Antitumor Activity of the Ganoderma Lucidum Spore Alcohol Extract in Vitro

Several cancer cell lines(epithelioma cells or leukemia cells)from human being or mouse were first used to study the antitumor activity of the Ganoderma lucidum spore alcohol extract(GLSAE)in vitro by the MTT test A comparision was made between the sporodermbroken(SB)and sporoderm nonbroken(SN)GLSAE It was showed that both GLSAE SB and GLSAE SN could inhibit the proliferation of these cancer cells,but the activity of GLSAE SB was much higher than that of GLSAE SN These results suggested that Ganoderma lucidum spore could probably be used for tumor treatment

不同干燥方式对灵芝子实体干燥品质的影响

采用热风干燥、热泵干燥、微波热泵耦合干燥、热泵梯度升温干燥、热泵梯度降温干燥等干燥方式,探究不同干燥方式对灵芝子实体感官、营养及理化品质的影响。结果表明,微波12 min+60℃热泵干燥脱水效率最高,较单一热风干燥至少缩短180 min;微波4 min+60℃热泵干燥色泽保持相对较好;微波12 min+60℃热泵干燥粗多糖含量最高,较60℃热风干燥提高了63.26%;热泵梯度降温干燥对DPPH自由基的清除能力最强;60℃热泵干燥水溶性指数最高。从提高生产效率和营养成分保留率角度考虑,优先选择微波12 min+60℃热泵干燥方式;从产品良好色泽角度考虑,优先选择微波4 min+60℃热泵干燥方式;从产品良好功能活性角度考虑,优先选择热泵梯度降温干燥、60℃热泵干燥方式,为灵芝子实体干燥方式的选择提供理论依据。

不同出芝方式对灵芝农艺性状及有效成分含量的影响

【目的】研究不同出芝方式对灵芝农艺性状及子实体有效成分粗多糖、总三萜化合物含量的影响,探索适合吉林延边地区大棚代料栽培灵芝的方法。【方法】以两个赤灵芝菌株GL1和GL2为研究材料,采用层架摆放和直立地摆等两种出芝方式,在大棚内进行代料栽培试验。【结果】在大棚内以层架摆放栽培的灵芝子实体,表现为菌盖较大、菌柄较短、分枝少的特点,而直立地摆栽培的灵芝子实体菌柄较长、分枝较多;直立地摆的灵芝产量和干芝转化率均高于层架摆放;层架摆放子实体的粗多糖含量高于直立地摆,总三萜含量低于直立地摆。【结论】综合分析,不同出芝方式对灵芝的农艺性状和子实体有效成分含量影响显著,因此在进行灵芝栽培时应根据需求选择最佳的出芝方式。

袋料栽培灵芝子实体质构品质差异分析

以不同菌株灵芝子实体为试材,采用质构仪在5%形变模式下对获得的不同灵芝子实体进行全质构(texture profile analysis, TPA)测试,运用SPSS 26.0软件,进行组间灵芝样品质构差异分析,探讨不同采收期、不同菌株等对灵芝质构的影响,进而利用逼近理想解(technique for order preference by similarity to an ideal solution, TOPSIS)方法对质构物理特性进行综合比较,研究了不同菌株的灵芝子实体品质差异,以期为灵芝食用的栽培育种和生产加工提供参考依据。结果表明:不同采收时间的TPA指标存在一定的差异,说明采收时间对灵芝子实体的硬度、脆度、弹性、黏聚性、胶着性、咀嚼性、回复性有一定的影响。采用TOPSIS对该试验不同菌株的灵芝样本进行质构品质排名的结果发现,编号为GL226菌株的品质是该试验所选灵芝样品中品质最好的灵芝菌株,可作为后期相关生产加工和栽培的专用菌株。

灵芝子实体多糖提取工艺优化及对哮喘小鼠改善作用

为优化灵芝子实体多糖提取工艺并初步研究其对哮喘小鼠的改善作用,以灵芝子实体多糖提取率为响应值,在单因素试验基础上,采用响应面法优化多糖提取工艺条件。通过卵清蛋白诱导哮喘小鼠模型,以地塞米松(5 mg/kg)为阳性对照,考察低、中、高剂量灵芝多糖(50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg)对哮喘小鼠肺组织病理形态、肺泡灌洗液白细胞及细胞分类计数以及白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。结果表明,灵芝多糖最优提取工艺为:超声功率400 W,超声时间40 min,料液比1∶15(g∶mL)。在此最佳工艺条件下,多糖提取率为(3.22±0.04)%。与模型组相比,高剂量灵芝多糖组可显著改善哮喘小鼠肺组织血管和支气管壁明显增厚、大量炎性细胞浸润等病理变化,肺泡灌洗液中白细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞数量以及IL-6、TNF-α的水平分别降低至(34.96±5.81)×10^(4) CFU/mL、(25.61±3.59)×10^(4) CFU/mL、(4.67±1.59)×10^(4) CFU/mL、(3.06±1.131)×10^(4) CFU/mL、(82.62±14.07)pg/mL、(208.16±19.60)ng/L。结果显示灵芝多糖提取物可改善哮喘小鼠的炎症反应。

不同LED光质对莞香灵芝子实体生长发育的影响

目的研究5种LED光质对莞香灵芝子实体生长发育及其主要活性成分的影响。方法将不同光质的LED光源设为光照条件(红、蓝、黄、绿、白光为处理组,黑暗为黑暗组),对灵芝子实体进行培养,观察其生长速率、形态、多糖含量及三萜含量。结果红、绿、黄、白、蓝5种光质处理组的灵芝子实体菌盖直径和干重均大于黑暗组(P<0.01或0.05),黄光组的子实体干重最大(P<0.01或0.05),灵芝子实体出芝数和菌盖厚度与黑暗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在灵芝的5个生长时期,蓝光组的多糖含量均明显高于其他各组(P<0.01);现蕾期、开伞期、弹孢前期,黄光组多糖含量高于除蓝光组外的其他各组(P<0.01);弹孢后期,白光组的多糖含量显著高于除蓝光组外的其他各组(P<0.01)。芝盖形成期,红光组的灵芝三萜含量低于其他各组(P<0.01);弹孢前期,绿、白、红和蓝光组的灵芝三萜含量高于黑暗组(P<0.01或0.05)。现蕾期、开伞期和弹孢后期,各组灵芝三萜含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论5种LED光质均影响莞香灵芝子实体的生长发育及其主要活性成分的生成,应根据各光质对灵芝子实体影响效果不同的特点合理安排光照。

灵芝三萜成分分析

目的 建立灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体三萜成分的HPLC含量测定方法。方法 以赤芝孢子酸A(ganosporericacidA ,1) ,赤芝酸A(lucidenicacidA ,2 ) ,灵芝酸B(ganodericacidB ,3)和灵芝酸C(ganodericacidC ,4 )为对照品 ;色谱柱 :反相C1 8;流动相 :乙腈 水 (37∶6 3) ;流速 :1 0mL·min- 1 ;检测波长 :UV 2 5 4nm。结果 进样量在 0 2～ 1μg有良好的线性关系 ,(1) ,(2 ) ,(3)和 (4)的加样回收率分别为 10 0 9% ,10 1 2 % ,10 1 3%和 10 1 7%。 结论 本法快速、简便、灵敏和分离度好 ,适用于灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体及相关制剂的三萜类物质检查和含量测定。

不同品种灵芝中三萜类化合物的比较研究

本研究利用HPLC对同一灵芝菌种不同生长阶段及不同品种灵芝子实体中三萜类化合物的含量和图谱进行了分析。结果表明在液体发酵 7天左右的灵芝菌丝体中灵芝三萜类化合物的含量极低 ,而不同生长阶段的灵芝子实体中的三萜类化合物的变化较小 ,孢子粉中三萜类化合物的含量较子实体中低。不同品种的灵芝子实体中三萜类化合物的种类和含量存在差异 。

灵芝子实体和菌丝体的提取物及其各纯化组份生物活性的比较

从不同品种的灵芝中筛选出了多糖含量最高的菌株GL2为材料,利用柱层析技术从子实体和菌丝体提取物中分离得到多个组分。实验发现子实体组分P3,P31及P32对人白血病细胞株K562的生长有明显地抑制作用,这三个组分中只有P32对另一白血病细胞株HL-60有抑制作用。免疫活性测试的结果显示子实体各组分在刺激小鼠脾淋巴细胞,T和B细胞的增殖,提高人外周血中NK细胞杀伤活性方面比菌丝体的作用强;进一步的实验发现子实体与菌丝体相应组分在刺激人外周血中的T和B淋巴细胞增殖方面的活性差异不大。子实体和菌丝体提取物各组份均可剂量依赖型的促进PBMC分泌TNF-α。菌丝体提取物各组分对TNF-释放量的影响在低浓度时与子实体各组份相当,在高浓度时要明显好于赤芝子实体提取物各组分。

赤芝子实体中三萜化学成分的研究

自赤芝［Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（Ｆｒ．）Ｋａｒｓｔ］的二氯甲烷溶解部分分离得到一个新的三萜内酯化合物，命名为灵芝内酯（ｇａｎｏｌａｃｔｏｎｅ）。根据光谱（ＵＶ，ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ和２ＤＮＭＲ）解析，确定其结构为Ⅰ式。同时还从赤芝子实体中分到三个已知化合物，即灵芝醇Ａ（ｇａｎｏｄｅｒｉｏｌＡ，Ⅱ），灵芝醇Ｂ（ｇａｎｅｄｅｒｉｏｌＢ，Ⅲ）和灵芝三醇（ｇａｎｏｄｅｒｍａｔｒｉｏｌⅣ）。

灵芝三萜类化合物的体外抗肿瘤活性研究

目的研究灵芝三萜类化合物在不同肿瘤细胞上的抗肿瘤活性。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测3种灵芝三萜化合物对5种肿瘤细胞的抑制能力,绘制抑制曲线,并计算IC50,反映化合物的细胞毒活性。结果体外实验显示,3种灵芝三萜类化合物单体对5种肿瘤细胞表现出不同程度的抑制作用,其中灵芝酸Y的抑制作用比较强,对肺癌细胞H460的IC50为22.4μmol/L,其次是7-oxo-ganoderic acid Z2,IC50为43.1μmol/L。3种化合物灵芝酸Y、7-oxo-ganodericacid Z2和ganoderon B对其他被测细胞株未显示活性或活性很弱。结论灵芝酸Y对肺癌细胞H460显示了较强的抑制活性,7-oxo-ganoderic Z2对肺癌细胞H460显示了一定的抑制活性,且抑制作用具有剂量依赖性。灵芝酸Y和7-oxo-ganoderic Z2的抗肺癌作用有待于进一步深入研究。

灵芝三萜酸改善小鼠睡眠作用研究

目的:研究灵芝三萜酸对小鼠睡眠行为的影响。方法:将50只ICR雄性小鼠分为5组,分别为溶剂对照组、地西泮组、灵芝三萜酸高剂量组(T100 mg/kg)、灵芝三萜酸中剂量组(T50 mg/kg)、灵芝三萜酸低剂量组(T25 mg/kg)。各试验组每天经口给予5%吐温80、2.5 mg/kg地西泮和不同剂量的灵芝三萜酸,30 d后运用直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验评价灵芝三萜酸对小鼠睡眠的影响。结果:灵芝三萜酸灌胃给予30 d,对小鼠体重增长无影响;灵芝三萜酸低、中、高剂量组对小鼠均无直接促进睡眠的作用;在延长戊巴比妥钠睡眠时间实验中,与溶剂对照组相比,T25、T50、T100 mg/kg均能极显著延长戊巴比妥钠睡眠时间(p <0.01),T50、T100 mg/kg组睡眠潜伏期可显著缩短(p <0.05);在戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验中,T100 mg/kg剂量组的入睡率强于地西泮2.5 mg/kg组,表明其对戊巴比妥钠阈下剂量小鼠的催眠有协同作用;在巴比妥钠睡眠潜伏期实验中,灵芝三萜酸各剂量组的睡眠潜伏期极显著缩短(p <0.01),100 mg/kg剂量的睡眠潜伏期极显著短于阳性对照组(p <0.01)。结论:灵芝三萜酸具有改善睡眠的功能。

响应面法优化灵芝多糖的酶法提取工艺研究

以灵芝子实体粗多糖得率为考察指标,比较了不同种类酶对灵芝多糖的提取效果,筛选出能够提高灵芝多糖提取率的四种酶,即木瓜蛋白酶、破壁酶、纤维素酶和果胶酶;通过单因素和响应面优化实验确定了四种酶的复配方案和最佳酶用量,即木瓜蛋白酶1.6%、破壁酶2.1%、纤维素酶1.6%、果胶酶2.3%,在此基础上,以酶法提取过程中的四个重要参数温度、时间、p H和液固比为自变量,灵芝粗多糖得率为因变量,采用响应面优化设计的方法,研究了各自变量及其相互关系对粗多糖得率的影响,获得了最佳的酶解条件为:温度60℃,时间118 min,p H4.6,液固比16∶1,在此条件下粗多糖得率为4.41%,与传统水提法粗多糖得率3.12%相比,提高了41.3%。

赤芝子实体化学成分的研究

目的研究赤芝子实体的化学成分。方法应用多种色谱方法进行分离和纯化,并用NMR和MS等波谱方法解析其化学结构。结果从赤芝子实体的醋酸乙酯提取物中分离得到7个化合物,分别被鉴定为麦角甾-7,22-二烯-3β-醇十五酸酯(ergosta-7,22-dien-3β-yl pentadecanoate,)、麦角甾醇棕榈酸酯(ergosteryl palmitate,)、麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(ergosta-7,22-dien-3β-ol,)、麦角甾醇(ergosterol,)、灵芝酸C2(ganoderic acid C2,)、ganodermanontriol()及邻苯二甲酸二异丁酯[1,2-benzenedicarboxylic acid bis(1-methylpropyl)ester,]。结论化合物为新化合物,化合物为从本植物中首次分离得到。

不同生育期灵芝子实体水提物与其免疫活性

分析4个灵芝(Ganoderma)菌株不同生育期子实体水提物的提取得率、多糖含量、多糖分子量分布和其对巨噬细胞RAW 264.7 NO释放量的影响。结果表明,随着灵芝的生长发育,其子实体水提物得率呈逐渐降低的趋势,水提物中多糖含量差异显著。水提物经透析后其多糖的分子量分布主要集中在12 kDa至25 kDa之间,但不同生育期间的各分子量多糖的含量存在差异。芝蕾发育初期和成熟后期子实体水提物透析后的免疫活性较好。综合考量,认为成熟后期采收的灵芝子实体虽然多糖含量较低,但生物量较大,可获得较大量活性多糖,所以确定成熟后期为适宜采收期。

赤芝子实体新三萜化合物的结构鉴定

目的 对赤芝子实体的化学成分进行研究。方法 利用各种色谱技术进行分离 ,采用1 HNMR ,1 3 CNMR ,1 H 1 HCOSY ,HMQC和HMBC谱进行结构鉴定。结果 从赤芝子实体中分离得到 3个化合物 ,分别鉴定为 :lucidenicacidA (1) ,3β ,7β dihydroxy 4,4,14α trimethyl 11,15 dioxo 5α chol 8 en 2 4 oicacid (2 )和lucidenicacidC (3)。 结论 化合物 2为新化合物 ,命名为赤芝酸LM1 (lucidenicacidLM1 )。

不同栽培模式对灵芝菌株农艺性状及活性成分积累的影响

探究段木栽培模式及代料栽培模式对不同灵芝菌株主要农艺性状及活性成分积累的影响,以确定灵芝子实体优质高效栽培模式。分别以段木及代料(木屑、麦麸、石膏)为栽培原料,比较两种不同栽培模式下,不同灵芝菌株菌丝平均生长速度、菌丝长势、菌丝长满菌袋时间、菌丝特征以及灵芝子实体单重、菌柄长度、菌柄直径、菌盖直径、菌盖厚度、生物学效率等主要农艺性状。采用药典及国标方法检测灵芝子实体三萜及甾醇、多糖、蛋白质、16种氨基酸含量,比较不同栽培模式对灵芝子实体主要活性成分积累的影响。研究结果表明,6个供试灵芝菌株在不同栽培模式下,菌丝平均生长速度、菌丝长势、菌丝长满菌袋时间、菌丝特征均存在一定差异。不同栽培模式下供试灵芝菌株子实体质量、菌柄长度、菌柄直径、菌盖直径、菌盖厚度、生物学效率等主要农艺性状差异较大,段木栽培模式下灵芝菌株CZ22子实体质量最大(117.15 g),生物学效率最高(7.54%),代料栽培模式下灵芝菌株CZ22子实体质量最大(40.58 g),生物学效率最高(9.02%)。不同栽培模式下相同灵芝菌株子实体三萜及甾醇、多糖含量存在一定差异,代料栽培模式下灵芝菌株CZ27子实体中三萜及甾醇含量最高(1.14%),代料栽培模式下灵芝菌株CZ25多糖含量(1.36%)最高,而蛋白质、16种氨基酸总含量及各氨基酸含量差异较大。灵芝代料栽培模式与段木栽培模式相比,具有生物学效率高、子实体产量大、生物活性成分含量丰富等优势,为灵芝高效栽培提供理论依据。

稀土对灵芝生长影响的初步研究

目的：研究在灵芝培养料中添加稀土元素对灵芝的菌丝生长、子实体的鲜重和干重的影响。方法：采用稀土拌料的方法。结果：稀土的浓度对灵芝菌丝的生长均有一定程度的抑制作用，抑制率在７．４９％～１０．９６％之间；稀土浓度对灵芝的菌丝均有增白作用，洁白度随稀土浓度的增加而降低。稀土在１００，１５０μｇ·ｇ－１时，灵芝子实体的干重和鲜重有显著增加。在５０μｇ·ｇ－１时，虽灵芝子实体的鲜重有所减少，但其干重却增加２．０％。结论：稀土浓度在１００～１５０μｇ·ｇ－１时，灵芝的产量增加显著，可供生产使用。

利用大孔树脂制备灵芝活性三萜的研究

用D101大孔树脂作为填料,不同浓度乙醇梯度洗脱灵芝(Ganoderma lucidum)子实体提取物,利用HPLC对得到的不同洗脱物进行了分析对比,并利用体外抗肿瘤模型对洗脱物进行了活性研究。结果表明,90%和95%乙醇洗脱获得了灵芝中极性较弱的三萜组分,得率共计为6.7%。该三萜组分具有较强的抗肿瘤活性,其中,以95%乙醇洗脱获得的三萜组分活性最强,对肿瘤细胞K562、LNCaP增殖抑制的IC50值分别达到14.67μg/mL和0.87μg/mL。

灵芝不同生长期子实体多糖含量及糖代谢相关酶活性研究

研究灵芝(Ganoderma lucidum Karst)不同生长阶段子实体多糖含量和糖代谢相关酶活性的变化,初步探讨灵芝子实体多糖含量变化的酶学机制。以袋料栽培灵芝为试材,采用苯酚-硫酸法测定子实体多糖含量,分光光度法测定糖代谢相关酶活性。结果表明,3种糖代谢相关酶(己糖激酶、α-磷酸葡萄糖变位酶、磷酸葡萄糖异构酶)的活性变化趋势与子实体多糖含量的变化趋势基本一致。菌蕾期子实体多糖含量最低,为11.7mg/g。从菌蕾期开始,随着糖代谢相关酶活性逐渐升高,子实体多糖含量逐渐增加,在子实体成熟后孢子弹射前达到最大值,为23.3mg/g,此时,己糖激酶、α-磷酸葡萄糖变位酶、磷酸葡萄糖异构酶的活性也达到最大值,分别为23.9、25.1、18.7U/g。之后子实体多糖含量随着糖代谢相关酶活性的显著下降而降低,孢子弹射后,子实体多糖含量仅为16.3mg/g。三种糖代谢相关酶活性与灵芝子实体多糖含量呈现正相关,推测己糖激酶、α-磷酸葡萄糖变位酶、磷酸葡萄糖异构酶是灵芝多糖合成的关键酶。