一株合欢枯萎病拮抗菌的分离鉴定及盆栽防治试验

合欢枯萎病是导致多年生合欢衰弱和死亡的主要因素之一,目前尚无有效的防治手段。本研究通过平板对峙法和含毒培养基法分离筛选健康合欢植株根际土壤中的潜在拮抗菌,结合形态学特征和双基因系统发育分析对拮抗菌进行鉴定,并通过盆栽试验验证拮抗菌株对合欢枯萎病的防治效果。结果表明,经过初筛得到11株对合欢枯萎病具有潜在拮抗作用的菌株,其中菌株5-2的抑制作用最为显著。对峙培养6d,菌株5-2对尖孢镰刀菌Fusariumoxysporum和腐皮镰刀菌Fusariumsolani的抑制率分别为76.88%和84.08%,两种病原菌在含6.67%拮抗菌孢悬液(孢子浓度1.0×10^(7)个/mL)的平板上生长均受到显著抑制。显微观察发现菌株5-2可缠绕病原菌菌丝体并寄生生长,盆栽试验表明菌株5-2对尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌具有优良的拮抗作用,防治效果达78.26%和57.89%。通过形态学和ITS-TEF1双基因系统发育分析,菌株5-2鉴定为康宁木霉Trichodermakoningii。综上所述,菌株5-2对合欢枯萎病具有良好的防治效果,可作为合欢枯萎病生防菌剂的候选菌株资源。

中药合欢皮研究概况

查阅国内外文献 39篇 ,综述近年来有关合欢皮化学成分与药理活性方面的研究进展 ,为传统中药合欢皮的开发利用提供较为详尽的资料参考。

碱胁迫对合欢种子萌发及幼苗生理指标的影响

为探求碱胁迫影响合欢幼苗生长的生理机制,采用可见分光光度法测定合欢幼苗体内丙二醛含量(MDA)、可溶性糖含量、脯氨酸含量及过氧化氢酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性等生理指标.结果表明,合欢树种的耐碱能力较强,半致死浓度为78.30 mmol?L-1,致死浓度为147.33 mmol?L-1.随着Na2CO3处理浓度的增加,种子萌芽率、发芽指数、活力指数逐步下降,幼苗叶片中MDA、膜相对透性、脯氨酸和可溶性糖含量增加,SOD、POD活性呈先升后降的变化趋势,且随着胁迫时间的延长,MDA、膜相对透性逐步增加,脯氨酸、可溶性糖含量、SOD、POD活性变化无规律.在Na2CO3胁迫初期,膜脂过氧化作用成为主要破坏因素,随着胁迫时间的延长,膜脂过氧化作用受碱胁迫效应的影响逐步降低,而对质膜透性破坏的影响加强;POD、SOD受胁迫效应的影响较小,成为次要保护因素;可溶性糖、脯氨酸调节渗透压成为碱胁迫初期的主要保护因素;随着胁迫的发展,可溶性糖受胁迫效应的影响逐步降低,而对脯氨酸的影响不断加强.

合欢花抗抑郁作用的药理实验研究初探

目的研究合欢花的抗抑郁作用。方法采用小鼠强迫游泳实验和小鼠悬尾实验研究合欢花水提物的抗抑郁作用。结果在小鼠强迫游泳实验和小鼠悬尾实验中 ,合欢花水提物 (生药 2～ 1 8g/kg)能明显缩短两种“行为绝望”模型小鼠的不动时间 ;在开场实验中 ,减少小鼠自发活动。结论合欢花水提物对“行为绝望”

中药合欢花抗抑郁活性部位的初步筛选研究

目的合欢花抗抑郁作用有效部位的筛选。方法采用小鼠强迫游泳药理实验对合欢花水提物和醇提物及其各萃取部位进行抗抑郁活性筛选。结果合欢花醇提物与水提物的石油醚和醋酸乙酯萃取部位与对照品安拿芬尼类似,均能显著缩短小鼠游泳的不动时间。结论合欢花醇提物与水提物及其石油醚和醋酸乙酯萃取部位对“行为绝望”动物模型有较明显的抗抑郁作用,提示非极性成分及中等极性成分可能为合欢花抗抑郁作用的活性物质。

植物源抗烟草花叶病毒活性物质的初步筛选

利用半叶枯斑法,测定了13科18种植物蛋白粗提液对烟草花叶病（TMV）的抑制效果。结果表明,不同植物蛋白粗提液对TMV侵染心叶烟的抑制效果存在差异,6种植物蛋白粗提液对TMV的抑制效果达到50%以上,其中菠菜和合欢最高,分别达到了97.44%和96.92%。进一步通过（NH4）2SO4盐析,对菠菜和合欢蛋白粗提液抗病毒活性成分进行了初步分离,并测试（NH4）2SO4盐析的不同蛋白组分对TMV的抑制效果。结果显示,菠菜蛋白粗提液盐析后的两个蛋白组分都表现出很高的抗病毒活性,而合欢蛋白粗提液只在40%~80%饱和度盐析的蛋白组分具有较强的抗病毒活性。

可见分光光度法测定碱胁迫中合欢幼苗的生理指标

为检测合欢幼苗的抗碱胁迫能力,文章试验利用可见分光光度法测定了碱胁迫下合欢幼苗体内的丙二醛、可溶性糖、脯氨酸含量及POD、SOD活性,分析这些生理指标在不同处理浓度、不同处理时间下的变化规律,探求碱胁迫下合欢幼苗的抗逆生理机制。随着Na2CO3处理浓度的增加,幼苗叶片中MDA和可溶性糖含量,均呈递增趋势,当处理浓度低于75mmol.L-1,两者含量变化较平缓,而浓度高于75mmol.L-1时,则含量急剧增加,各处理间差异显著;脯氨酸含量也呈递增趋势,当处理浓度低于100mmol.L-1,变化较平缓,浓度高于100mmol.L-1时,含量则急剧增加,各处理间差异显著;SOD和POD活性变化趋势一致,都呈单峰曲线变化,但两者活性最大值所对应的处理浓度不同,分别为50和75mmol.L-1。此外,随着胁迫时间的延长,同一浓度处理的丙二醛含量逐步增加,而脯氨酸、可溶性糖含量、SOD、POD活性变化较复杂,无明显规律性。

HPLC测定合欢花中槲皮苷的含量

目的测定合欢花中槲皮苷的含量。方法采用高效液相色谱法，Agilent-C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-0．1％磷酸溶液（25：75），检测波长为256nm，流速为1．0mL·min^-1。结果槲皮苷进样量在0．1204—2．408μg内呈良好的线性关系，平均回收率为99．2％，RSD=1．3％（n=6）。结论该方法快速简便，稳定可靠，专属性强。

壳聚糖絮凝法精制合欢皮多糖水提液的工艺

采用壳聚糖对合欢皮总多糖的絮凝纯化工艺进行研究。通过单因素和正交试验,得到优化的工艺条件:壳聚糖用量为生药量0.8 mL/g,絮凝温度35℃,絮凝时间4 h,药液浓缩比(质量体积比)为1∶10(g/mL),在此条件下,多糖保留率、脱蛋白率和多糖纯度分别为91.23%、22.26%和47.27%,优于传统的水提醇沉法。

合欢皮多糖提取工艺优化及BP神经网络模型

优化合欢皮多糖微波辅助提取工艺和建立BP神经网络模型。以多糖得率为指标,选取微波辐射时间、液固比和溶剂pH为自变量,采用Box-Behnken试验设计,结合响应面分析法(RSA),建立回归方程;在此基础上,建立BP神经网络(BPNN)模型。优化条件下的总多糖实际得率为3.648%,BPNN模型相对误差为1.042%,小于Box-Behnken设计模型相对误差(1.452%)。该BPNN模型预测性能良好,对工艺研究的开发具有一定的实用价值。

合欢内生菌H8的分离、鉴定及其抗菌代谢物质研究

为了寻找结构新颖，高效的农用抗菌活性物质，以药用植物合欢叶为试验材料，分离筛选出一株内生细菌H8。采用对峙培养法与琼脂扩散法进行抑菌试验，结果表明：H8菌株、发酵液、无菌发酵液及其活性组分对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌等6种供试植物病原菌均具有较强的抑菌活性，抑菌带宽度可达20．5～34．5 mm。经形态观察、生理生化试验和16S rDNA系统进化分析，鉴定其为死谷芽孢杆菌（Bacillus vallismortis）。采用液-液萃取、薄层层析及硅胶柱层析，对内生菌H8的代谢液提取分离，得6个组分，对抑菌活性高的2个组分硅烷化衍生后，经GC-MS检测，确定代谢液中有脂肪酸、芳香酸、环二肽等28种活性化合物。

反相高效液相色谱法测定合欢不同部位中槲皮苷的含量

目的建立合欢不同部位中槲皮苷的含量测定方法。方法样品用甲醇超声提取40min，提取物用流动相溶解。Diamonsil C18柱（4．6mm×250mm），甲醇-水-冰醋酸（45：55：1．5）为流动相，检测波长为256nm。结果槲皮苷在2．545—20．36μg／ml浓度范围内线性关系良好（r=0．9999），平均加样回收率为98．09％，RSD为O．5％。结论此方法简便可靠，可为合欢花药材的质量控制提供借鉴。

三种预处理对合欢根尖细胞有丝分裂的影响

对合欢根尖细胞预处理方法的比较研究结果表明:低温处理可以促进中期染色体的增加,8-羟基喹啉（8-HQ）和对二氯本（PDB）水溶液处理的根尖能产生许多类型的染色体畸变。

超微粉配方颗粒加味柴胡舒肝散对慢性应激性抑郁模型大鼠行为学及HPA轴的影响

目的:探讨加味柴胡疏肝散对慢性应激加孤养抑郁模型大鼠行为学及下丘脑-腺垂体-肾上腺皮质(HPA)轴功能的影响。方法:采用慢性不可预知应激刺激加孤养复制雄性大鼠抑郁模型(21 d)。将成模动物随机分为模型组、氟西汀组、加味柴胡疏肝散超微粉高、中、低剂量组,共5组,每组10只;另取10只正常雄性大鼠作为空白对照组。所有大鼠在造模后第21天开始给药,分别口服灌胃等体积的生理盐水(空白对照组、模型组)或氟西汀(2.1 mg/kg)及加味柴胡疏肝散超微粉药液(生药8.0 g/kg、4.0 g/kg、2.0 g/kg),连续21 d。选用旷场实验得分、动物体重、糖水消耗量等指标衡量各组大鼠行为学改变,采用酶联免疫法检测各组动物药后21 d时血浆CRH及ACTH的含量。结果:加味柴胡舒肝散各组大鼠抑郁样行为显著改善,血浆CRH及ACTH浓度比模型组显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:加味柴胡疏肝散超微粉配方颗粒可通过抑制HPA轴的功能从而起到抗抑郁的作用。

合欢组织培养及快速无性繁殖研究

以合欢叶总柄为材料,在无菌接种箱内,对材料进行表面消毒,然后,将总柄切成小段,分别接于(1),(2),(3)MS号的三种培养基上,对其进行愈伤组织诱导和芽的分化,当愈伤组织、芽形成后,再选择愈伤组织松散、芽生长一致的组块,分别转接到(4),(5),(6)号改良MS培养基上,进行芽苗增殖和壮苗筛选培养,当选出芽分化率高,苗多而壮的最佳培养基后,最后,选择生长-致的无根苗,转接到(7),(8),(9)号三种改良MS生根培养基上,筛选出适于最佳无根苗的生根培养基.经实试验结果表明:(2)号MS培养基,是诱导愈伤组织诱导快,分化率高的培养基;(5)号改良MS培养基,是出芽,增苗,壮苗最佳培养基;(8)号改良MS培养基,是较好的生根培养基,它生根快,愈伤组织小,根较多而壮,是本次实验较好的生根培养基.

恶霉灵在合欢离体快速繁殖中的应用

以合欢的子叶、下胚轴、根为外植体 ,接种于不同浓度恶霉灵 (HMI)及其它不同激素配比的改良培养基上 ,观察恶霉灵对合欢离体快速繁殖的影响。研究结果表明 ,恶霉灵对以上三种外殖体无诱导愈伤组织的作用。在单独加有 3mg/LHMI和加有 3mg/LHMI +BA( 0 .5mg/L)+NAA( 0 .0 1mg/L)的MS培养基上能诱导愈伤组织芽的分化 ,并对离体单株有增殖壮苗作用 ,效果优于单加BA和KT。恶霉灵浓度为 0 .3mg/L时能诱导再生苗生根 ,且具有促进根毛产生的作用 。

合欢枯萎病病原菌的生物学特性研究

从培养基种类、温度、光照、pH、微量元素及不同氮源和碳源等方面对合欢枯萎病致病菌的生物学特性影响进行了研究。结果表明：该菌最适生长培养基为PDA培养基和PSA培养基；菌丝生长的温度范围在25-35℃，最适温度为30℃，分生孢子萌发的最适温度为30℃，该菌的致死温度为60℃；菌丝在pH6～12之间均能生长，以pH6时分生孢子萌发率最高；光照对菌丝生长无明显影响，黑暗条件有利于病菌产孢；病菌对蔗糖和可溶性淀粉利用较好，对硝酸钠和硝酸钙利用较好；微量元素中硫酸锰有利于菌丝生长，硫酸亚铁能够较好地促进分生孢子的萌发。

正交设计法优选合欢花黄酮的乙醇浸提工艺

目的 :采用正交设计法对合欢花黄酮浸提工艺参数进行优化。方法:采用分光光度法测定黄酮得率。在单因素试验的基础上,采用正交试验法,考察乙醇浓度、料液比、浸提温度、浸提时间对合欢花黄酮得率的影响,对浸提条件进行优化。结果:各因素对合欢花黄酮得率的影响程度依次为:料液比>乙醇浓度>时间>温度。最佳工艺条件为:料液比1∶20,乙醇浓度60%,浸提时间2 h,浸提温度70℃,合欢花黄酮得率为2.31%。结论:该工艺稳定、合理、可行,适用于工业化生产。

榆林市2种引栽绿化树种的抗寒性分析

以榆林市近年来引进的多年生木本植物合欢和紫荆为材料,研究了冬季自然降温条件下,其1年生休眠枝条内游离脯氨酸含量、丙二醛含量以及过氧化物酶活性的变化,并对2个树种的抗寒性进行了比较。结果表明,自然降温过程中,2个树种中脯氨酸含量和丙二醛含量随着气温的变冷而升高,当温度达到最低值-20℃时,脯氨酸含量达到最大值,其中,合欢为19.99μg/g,紫荆为10.41μg/g;合欢和紫荆中丙二醛含量达到最大值,分别13.46,22.73μmol/g;试验过程中过氧化物酶活性与温度呈现出负相关关系,当温度降至最低值-20℃时,2种树种中过氧化物酶活性达到最大值,分别为30.01,16.88 U/(g·min)。在整个试验过程中,同一温度条件下,合欢枝条中脯氨酸含量和过氧化物酶活性均大于紫荆,丙二醛含量则小于紫荆。综合分析得出,合欢抗寒性大于紫荆。

合欢颗粒治疗抑郁症和提高睡眠质量的临床及药物研究

目的:观察合欢颗粒的临床疗效。方法:收集抑郁症病例60例,随机分为两组。治疗组30例,冲服合欢颗粒治疗;对照组30例,口服刺五加片治疗。两组同时服药6周后疗效比较。结果:治疗组痊愈16例,显著进步8例,进步3例,无效3例,总有效率为90%;对照组痊愈11例,显著进步7例,进步4例,无效8例,总有效率为73.33%,经χ2检验,两组有显著性差异(P<0.05)。结论:合欢颗粒具有抗抑郁、改善睡眠的作用,治疗抑郁症合并失眠具有显著疗效。