型,并测定所选人群的临床指标。结果①基因型及等位基因频率分布在2型糖尿病患者和健康对照组人群中差异无统计学意义(P>0.05)。②健康对照组人群中,G等位基因携带者空腹血糖较TT基因型者低(P<0.01)。③2型糖尿病患者中,G等位基因携带者空腹胰岛素(P<0.01)、胰岛素抵抗指数(P<0.05)及空腹血糖(P<0.05)较TT基因型者低。结论AdipoR1基因与山西汉族人群糖代谢及胰岛素抵抗相关,与2型糖尿病无关。

东北林蛙adipor1和adipor2基因克隆及其在感染中的表达分析

脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)和脂联素受体2(adiponectin receptor 2,AdipoR2)能够与脂肪组织分泌的脂联素(adiponectin,AdipoQ)相结合,参与机体的多种生理功能。为探究AdipoR1和AdipoR2在嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)感染下两栖类炎症反应中的作用,通过逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术克隆东北林蛙(Rana dybowskii)的adipor1和adipor2基因,对adipor1和adipor2进行生物信息学分析;利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术分析adipor1和adipor2的组织表达差异,构建Ah感染的东北林蛙炎症模型,通过苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察组织病理变化;再利用qRT-PCR和Western blotting对感染后不同时间点的adipor1和adipor2的表达进行动态检测。结果表明,AdipoR1和AdipoR2均为具有7次跨膜结构域的膜蛋白;系统进化树也显示与两栖类聚为同一分支;基于qRT-PCR和Western blotting结果显示,Ah感染下adipor1和adipor2在转录和翻译水平发生不同程度的上调表达,但应答时间和水平有所差异。综上所述,推测AdipoR1和AdipoR2参与了机体的细菌免疫应答过程,为进一步探究脂联素受体在两栖类的生物学功能提供参考。

脂联素受体1基因-3881T／C多态位点与中国人糖代谢的关系

目的 研究脂联素受体1（adiponectin receptor1，ADIPOR1）基因-3881T／C多态位点与中国人糖代谢及胰岛素抵抗的相关性。方法 选取上海地区中国人糖耐量正常者370名，新诊断2型糖尿病患者294例，采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态检测ADIPOR1基因-3881T／C变异，并测定所选人群的临床指标。结果 （1）等位基因频率分布在2型糖尿病患者和正常糖耐量人群中差异无统计学意义（P=0．6749）；（2）C等位基因在胰岛素抵抗的2型糖尿病亚组中频率较低（P=0．0121）；（3）糖耐量正常人群中，C等位基因携带者空腹血糖较TT基因型者低（P=0．0140）；（4）2型糖尿病患者中，C等位基因携带者舒张压（P=0．0466）及胰岛素抵抗指数HOMA-IR（P=0．0498）较TT基因型者低。结论 ADIFOR1基因与中国人糖代谢及胰岛素抵抗相关。

脂联素受体1基因-1927T/C多态位点与2型糖尿病的关系

目的探讨脂联素受体基因1927 T/C多态位点与2型糖尿病易感性的关系,为糖尿病的有效防治提供科学依据。方法采用PCR及测序技术对141例2型糖尿病患者和141例健康者的AdipoR1基因1927突变位点进行检测。同时测定两组人群的临床相关指标。结果糖尿病组中AdipoR1等位基因频率及基因型频率与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。糖尿病组中,CC基因型FBG、FINS、C肽、HOMA-IR与TX基因型比较有统计学差异。结论本研究提示AdipoR1 1927 T/C多态可能与宁波地区汉族人群2型糖尿病发病无关,与糖代谢及胰岛素抵抗有关。