HPLC法同时测定14个产地娑罗子中4种七叶皂苷

目的建立HPLC法同时测定14个产地娑罗子Aesculi Semen中七叶皂苷A、B、C、D的含有量。方法娑罗子甲醇提取液的分析采用Waters Xbridge C18柱(4. 6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0. 2%磷酸);体积流量1. 0 mL/min;检测波长220 nm;柱温25℃。用DPS、EXCEL软件进行数据分析。结果七叶皂苷A、B、C、D分别在1. 0～10μg/mL (R^2=0. 999 4)、1. 0～10μg/mL (R^2=0. 999 5)、1. 0～10μg/mL (R^2=0. 999 6)、0. 2～2. 0μg/mL(R^2=0. 999 6)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为100. 01%、101. 49%、100. 73%、99. 65%,RSD分别为2. 11%、0. 68%、0. 69%、1. 54%。14个产地间娑罗子中七叶皂苷类成分含有量存在显著(P <0. 05)或极显著(P <0. 01)差异,七叶皂苷A含有量均满足2015年版《中国药典》规定标准,其中陕西、山西、河南产娑罗子中七叶皂苷类成分含有量较高,浙江产娑罗子含有量较低;七叶皂苷含有量与纬度、海拔呈正相关关系,与经度、种子纵径、种子横径呈负相关关系。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于娑罗子的质量控制。

七叶皂苷A～D体外转化规律研究

目的建立HPLC法同时测定七叶皂苷A^D量的方法,考察不同因素水平影响下七叶皂苷A^D的体外转化规律,并优化出最佳转化条件,为调控生产中七叶皂苷A^D的比例提供参考。方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液(34∶66)为流动相,柱温为35℃,体积流量为1.0 m L/min,检测波长为200 nm,外标法定量;以七叶皂苷A^D的转化率及有关物质的量为指标,通过单因素实验设计,考察p H值、温度、时间3个因素对七叶皂苷A^D体外转化的影响趋势,再采用中心组合设计-响应面法优选转化条件,利用Design Expert 8.0.5软件分析预测最佳转化条件并进行验证试验。结果七叶皂苷A^D分别在0.39~3.49 mg/m L(r=0.999 5)、0.28~2.55 mg/m L(r=0.999 5)、0.19~1.67 mg/m L(r=0.999 7)、0.07~0.59 mg/m L(r=0.999 7)与峰面积呈良好的线性关系;单因素实验表明,p H值、温度、时间对七叶皂苷A和B、C和D转化率的影响呈现相似的趋势,在p H值5.0~10.0,温度45~85℃,时间0.25~8 h时,七叶皂苷A、B部分转化成七叶皂苷C、D,其他条件下七叶皂苷A^D均转化为有关物质;中心组合设计-响应面法研究得到最佳转化条件为p H值6.9,温度54℃,时间7.4 h,在此条件下,七叶皂苷C、D转化率的综合评分为11.50%,与预测值的偏差<5%。结论不同p H值、温度、时间影响下,七叶皂苷A^D的体外转化呈现出一定的规律,响应面法优选出的最佳转化条件稳定可行,可为调控生产中七叶皂苷A^D的比例提供科学的依据。