A-PRF促进兔膝关节骨软骨损伤愈合的观察

目的·探讨改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin,A-PRF)在骨软骨再生中的作用。方法·获取新西兰兔骨髓间充质干细胞(bone-marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)和膝关节软骨细胞;通过低速离心兔心脏血液获得A-PRF。采用光学显微镜观察A-PRF的组织学结构;ELISA法检测A-PRF中生长因子,包括血小板衍生生长因子、转化生长因子-β、胰岛素样生长因子、血管内皮生长因子、表皮生长因子和成纤维细胞生长因子的释放;采用活/死细胞双染法及MTT法检测A-PRF对兔BMSCs细胞毒性及增殖情况的影响;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测A-PRF对兔BMSCsⅡ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)基因表达的影响;使用transwell小室测定A-PRF对于兔BMSCs以及软骨细胞迁移能力的影响。建立兔膝关节骨软骨缺损模型,将18只兔随机分为3组:A-PRF组(n=6)在缺损处植入A-PRF;A-PRF+BMSCs组(n=6)植入接种兔BMSCs的A-PRF;对照组(n=6)不进行植入操作。术后12周处死兔,采用苏木精-伊红(H-E)、甲苯胺蓝和番红O-固绿染色进行膝关节标本的组织学观察,并根据膝关节的表面形态学与组织学情况,采用国际软骨修复协会(International Cartilage Repair Society,ICRS)评分系统进行宏观与组织学评分。结果·A-PRF具有松散的网络结构,可以缓慢释放生长因子。加入A-PRF后,未观察到其对兔BMSCs具有细胞毒性;在加入A-PRF后24、48和72 h,BMSCs的增殖能力均明显升高(均P<0.05),成软骨相关基因Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖,以及成骨相关基因ALP和OCN均显著上调(均P<0.05)。加入A-PRF后,兔BMSCs与软骨细胞的迁移能力均显著增强(均P<0.05),且兔BMSCs的迁移能力显著高于软骨细胞(P=0.025)。在兔膝关节缺损模型中,观察关节表面形态,可见A-PRF组和A-PRF+BMSCs组缺损均基本恢复,而对照组仅有软组织覆盖。在ICRS宏观评分方面,A-PRF组与A-PRF+BMSCs组的差异无统计学意义,但2组评分均显著高于对照组(均P<0.05)。组织学观察显示,A-PRF组和A-PRF+BMSCs组均产生骨软骨修复,但A-PRF组软骨更加成熟,对照组则形成纤维修复。在ICRS组织学评分方面,A-PRF组与A-PRF+BMSCs组的差异无统计学意义,但2组评分均显著高于对照组(均P<0.05)。结论·自体A-PRF具有良好的生物相容性和促进BMSCs增殖的能力,在体外和体内均可促进软骨和软骨下骨的修复。

改良型富血小板纤维蛋白促进脂肪移植存活的最适混合比例实验研究

目的探索改良型富血小板纤维蛋白(A-PRF)促进脂肪移植存活的最适混合比例。方法酶消化法分离脂肪干细胞并培养,传代至第三代,抽取健康患者静脉血一次性制备A-PRF,以1:6、1:8、1:10、1:12、1:14五种混合比例分别与脂肪干细胞混合。取6周龄SPF级雌性裸鼠60只,随机分为5组,每组12只,分别将A-PRF以体积比1:6、1:8、1:10、1:12、1:14五种混合比例分别与人脂肪颗粒混合后注射至5组裸鼠背部,分别记为1:6、1:8、1:10、1:12、1:14组。于移植后4、8、12周以断颈法处死裸鼠,比较脂肪标本体积及质量变化;HE染色观察脂肪标本的血管密度及分布;分析囊腔/空泡占比、炎症反应程度、间质化纤维程度;免疫组化测定CD31蛋白含量。结果第24小时,5组迁移变化均不明显,在第48小时及72小时1:12组的细胞迁移程度明显高于其他组,差异具有统计学意义(P<0.05)。在第4、8及12周,1:12组的脂肪质量组织体积及质量的保留率最高,差异具有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,1:12组的囊腔/空泡占比、间质化纤维程度均为最低并伴有大量新生毛细血管,5组在第4周时炎性反应程度均较严重,在第8及第12周的炎性反应程度均较轻且差异不明显。CD31染色结果显示,1:12组的CD31蛋白含量较其他组明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论改良型富血小板纤维蛋白促进脂肪移植存活的最适混合比例是1:12。

CGF和A-PRF对即刻种植软组织愈合的研究

目的探究浓缩生长因子(CGF)和改良型富血小板纤维蛋白(A-PRF)对比格犬即刻种植软组织缺损修复再生能力的影响。方法利用专用离心设备及压膜工具盒,制备A-PRF和CGF膜,进行组织切片染色和扫描电镜观察。实验纳入4只成年健康雄性比格犬,双侧下颌第二和第四前磨牙(P2和P4)及第二磨牙(M2)作为实验牙位,采用左右半口随机对照将六颗实验牙位分为三组:A-PRF组,CGF组,空白组。麻醉下拔除实验牙齿,行即刻种植手术。新鲜牙槽窝均常规备洞,植入3.8mm×7mm纯钛种植体,牙槽嵴表面分别对应放置A-PRF膜、CGF膜和空白处理。充分减张后,无张力严密缝合伤口。于术后1周、1月肉眼观察记录手术伤口愈合情况。在术后1月处死4只比格犬,取比格犬手术位点牙龈制作组织标本,利用免疫组化方法观测牙龈组织神经血管再生情况。结果A-PRF的纤维蛋白网络结构较CGF疏松。术后1月时A-PRF组和CGF组软组织愈合较空白组更好,其中A-PRF组愈合较CGF为佳。结论A-PRF较CGF具有更佳的促软组织再生作用。

A-PRF对人骨髓间充质细胞生物学性能的影响

目的观察改良型富血小板纤维蛋白(advanced-platelet-rich fibrin,A-PRF)对人骨髓间充质细胞(human bone marrow mesenchymal cells,hBMMCs)生物学性能的影响。方法对hBMMCs进行多向分化能力鉴定,扫描电镜及人生长因子阵列膜检测A-PRF微观结构及分子构成,CCK-8检测A-PRF对hBMMCs增殖的影响,划痕实验检测A-PRF对hBMMCs迁移的影响,通过碱性磷酸酶活性检测及茜素红染色检测不同浓度A-PRF对hBMMCs矿化能力的影响。结果扫描电镜结果显示A-PRF为三维网状结构;人生长因子阵列膜检测发现A-PRF含有40多种细胞因子,并含有巨噬细胞集落刺激因子受体(macrophage colony stimulating factor receptor,M-CSF-R)及人神经生长因子β(β-nerve growth factor,β-NGF);体外实验可见10%A-PRF可以提高细胞增殖(P<0.05)和迁移能力,同时可促进hBMMCs形成钙沉积和碱性磷酸酶活性表达(P<0.05)。结论A-PRF对hBMMCs的成骨分化、增殖和迁移有促进作用,其中10%的A-PRF促进作用更为明显。因此,A-PRF对hBMMCs具有良好的细胞生物学效应,可为临床选择A-PRF促进骨组织再生提供初步实验依据。

A-PRF在下颌低位阻生智齿拔除中的应用效果观察

目的探讨在下颌低位阻生智齿拔除术后牙槽窝内填入A-PRF(改良型富血小板纤维蛋白)的临床效果。方法对下颌低位阻生智齿需要翻瓣、去骨拔除的患者,选择了160例,随患者意愿分为试验组80例,在术前抽取患者静脉血10mL,制备A-PRF,在智齿拔除术后将其填入牙槽窝内,缝合创口;对照组80例,常规拔除后,牙槽窝内不填任何材料。术后第7天,通过调查问卷方式记录患者术后局部并发症情况:出血、疼痛、肿胀、功能障碍进行调查。结果试验组局部并发症较对照组轻,差异有统计学意(P<0.05)。结论A-PRF在下颌阻生智齿拔除中的应用,可以明显减轻局部术后并发症的发生。

A-PRF膜促进种植体周围附着龈再生的临床研究

目的:将富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin, A-PRF)膜应用于前庭沟加深术,探讨其促进种植体周附着龈再生的临床效果。方法:收集2015年10月─2017年7月在本院因种植体周附着龈不足而需前庭沟加深术的患者共26例,运用统计学中简单随机方法将患者随机分为2组(n=13),实验组应用A-PRF膜,对照组仅采用常规手术。术后不同时间点对附着龈再生、黏膜状态、疼痛程度进行评价。采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:术后2周、12周,实验组新增附着龈分别为(3.15±0.36)mm和(2.81±0.36)mm,均显著高于对照组的(2.93±0.29)mm和(2.52±0.30)mm(P<0.05)。实验组术后黏膜愈合状态也显著优于对照组(P<0.05)。实验组术后3 d疼痛程度为(51.03±12.20)分,与对照组(58.22±9.86)分比较显著降低(P<0.05)。结论:A-PRF膜应用于前庭沟加深术可有效促进创口愈合,缓解术后疼痛,并增加种植体周附着龈再生。

不同浓度的A-PRF膜萃取液对人牙龈成纤维细胞增殖及OPG表达的影响

目的比较不同浓度的富血小板纤维蛋白(A-PRF)膜萃取液对人牙龈成纤维细胞(HGF)增殖能力及骨保护素(OPG)表达的影响。方法将健康成人的牙龈依照组织块培养法进行传代,对其来源进行免疫荧光染色鉴定,取浓度0、10%、50%、100%的A-PRF提取液100μl分别加入到人牙龈成纤维细胞培养基内,标记为A组、B组、C组、D组,观察人牙龈成纤维细胞的生长密度与形态;用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测OPG表达水平,并进行组间比较。结果利用组织块贴壁的培养方法培养HGF。在倒置相差显微镜下进行观察,可见HGF呈现梭形或者星形,细胞排列十分规则,呈束状或旋涡状。用免疫荧光染色法鉴别HGF组织的来源,抗角蛋白抗体染色结果无染色呈阴性,抗波形丝蛋白抗体染色呈现阳性,胞浆呈现荧光绿色,HGF的细胞有明显细长的伪足呈长梭形,胞核多呈椭圆形位于细胞的中央,照相记录HGF的细胞形态,证实本实验所培养的细胞为来源于中胚层的纤维母细胞,具有HGF的形态特点。随着A-PRF膜萃取液浓度的增高牙龈成纤维生长密度增加,细胞数量明显增多。HGF在低浓度的生长因子萃取液刺激的条件下,OPG表达水平随着萃取液浓度的增高而不断增加。经不同浓度A-PRF膜萃取液刺激后,A组、B组、C组、D组的OPG表达分别为(2490.69±255.94)、(3336.86±245.41)、(5434.33±256.56)、(6931.46±132.72)pg/ml,四组的OPG表达水平比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论A-PRF膜萃取液能够很好的促进牙龈成纤维细胞的增殖,并且OPG的含量也相应有所增加,更加证实了A-PRF膜在促进牙龈组织愈合及骨组织愈合具有很好的贡献。

A-PRF在上颌窦内提升术中的临床应用

目的:探讨改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin,A-PRF)在上颌窦内提升术中的临床应用。方法:选择我院上颌后牙剩余牙槽嵴高度不足的种植患者,26例42颗牙,采用Osstem TSⅢ型种植体系统,骨挤压与液压法联合经牙槽嵴入路内提升术,应用A-PRF作为植入物,并同期植入种植体。术后6-8月进行义齿修复。结果:术后曲面断层片显示上颌窦内提升幅度在3.3-7.8mm (平均6.1mm),26例患者42颗牙齿均取得良好的骨结合。结论:改良型富血小板纤维蛋白(A-PRF)是完全自体血液来源的组织,不存在排异反应,且具有诱导软硬组织形成作用,可作为一种有效的低成本的上颌窦提升生物材料应用于临床。

改良型富血小板纤维蛋白与β⁃磷酸三钙复合物诱导成骨作用与机制

目的探讨改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet⁃rich fibrin,A⁃PRF)与β⁃磷酸三钙(β⁃tricalcium phosphate,β⁃TCP)构成比例对兔股骨缺损模型骨形成的作用及机制,为临床治疗骨缺损提供新思路。方法24只新西兰大白兔构建骨缺损模型并分为模型组、1∶1复合物组(A⁃PRF∶β⁃TCP=1∶1)、2∶1复合物组(A⁃PRF∶β⁃TCP=2∶1)与4∶1复合物组(A⁃PRF∶β⁃TCP=4∶1),每组6只。复合物组在骨缺损处填充复合材料,模型组不充填材料,8周后安乐法处死动物采标本。采用micro⁃CT测定股骨缺损区新生骨的骨密度(bone mineral densi⁃ty,BMD)、骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁分离度(trabecular separation/spacing,Tb.Sp)。HE染色观察新骨及新生血管形成情况;扫描电镜观察新生骨组织的形态变化;酶联免疫法检测新生股骨组织中磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(phospho⁃p38 mitogen activated pro⁃tein kinase,p⁃p38MAPK)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer⁃binding protein homologous pro⁃tein,CHOP)、磷酸化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(phospho⁃cysteine aspartic protease⁃3,p⁃Caspase3)含量;实时定量PCR检测新生骨组织中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、骨形态发生蛋白⁃2(bone morphogenetic protein⁃2,BMP⁃2)、核因子κ⁃B配体受体致活剂(receptor activator of nuclear factor kappa⁃B ligand,RANKL)、p38MAPK的mRNA表达量;免疫组织化学法观察新生骨组织中OPG、BMP⁃2、RANKL、p⁃p38MAPK、p⁃Caspase3蛋白表达情况;荧光Tunel染色观察新生股骨组织中细胞凋亡情况。结果模型组股骨缺损区域骨形成缓慢,成骨质量差。与模型组相比,复合物组动物股骨缺损区域成骨情况良好,BMD、BV.TV、Tb.Th、Tb.N升高,Tb.Sp下降,新生股骨组织中见新生毛细血管形成;p⁃p38MAPK、CHOP、p⁃Caspase3蛋白表达降低,OPG、BMP⁃2的mRNA与蛋白表达升高,RANKL与p38MAPK的mRNA表达降低(P<0.05);各组新生骨组织中的凋亡检测表明2:1复合物组样本中细胞凋亡率最低(P<0.05);A⁃PRF∶β⁃TCP=2∶1的配比成骨效果最佳。结论由A⁃PRF与β⁃TCP组成复合物能促进OPG表达,抑制RANKL表达和p38MAPK磷酸化,减少新生骨组织细胞凋亡,促进成骨分化。

数字化技术联合富血小板纤维蛋白新型牙周再生技术治疗后牙舌侧根分叉病变6年随访1例

常规牙周再生术对牙周炎非包含性骨缺损患牙的治疗效果有限,本文报道1例采用数字化技术联合富血小板纤维蛋白的新型牙周再生手术治疗下颌第一磨牙远中舌侧根分叉病变病例。术后患者牙周临床指数获得明显改善,牙槽骨得到良好修复再生。

改良型与可注射型富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞增殖及分化的影响

目的 探究改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin, A-PRF)和可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin, i-PRF)对人牙龈成纤维细胞增殖及分化的影响,为两种血小板纤维蛋白制品促进软组织愈合的表观差异及临床效能评估提供实验数据参考。方法 观察A-PRF及iPRF显微及超微结构,测定血小板浓缩物生长因子(PDGF-BB,TGF-β1,EGF)的释放情况,将A-PRF及i-PRF作用于人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts, HGFs),观察两者对HGFs的增殖影响及HGFs I型胶原蛋白(COL1)的表达情况,通过qRT-PCR进一步检测I型胶原蛋白α2(COL1α2)、纤连蛋白I (FN1)、转移生长因子β(TGF-β)、血小板衍生生长因子(PDGF)基因的表达。结果 i-PRF中白细胞层较A-PRF更宽,且白细胞数量更多,而A-PRF的纤维网状结构更为致密。A-PRF、i-PRF中的细胞因子随着时间的延长,在各时间点释放量逐渐降低,A-PRF中TGF-β1在第1天及EGF在第7天释放量低于i-PRF,其余各个时间点A-PRF生长因子的释放量均高于i-PRF (P<0.05), A-PRF及i-PRF均对HGFs的增殖具有显著促进作用,差异无统计学意义。A-PRF对TGF-β、PDGF基因的上调作用更加明显,而i-PRF对HGFs I型胶原蛋白及COL1a2、FN1基因的上调作用更为明显。结论 A-PRF、i-PRF均对HGFs的增殖具有明显的促进作用,且二者对HGFs I型胶原蛋白的表达起到了显著促进作用,在同一时间段A-PRF可分泌更多的软组织愈合相关生长因子,提示A-PRF在促进软组织修复愈合方面表现更优。

富血小板纤维蛋白联合冠向复位瓣术治疗牙龈退缩患者的效果

目的:观察富血小板纤维蛋白(PRF)联合冠向复位瓣术(CAF)治疗牙龈退缩患者的效果。方法:回顾性分析2019年1月至2022年6月该院收治的68例牙龈退缩患者的临床资料,按照治疗方法不同将其分为观察组与对照组各34例。对照组行CAF治疗,观察组在对照组基础上联合PRF治疗,比较两组牙周探诊深度(PD)、角化龈宽度(WKG)、牙龈退缩深度(GRD)、根面覆盖率、红色美学指数(PES)评分和治疗满意度。结果:治疗后6个月,两组PD水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组WKG水平、PES评分均高于治疗前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组GRD水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组根面覆盖率为88.24%,高于对照组的64.71%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗满意度为67.65%,明显高于对照组的32.35%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PRF联合CAF治疗牙龈退缩患者可提高WKG水平、PES评分、根面覆盖率和治疗满意度,降低GRD水平,效果优于单纯CAF治疗。

改良型富血小板纤维蛋白预防下颌阻生智齿拔除术后并发症的效果

目的探讨应用改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin,A-PRF)预防下颌阻生智齿拔除术后并发症的效果。方法选取20例需拔除双侧下颌智齿患者,每名患者随机筛选一侧牙槽窝,行A-PRF填充(试验组);另一侧行常规缝合处理(对照组)。比较术后1、7d两侧拔牙窝疼痛程度、疼痛发生率及软组织肿胀程度,同时评价不同处理方式后张口度及术后3个月第二磨牙远中牙周袋深度。结果试验组牙槽窝术后1d后疼痛分级为4.25,低于对照组的6.20(P<0.05),且疼痛发生比例低于对照组牙槽窝。随着时间延长,两侧牙槽窝的术后疼痛级别都显著下降。拔牙后1 d,试验组牙槽窝肿胀度为(0.59±0.09)cm,张口度为(3.79±1.25)cm,皆显著低于对照组(P<0.05);7 d后对照组和试验组两侧肿胀程度分别为(0.025±0.09)cm和(0.013±0.07)cm,两组无统计学差异;术后3个月两侧第二磨牙远中牙周袋探诊深度分别为(4.61±0.27)mm和(3.39±0.29)mm(P<0.05)。结论A-PRF的应用可以有效减少下颌阻生智齿拔牙术后并发症的发生。

改良型富血小板纤维蛋白用于口腔软组织缺损修复对瘢痕的影响

目的探讨改良型富血小板纤维蛋白(APRF)修复兔硬腭软组织缺损中对瘢痕组织的作用机制。方法将30只日本大耳白兔随机分为两组,于APRF组的兔硬腭软组织缺损处植入自体APRF膜,空白对照组缺损处自然愈合。建模后3、7、14、21、28 d观察术区瘢痕形成情况,通过Masson染色及酶联免疫吸附法(ELISA)行羟脯氨酸及2种生长因子[血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子β(TGF-β)]定量分析,比较二者之间的差异。结果(1)空白对照组缺损在实验结束时自行愈合,但瘢痕明显;(2)建模后3、7、14、21、28 d标本的大体观察、Masson染色、ELISA均显示APRF组在胶原合成与降解方面均明显优于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论改良型富血小板纤维蛋白在促进软组织愈合中的胶原合成与降解方面能力较优,能够较好地减少瘢痕组织的形成。

富血小板纤维蛋白辅助治疗牙龈退缩的临床效果及患者满意度评价

目的评价和比较冠向复位瓣术单独或联合应用富血小板纤维蛋白(platelet rich fibrin, PRF)治疗MillerⅠ类或Ⅱ类牙龈退缩的临床效果及患者满意度。方法临床上选取MillerⅠ类或Ⅱ类牙龈退缩且有意愿进行手术治疗的患者30例,分为试验组(冠向复位瓣术联合PRF)、对照组(冠向复位瓣术)。在术前、术后3个月、术后6个月记录牙周探诊深度、角化龈宽度、牙龈退缩深度以及根面覆盖率,分析2组的临床疗效,患者填写满意度调查表,并进行分析。结果试验组和对照组在术后3、6个月检查临床指标牙龈退缩深度、角化龈宽度较术前明显好转,差异有统计学意义(P<0.05);术后3、6个月,试验组和对照组2组间角化龈宽度比较,差异有统计学意义(P<0.05);术后3、6个月,2组间牙周探诊深度、牙龈退缩深度、根面覆盖率比较均无统计学差异(P>0.05);术后3、6个月时,2组中的牙周探诊深度与术前相比,差异无统计学意义(P>0.05);试验组患者的满意度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究结果进一步证实了这两种方法对MillerⅠ、Ⅱ类牙龈退缩的治疗均有效,辅助应用PRF可增加术后角化龈宽度,并提高患者满意度。

富血小板纤维蛋白结合冠向复位瓣在牙龈退缩中的应用

目的:评价显微手术中用冠向复位瓣(coronally advanced flap,CAF)联合富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)与单纯使用冠向复位瓣在治疗牙龈退缩(GR)中的应用效果。方法:36例GR病人中,随机选取18例25颗GR患牙进行PRF+CAF(观察组);余18例24颗GR患牙进行CAF(对照组);2组均采用显微手术方法,记录并比较2组病人基线和术后3、6个月的牙周探诊深度(PD)、牙龈垂直向退缩高度(VGR)、角化龈宽度(KTH)、牙龈厚度(GT)、病人舒适度(PCS)、敏感度(HS)、美学指数(PES)以及病人总满意度。结果:2组术前、术后PD、KTH差异均无统计学意义(P>0.05);在根面覆盖上,2组术前、术后VGR比较差异有统计学意义(P<0.01);观察组术前、术后GT比较差异均有统计学意义(P<0.01);病人满意度(包括PCS、HS、PES)术前、术后差异均有统计学意义(P<0.01),特别是HS,病人术后总体比较满意。结论:PRF膜与CAF联合治疗GR可以达到很好的根面覆盖效果,且术后GT及病人满意度比单纯使用CAF具有更突出的优点。

改良型富血小板纤维蛋白在中厚皮片供区创面中的临床应用

选取需中厚皮植皮的80例患者,随机分为A、B、C、D 4组。供皮区分别植入改良型富血小板纤维蛋白(A-PRF)膜(A组)、富血小板纤维蛋白(PRF)膜(B组)、重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(C组)和空白对照组(D组),4组均采用凡士林纱布覆盖加压包扎,比较4组创面愈合时间、术后疼痛、瘢痕增生的情况。3种生物材料皆可促进创面愈合,其中A-PRF的临床效果最佳。A-PRF及PRF可减轻术后疼痛和瘢痕增生,A-PRF临床效果优于PRF。A-PRF可加快中厚皮供区创面愈合,减少瘢痕增生,改善愈后形态,为临床医师选择促进中厚皮供区软组织愈合及再生的生物材料提供新的思路与方法。

富血小板纤维蛋白在整形外科的应用进展

富血小板纤维蛋白(Platelet-rich fibrin,PRF)是新一代的血小板浓缩制品,其制备简便,材料完全来源于自身血液,同时富含各种生长因子和细胞因子,对于加快组织修复,促进组织再生有一定作用。虽然PRF受到越来越多的关注,在口腔科、骨科等有了诸多研究报道,但其在整形外科领域的应用仍较少。本文综述近年来相关文献,介绍PRF的制备方法及其衍生物,并对PRF在整形外科中的应用报道进行总结。

i-PRF联合结缔组织移植瓣治疗MillerⅠ类及Ⅱ类重度牙龈退缩的疗效评价

目的:探究可注射的富含血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin,i-PRF)联合结缔组织移植瓣(Connective tissue graft,CTG)治疗MillerⅠ类及Ⅱ类重度牙龈退缩的疗效及美学效果。方法:选取2018年1月-2019年9月笔者医院收治的50例MillerⅠ类或Ⅱ类重度牙龈退缩患者为研究对象,采用随机数字表法将患者分为试验组和对照组,每组25例(25颗患牙),并分别进行改良冠向复位瓣(Coronally advanced flap,CAF)+CTG+i-PRF和CAF+CTG修复治疗。比较两组患者术前及术后6个月角化龈宽度(KTW)、探诊深度(PD)、牙龈退缩深度(RD)、临床附着水平(CAL)及牙龈厚度(GT),两组患者术后6个月根面覆盖(RC)百分比及完全根面覆盖(CRC)率以及美学效果。结果:术后6个月,两组患者KTW、GT均较术前明显增加,PD、RD及CAL均较术前明显减小,比较差异具有统计学意义(均P<0.05),其中试验组患者KTW明显大于对照组、RD明显小于对照组,比较差异具有统计学意义(均P<0.05);试验组患者术后6个月RC及CRC高于对照组,组间比较无显著性差异(P>0.05);试验组患者术后VAS、粉红美学指数(PES)明显高于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:i-PRF联合CTG在重度牙龈退缩CAF修复中疗效显著,可进一步改善患者KTW、RD,提高美学修复效果。

改良型富血小板纤维蛋白/壳聚糖温敏水凝胶对糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响

目的制备改良型富血小板纤维蛋白(A-PRF)/壳聚糖温敏水凝胶(以下简称复合水凝胶)并探讨复合水凝胶对糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法该研究为实验研究。成功制备具有多孔网状结构及温敏特性的含质量浓度为10、15、20、50、100 g/L A-PRF的复合水凝胶。取6~8周龄雄性SD大鼠,通过腹腔注射链脲佐菌素成功制造糖尿病大鼠模型,并在每只大鼠背部制造4个全层皮肤缺损创面(最终36只大鼠成功造模)。将每只大鼠3个创面分别作为空白组(不进行药物干预)、阳性对照组(滴加重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶)、壳聚糖水凝胶组(滴加壳聚糖水凝胶溶液)。取其中30只大鼠,将每只大鼠剩余的1个创面共30个创面分为10、15、20、50、100 g/L复合水凝胶组,每组6个创面,分别滴加含10、15、20、50、100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液;取剩余6只大鼠,于每只大鼠剩余的1个创面滴加含100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液。伤后14 d,取其中1个创面滴加含100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液的6只大鼠,行苏木精-伊红(HE)染色,观察大鼠心、肝、脾、肺和肾等炎症、出血或坏死情况;伤后10 d,取其中1个创面滴加含15 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液的6只大鼠,采用激光血流成像系统观测4组创面血流灌注量(样本数为6)。伤后7、14 d,计算8组创面愈合率。伤后14 d,取8组创面组织,分别行HE、Masson染色,观察新生上皮形成和胶原生成情况;采用免疫组织化学法检测CD31、血管内皮生长因子A(VEGFA)的阳性表达情况并计算阳性面积百分比;采用蛋白质印迹法检测CD31、VEGFA的蛋白表达;采用实时荧光定量反转录PCR法检测CD31、VEGFA的mRNA表达(样本数均为4)。结果伤后14 d,6只大鼠心、肝、脾、肺、肾中均未观察到明显的炎症、出血或坏死。伤后10 d,15 g/L复合水凝胶组创面血流灌注量明显多于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组(P值均<0.05)。伤后7、14 d,空白组创面愈合率分别为(26.0±8.9)%、(75.0±1.8)%,均分别明显低于阳性对照组、壳聚糖水凝胶组及10、15、20、50、100 g/L复合水凝胶组的(45.8±3.2)%、(49.8±3.7)%、(51.2±2.9)%、(68.5±2.4)%、(68.8±1.5)%、(72.7±2.1)%、(75.0±3.7)%及(79.1±1.9)%、(77.2±1.7)%、(82.3±1.3)%、(89.6±1.9)%、(89.8±1.3)%、(87.3±1.1)%、(87.9±1.3)%(P<0.05);阳性对照组、壳聚糖水凝组、10 g/L复合水凝胶组创面愈合率均明显低于15、20、50、100 g/L复合水凝胶组(P<0.05)。伤后14 d,15、20、50、100 g/L复合水凝胶组创面上皮化程度较其他4组创面更高、新生微血管情况更好,胶原数量更多且排列更整齐。伤后14 d,阳性对照组创面CD31、VEGFA及壳聚糖水凝胶组创面VEGFA阳性面积百分比均明显高于空白组(P<0.05),10 g/L复合水凝胶组创面VEGFA阳性面积百分比明显高于空白组、壳聚糖水凝胶组、阳性对照组(P值均<0.05),15、20、50、100 g/L复合水凝胶组创面CD31、VEGFA阳性面积百分比均明显高于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组、10 g/L复合水凝胶组(P<0.05)。伤后14 d,壳聚糖水凝胶组、阳性对照组、10 g/L复合水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA蛋白和mRNA表达均明显高于空白组(P<0.05),10 g/L复合水凝胶组创面组织中VEGFA蛋白表达明显高于阳性对照组(P<0.05)和CD31、VEGFA mRNA表达均明显高于阳性对照组、壳聚糖水凝胶组(P<0.05),15、20、50、100 g/L复合水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA蛋白和mRNA表达均明显高于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组、10 g/L复合水凝胶组(P<0.05),壳聚糖水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA的mRNA表达均明显低于阳性对照组(P<0.05)。结论复合水凝胶生物安全性高,可改善创面血流灌注,有效促进创面组织中血管和胶原生成,从而促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合;15 g/L为复合水凝胶中A-PRF的较优使用质量浓度。