新型疫苗佐剂Ov-ASP-1佐剂活性功能区的设计、表达及生物学特性研究

目的获得保留Ov-ASP-1佐剂活性的功能区。方法用前期制备的Ov-ASP-1单克隆抗体对Ov-ASP-1的9个肽进行特异性结合,根据肽的结合情况设计功能区ASPPRM,并进行密码子优化、构建原核表达载体后在大肠杆菌中表达。表达产物经Western印迹鉴定后的用镍柱纯化蛋白,复性完全后对获得的ASPPRM活性蛋白进行生物学特性分析。结果 ASPPRM以包涵体形式表达,分子量为17kD。将其和OVA共同免疫小鼠后ASPPRM组抗OVA的IgG抗体显著高于OVA组。结论本研究获得了保留佐剂活性的ASPPRM蛋白,为后续ASPPRM体内的免疫增效作用及Ov-ASP-1佐剂活性功能域的探索奠定基础。