牛源金黄色葡萄球菌生物被膜与毒素基因检测及agr分型

旨在对牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的生物被膜、耐药性、毒素基因和agr基因型进行研究,并分析agr基因型与毒素基因之间的相关性。分别用微量滴定板法、药敏纸片法和PCR对S.aureus的生物被膜、耐药性和毒素基因进行检测,用多重PCR对S.aureus进行agr分型。结果表明,336株牛源S.aureus均能形成生物被膜,其中,形成中等(++)和强(+++)生物被膜的S.aureus分别占52.1%和47.9%。药敏试验结果显示,S.aureus对青霉素耐药最为严重,耐药率达91.7%,其次是红霉素、卡那霉素、克林霉素和庆大霉素,耐药率分别为89.6%、72.9%、66.7%和60.4%,而所有S.aureus对呋喃妥因和利奈唑胺均表现为敏感。PCR检测结果显示,黏附素基因fnbA检出率最高,达99.7%,其次是icaD、icaA、clfA和cna,检出率分别为98.2%、89.6%、86.0%和56.0%,bap基因检出率最低,为14.6%。肠毒素基因sea的检出率为26.5%,其次是seb(8.3%)和sec(6.8%),毒素基因tst的检出率占8.3%。分型结果显示,agrⅠ型S.aureus是主要的流行菌株,占77.1%,agrⅡ、agrⅢ和agrⅣ型S.aureus流行率分别为14.0%、4.8%和2.1%。统计分析结果表明,agrⅠ型S.aureus更具有携带多种毒素基因的潜力,而agrⅣ型S.aureus无毒素基因携带潜力。综上表明,牛乳腺炎性S.aureus对常见的抗菌药物耐药严重,毒素基因分布多样,agrⅠ型是奶牛乳腺炎性S.aureus主要的基因型,且具有携带多种毒素基因的能力,其潜在威胁应引起重视。

内蒙古地区样本MRSA和MSSA临床分离株agr分型特征研究

目的:探究金黄色葡萄球菌附属基因调节子(agr)在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)临床株中的分布特征.方法:以50株MSSA株和40株MRSA株作为研究对象,采用多位点序列分型方法(MLST)检测这些菌株的ST型,进一步采用PCR方法检测agrⅠ~Ⅳ型基因在2组金黄色葡萄球菌以及不同ST型金黄色葡萄球菌中的分布.结果:MLST结果显示,MRSA株主要为ST-239型(36株,90.0%),MSSA主要为ST-5型(10株,20.0%),其次为ST-7型(9株,18.0%).90株金黄色葡萄球菌中agr-Ⅰ基因占86.7%(78株),agr-Ⅱ基因占24.4%(22株),agr-Ⅲ基因占3.3%(3株),agr-Ⅳ基因占3.3%(3株).MRSA株主要携带agr-Ⅰ基因(97.5%/78.0%,P<0.05),而agr-Ⅱ基因携带率明显低于MSSA,差异具有统计学意义(P<0.05).Agr基因调控的毒力基因中,hla和fnbA基因表达率均为100%(90株,90/90),sea基因表达率为47.8%(43株,43/90).结论:MRSA株和MSSA株agr基因分型特征差异显著,agr-I型基因在MRSA株中呈优势表达,其对MRSA株毒力调控基因表达的影响机制值得进一步研究.

生鲜猪肉中金黄色葡萄球菌的耐药特征、毒力基因及agr分型

为研究市售生鲜猪肉中金黄色葡萄球菌的污染状况,分两个季节从雅安市雨城区采集351份生鲜猪肉样本,采用K-B法检测分离株的耐药性,PCR技术对分离株的mecA基因、传统肠毒素基因、中毒休克综合征毒素基因、杀白细胞毒素基因、溶血素基因和脱皮毒素基因进行分析和agr分型。结果表明,夏、冬季总体检出率分别为15.28%和28.69%;分离株对青霉素、四环素、红霉素的耐受性最强;5种传统肠毒素的检出率为80%,sea、sed的检出率均为4.11%,seb、sec的检出率均为12.33%;中毒休克综合征毒素基因的检出率为15.07%,溶血毒素基因检出率最高,杀白细胞毒素基因和脱皮毒素基因检出率最低。分离株以agrⅠ型为主(50.68%),未检测出agrⅣ。综上表明,该地区生鲜猪肉中金黄色葡萄球菌的污染较为严重,分离株呈多重耐药谱,毒力基因分布多样,部分菌株致病性较强,具有的潜在危险应引起重视。

牛源MRSA新疆流行株毒力基因检测及Agr分子分型研究

为了解新疆地区引起奶牛乳房炎和子宫内膜炎的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)流行株的分子特征及毒力基因分布状况,对采集的221份样品进行金黄色葡萄球菌的分离,采用生化试验和分子生物学方法进行了鉴定,通过药敏试验对MRSA进行判定;应用多重PCR方法对MRSA新疆流行株进行Agr基因分型研究,并检测了MRSA流行株的部分毒力基因。结果表明,在新疆地区71株金黄色葡萄球菌临床分离株中共检出13株MRSA,检出率为18.3%;13株MRSA检出hld、luk ED和tst这3种毒力基因,其中3株检出hld,10株检出luk ED,13株检出tst;不同地区来源的13株MRSA均检出AgrⅠ和AgrⅣ2种Agr型。本研究表明新疆地区MRSA流行株的毒力基因以luk ED和tst为主,Agr分型以AgrⅠ和AgrⅣ基因型为主。

tst和pvl基因阳性金黄色葡萄球菌流行情况及分子特征

目的了解中毒性休克综合征毒素-1的tst基因和杀白细胞素的pvl基因阳性金黄色葡萄球菌(金葡菌)流行情况及其附属基因调节子(agr)和葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)型别。方法收集上海市及浙江省共7所医院的916株金葡菌,聚合酶链反应(PCR)检测tst、pvl、mec A和mec C基因,并对tst或pvl基因阳性菌株作agr及SCCmec(针对甲氧西林耐药金葡菌,MRSA)遗传学分型。结果 916株金葡菌中tst阳性208株,阳性率22.7%;pvl阳性35株,阳性率3.8%;mec A阳性665株(MRSA),未检测到mec C基因。在665株MRSA中,tst阳性198株(29.8%),agr和SCCmec分型均以2/Ⅱ型为主,分别占97.0%和94.4%;pvl阳性14株(2.1%),agr分型以1型(85.7%)为主,SCCmec分型以Ⅲ型(42.9%)和Ⅳa型(28.6%)为主。在251株甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)中,tst阳性10株(4.0%);pvl阳性21株(8.4%)。tst阳性率在MRSA菌株中较MSSA中高,而pvl检出率则在MSSA菌株中较高,且浙江地区MRSA中pvl的阳性率高于上海菌株,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 tst基因在MRSA菌株中阳性率较MSSA高;pvl阳性率相对较低,但因其与某些严重的金葡菌感染相关,临床应予以关注。