乙型肝炎病毒adr型全基因组C区突变株的构建及其生物学活性检测

目的构建乙型肝炎病毒(HBV)全基因组C区L97和V60突变质粒,并检测其生物学活性。方法采用定点突变技术将HBVadr1.2拷贝基因组质粒p3.8Ⅱ进行C区点突变,构建L97和V60两个突变株。质粒经脂质体介导转染HepG2细胞,Southern杂交分析细胞内HBVDNA复制,ELISA检测培养上清中HBsAg和HBeAg。结果测序结果表明所构建的突变质粒p3.8L97和p3.8V60分别为nt2189A→C和nt2086C→G,突变质粒均可在宿主细胞内复制和表达。结论所构建HBV(adr型)全基因组C区L97和V60突变质粒具有生物活性。

乙肝病毒adr型基因疫苗诱导小鼠体液免疫应答

目的 :构建乙肝病毒 adr型基因疫苗 p CMVS2 - S,观察其免疫小鼠的特异性体液免疫应答。方法 :将构建的乙肝病毒基因疫苗注射于 C5 7BL/ 6小鼠胫骨前肌内 ,运用 EL ISA检测不同时间小鼠血清中抗 HBs抗体。结果 :注射基因疫苗 1周后 ,血清中抗 HBs抗体转阳 ,1个月后抗体达到高峰 ,并以高水平维持至少 2个月。 结论 :基因疫苗 p CMVS2 - S能诱导 C5 7BL/ 6小鼠产生较好的体液免疫应答。

adr型乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的制备

目的制备能用于人乙型肝炎研究的HBV转基因小鼠模型。方法将首尾相连的adr型HBV全基因组克隆至pBR322质粒,经扩增纯化后,用显微注射法导入C57BL/6小鼠受精卵原核,让外源HBV自然整合至小鼠受精卵基因组。用PCR、DNA测序、放免及免疫组化等方法分析HBV在小鼠体内的整合、复制、表达情况。结果显微注射1712枚卵,产仔128只,其中有14只鼠尾HBV PCR检测阳性,12只在血清中检测到HBV DNA及HBsAg,对其中10只HBV DNA阳性鼠用基因分析仪测序,9只与所转基因序列完全相同,1只于1739、1740位缺失2个碱基。待这批首建鼠性成熟后,交配产仔,分别在其子代血清中检测到HBV DNA及HBsAg;肝组织切片免疫组化分析,发现散在点状HBsAg表达。结论本实验结果表明,HBV DNA已整合至小鼠基因组,并能复制、表达。证明我们已获得HBV转基因小鼠模型。

环氧型扩链剂ADR改性PBT/PA6共混体系及其性能研究

通过双螺杆挤出机制备环氧型扩链剂ADR增容对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)/聚酰胺6(PA6)共混物,并对共混体系的流变性能、热稳定性、结晶性能以及力学性能进行研究。结果发现:随着相容剂含量的增加,共混体系的熔融指数下降,剪切粘度增大;相容剂的加入提高了共混体系的热稳定性,增强了共混体系的机械性能,降低了共混体系的结晶性能。当相容剂含量为0.6%时,共混物的力学性能达到最佳。

PPP纠纷解决之合意型ADR研究

ADR(替代性纠纷解决机制)是PPP争议解决的重要路径,合意型ADR作为ADR的一种类型,包括调解和再谈判(或协商)两种机制。由于合同特性、政府守约意识和第三方调解机构的缺乏等因素不利于合意型ADR在PPP争议解决中的适用,其深层原因在于合同定性不明、合同周期长,以及合同具有涉他性等。在PPP争议解决中要推行合意型ADR机制:一方面,相关制度或PPP合同中要规定发生争议后的再谈判(或协商)机制,包括再谈判条件、政府组织机构调整等;另一方面,构建PPP争议的调解机制,包括调解适用的范围与条件、建立独立的调解机构和调解制度等。

日本行政型非诉讼纠纷解决的协同机制及其启示

日本行政型ADR不仅是一种现代非诉讼纠纷解决机制,同时也是行政机关推进社会治理创新的重要手段。为了更为有效地解决纠纷、充分满足现实中日趋膨胀的解纷需求,日本行政机关积极探索行政型ADR与其他纠纷调整机制之间协同运作的可能,并取得十分显著的成效。本研究将围绕日本行政型ADR与苦情处理制度、民间型ADR协同的主题,阐释其背后蕴含的逻辑与意义,以期对未来完善我国以行政调解为中心的多元化非诉讼纠纷解决机制形成有益启示与思考。