阿霉素长循环热敏脂质体的研制及其靶向治疗肿瘤作用的研究

目的:研制阿霉素脂质体(AL)、阿霉素长循环脂质体(ALCL)和阿霉素长循环热敏脂质体(ALTSL)。研究不同类型脂质体对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用。方法:建立荷瘤小鼠模型,观察各实验组的抑瘤效果,计算抑瘤率和生命延长率;HPLC法研究静脉给药后各实验组阿霉素的药代动力学规律及组织学分布特征;制作病理切片,观察各实验组肿瘤和心脏等组织的病理变化。结果:ALCL和ALTSL对H22荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑制作用,抑瘤率分别为57.8%和67.0%(P<0.01);尾静脉注射给药24h后,ALCL和ALTSL组荷瘤小鼠肿瘤组织和血液中的阿霉素含量明显上升,而在心、肺中的含量显著降低;ALTSL使肿瘤细胞大量坏死,而对心肌细胞无明显损伤。结论:ALCL和ALTSL均能提高化疗药阿霉素的抗肿瘤效果,降低阿霉素的心肺毒性,延长荷瘤小鼠的存活时间。

附子多糖与阿霉素长循环热敏脂质体的抗肿瘤作用及其机制探讨

目的:观察附子多糖(MPS)与阿霉素(ADM)长循环热敏脂质体(ALTSL)联合靶向治疗荷肝癌H22小鼠的作用,并探讨其抗肿瘤作用机制。方法:以荷瘤小鼠的瘤重为指标,观察药物的抗肿瘤活性。以荷瘤小鼠的存活天数计算生命延长率。以乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞的杀伤活性。以MTT比色法检测淋巴细胞的转化率。以流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡及p53、Fas、FasL和caspase-3的表达。用RT-PCR法测定IL-2mRNA及IL-12mRNA的表达。制作病理切片观察肿瘤、心、肝、肾脏的组织学变化,探讨抗肿瘤机制。结果:MPS+ALTSL联合治疗对肿瘤的抑制作用比单一ALTSL靶向治疗更为显著,抑瘤率达80.4%,并可显著延长荷瘤小鼠的存活时间(P<0.01)。与对照组和ADM组比较,ALTSL可使NK细胞的杀伤活性显著增加,而MPS+ALTSL则可使NK细胞的杀伤活性和淋巴细胞转化率进一步提高(P<0.01)。应用ALTSL可使脾细胞中IL-2mRNA和IL-12mRNA的表达明显增高;而MPS+ALTSL则可使他们的表达进一步增强。病理切片的结果显示,热敏脂质体配合肿瘤局部加热,可使肿瘤细胞凝固坏死。联合应用MPS,可见肿瘤组织中出现大量的淋巴细胞浸润。结论:ALTSL能提高化疗药物ADM的抗肿瘤效果,并降低其心肺毒性,保护机体的免疫功能。MPS+ALTSL能进一步诱导肿瘤细胞凋亡,激活并促进T细胞转化和NK细胞的杀伤活性,增强机体的免疫功能,发挥抗肿瘤的协同作用。

甘草次酸-长循环阿霉素脂质体的制备及其靶向性研究

目的合成甘草次酸(GA)修饰的聚乙二醇(PEG)-磷脂衍生物,制备甘草次酸-长循环阿霉素脂质体(GA-PLIP@ADM),研究其体外制剂学相关性质和小鼠体内靶向性。方法合成GA修饰的PEG-DSPE,差示扫描量热法、核磁共振氢谱和飞行质谱法表征合成产物;采用薄膜分散法制备GA-PLIP@ADM,并测定其包封率和载药量;动态光散射法测定其粒径和zeta电位,透射电镜观察外观形态;考察其稳定性;建立阿霉素体内分析方法,研究GA-PLIP@ADM的体内靶向性。结果采用合成GA修饰的PEG-磷脂衍生物制备的GA-PLIP@ADM包封率和载药量分别为(60.6±4.5)%和(4.22±0.32)%,平均粒径为(127.2±5.2)nm;外观为球形或类球形,大小均一;稳定性良好;小鼠体内靶向性研究结果表明,GA-PLIP@ADM具有明显的肝脏和肿瘤靶向性。结论甘草次酸-长循环阿霉素脂质体作为肝脏靶向和肿瘤靶向给药系统,具有广阔的应用前景。

rhIL-2与阿霉素长循环热敏脂质体靶向治疗肿瘤的协同作用

目的:观察重组人白细胞介素-2(rhIL-2)与阿霉素长循环热敏脂质体(ALTSL)联合靶向治疗荷H22瘤小鼠的协同作用,并探讨其抑瘤作用的机制。方法:以荷H22瘤小鼠的瘤重为指标,评价药物的抑瘤活性。以荷H22瘤小鼠的存活天数计算生命延长率。以乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞的杀伤活性。以MTT比色法检测淋巴细胞的转化率。以流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡及p53、Fas、FasL和caspase-3的表达。用RT PCR法测定IL-2mRNA及IL-12mRNA的表达。镜下观察荷H22瘤小鼠肿瘤、心、肝及肾脏组织的病理变化。结果:rhIL2+ALTSL的抑瘤率显著高于单用ALTSL,分别为73.5%和67.0%;ALTSL和rhIL2+ALTSL均可显著延长荷瘤小鼠的存活时间(P<0.05～P<0.01)与对照组和游离阿霉素(FADM)组相比较,ALTSL组NK细胞的杀伤活性显著增加,rhIL2+ALTSL组NK细胞的杀伤活性更高。与FADM组比较,rhIL-2+ALTSL组淋巴细胞的转化率明显提高(P<0.01)。应用ALTSL组和rhIL-2+ALTSL组均可增强脾细胞中IL-2mRNA和IL-12mRNA的表达,但后者的增强作用高于前者。病理切片检查显示,热敏脂质体配合肿瘤局部加热,使肿瘤细胞凝固坏死,联合应用rhIL-2肿瘤组织溶解,细胞破碎,可见大量的淋巴细胞浸润。结论:ALTSL能提高ADM的抑瘤效果,降低ADM心肺的毒性。