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ATF6调控生殖相关基因HSPA1L表达的分子机制
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作者 汪媛媛 朱席琳 +1 位作者 伍晓盼 刘英 《基础医学与临床》 2024年第1期37-42,共6页
目的探究内质网应激活化转录因子6(ATF6)对生殖相关基因热休克蛋白A1样蛋白(HSPA1L)表达的影响并初步阐明其调控分子机制。方法在人胚肾细胞系HEK-293T中转染ATF6过表达质粒,RT-qPCR和Western blot验证过表达效率;利用雄性ATF6敲除小鼠... 目的探究内质网应激活化转录因子6(ATF6)对生殖相关基因热休克蛋白A1样蛋白(HSPA1L)表达的影响并初步阐明其调控分子机制。方法在人胚肾细胞系HEK-293T中转染ATF6过表达质粒,RT-qPCR和Western blot验证过表达效率;利用雄性ATF6敲除小鼠睾丸组织转录物组测序信息,筛选ATF6下游5个生殖相关基因;双荧光素酶报告基因实验选择启动子活性较高的下游基因并检测过表达ATF6对其启动子活性的影响;通过gene-regulation预测ATF6和下游基因启动子可能的结合位点;RT-qPCR和Western blot检测在HEK-293T细胞中过表达ATF6对于下游基因表达的影响;利用凝胶迁移实验(EMSA)确定ATF6与下游基因启动子是否结合。结果转染后HEK-293T细胞中ATF6的mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.05)表达水平明显升高。转录物组测序及双荧光素酶报告基因实验筛选出ATF6下游的生殖相关基因HSPA1L。ATF6能够促进HSPA1L的截短启动子活性(P<0.001)。过表达ATF6后,HSPA1L的表达量明显升高(P<0.001)。差异均有统计学意义。ATF6蛋白能与HSPA1L的启动子DNA序列aagtcgtcac相结合。结论内质网应激的关键分子ATF6通过结合生殖相关基因HSPA1L的启动子调控后者表达水平,这将为预防或治疗与内质网应激(ERS)有关的男性不育的深入研究奠定基础。 展开更多
关键词 活化转录因子6 热休克蛋白a1样蛋白 男性生殖 基因调控
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MiR-663b/ALDH6A1轴通过ROS调节口腔鳞状细胞癌细胞增殖
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作者 许朗 黄忠卫 +2 位作者 鲁大鹏 韩炎 周丽芝 《局解手术学杂志》 2022年第9期747-753,共7页
目的 探讨microRNA-663b(miR-663b)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及机制。方法 利用基因表达汇编(GEO)数据库的OSCC组织芯片数据进行差异表达基因分析;采用基因富集分析(GSEA)探寻OSCC与miR-663b相关的生物学功能。将miR-66... 目的 探讨microRNA-663b(miR-663b)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及机制。方法 利用基因表达汇编(GEO)数据库的OSCC组织芯片数据进行差异表达基因分析;采用基因富集分析(GSEA)探寻OSCC与miR-663b相关的生物学功能。将miR-663b mimic以及醛脱氢酶6家族成员A1(ALDH6A1)过表达质粒转染至人OSCC细胞系HSC-3、CAL-27;采用CCK-8实验、克隆形成实验及裸鼠皮下移植瘤实验检测miR-663b对HSC-3、CAL-27细胞体内、外增殖的影响;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-663b与ALDH6A1的靶向关系。结果 GEO数据库组织芯片数据显示,miR-663b在OSCC细胞中表达上调;GSEA发现miR-663b生物学功能与调节细胞增殖、氧化还原反应及活性氧(ROS)相关。功能试验中,过表达miR-663b显著促进HSC-3、CAL-27细胞的体外增殖、克隆形成能力以及裸鼠皮下移植瘤的生长(P <0.05),下调ALDH6A1蛋白表达和ROS水平(P <0.05),升高NADPH/NADP~+比值(P <0.05);而上调ALDH6A1表达则显著抑制HSC-3、CAL-27细胞体外增殖和和克隆形成能力,上调ALDH6A1蛋白表达和ROS水平(P <0.05),降低NADPH/NADP~+比值(P <0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-663b能靶向结合ALDH6A1 mRNA的3’UTR区。结论 miR-663b在OSCC细胞中表达上调,并可通过靶向抑制ALDH6A1表达调节ROS水平,进而促进OSCC细胞增殖发挥致癌基因作用。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 miR-663b 醛脱氢酶6家族成员a1 活性氧 增殖
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趋化素样因子超家族6和程序性死亡受体-配体1在脑胶质瘤中的表达及其与预后的关系
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作者 郑永 刘杰 《安徽医药》 CAS 2023年第11期2207-2211,共5页
目的探讨趋化素样因子超家族6(CMTM6)、程序性死亡受体-配体1(PD-L1)与脑胶质瘤病人预后状况的关系。方法选择2016年1月至2017年1月解放军总医院三中心收治的脑胶质瘤病人95例(观察组)和颅脑外伤病人89例(对照组)。采用免疫组化法检测... 目的探讨趋化素样因子超家族6(CMTM6)、程序性死亡受体-配体1(PD-L1)与脑胶质瘤病人预后状况的关系。方法选择2016年1月至2017年1月解放军总医院三中心收治的脑胶质瘤病人95例(观察组)和颅脑外伤病人89例(对照组)。采用免疫组化法检测脑胶质瘤组织和正常脑组织的CMTM6、PD-L1蛋白表达。比较两组CMTM6、PD-L1蛋白表达的差异。采用电话、门诊结合微信随访获取术后5年生存相关数据。分析CMTM6、PD-L1与脑胶质瘤病人预后状况的关系。结果观察组CMTM6、PD-L1阳性表达率为85.11%、54.74%,明显高于对照组的26.97%、13.48%(P<0.05)。高病理级别胶质瘤组织的阳性表达率为95.24%、73.81%,明显高于低病理级别的71.70%、39.62%(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,CMTM6阳性表达组的4、5年累积总生存率较CMTM6阴性表达组的降低(P<0.05)。PD-L1阳性表达组的2、3、4、5年累积总生存率及无病生存率较PD-L1阴性表达组明显降低(P<0.05)。结论CMTM6、PD-L1与脑胶质瘤病人病理学分级具有紧密的关系,且两者阳性表达往往提示预后状况不良。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 趋化素样因子超家族6 程序性死亡受体-配体1 预后
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顺铂诱导的急性肾损伤中肾脏组织m^(6)A甲基化水平的变化 被引量:1
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作者 沈剑箫 王万鹏 +4 位作者 邵兴华 吴晶魁 李舒 车霞静 倪兆慧 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1602-1611,共10页
目的·探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)甲基化修饰在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤进程中的作用。方法·选择4只C57bL/6小鼠,尾静脉注射顺铂(20 mg/kg)诱导急性肾损伤(损伤组);另取4只C57bL/6小鼠,尾静脉注射等量生... 目的·探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)甲基化修饰在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤进程中的作用。方法·选择4只C57bL/6小鼠,尾静脉注射顺铂(20 mg/kg)诱导急性肾损伤(损伤组);另取4只C57bL/6小鼠,尾静脉注射等量生理盐水(对照组)。检测2组小鼠血清肌酐及血尿素氮水平变化,观察小鼠肾脏组织切片中病理损伤情况,评估模型是否成功。进一步运用甲基化RNA免疫共沉淀技术(methylatedRNAimmunoprecipitation,MeRIP)与RNA测序技术分别检测2组小鼠肾脏组织中m^(6)A甲基化水平与RNA表达变化。运用基因本体论及京都基因和基因组数据库进行结果可视化和综合研究,并将RNA测序技术所得转录组数据与MeRIP技术检测所得表观遗传数据联合分析,寻找参与顺铂诱导急性肾损伤病理变化过程的候选基因。结果·顺铂可诱导小鼠血清肌酐与血尿素氮水平显著升高。光学显微镜观察肾组织发现广泛的肾小管空泡变性,上皮细胞剥脱,肾小管坏死,提示造模成功。MeRIP检测发现损伤组与对照组小鼠肾脏中共有2227个基因含有2981个差异化表达的m^(6)A甲基化位点(表达变化倍数≥2且P<0.05),这些基因主要富集于代谢及细胞死亡通路。表达差异化m6A甲基化位点的基因与RNA差异化表达基因的联合分析发现1002个表达趋势相同的基因,如纤维蛋白原α链、溶质载体12家族成员1和甲肝病毒细胞受体1等。结论·顺铂可诱导肾脏组织中基因mRNA上m^(6)A甲基化位点的甲基化水平变化,促进急性肾损伤进程。 展开更多
关键词 N^(6)-甲基腺嘌呤甲基化 顺铂诱导急性肾损伤 纤维蛋白原α链 溶质载体12家族成员1 甲肝病毒细胞受体1
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隔药饼灸调节大鼠免疫抑制机制的转录组测序分析
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作者 田岳凤 熊罗节 +2 位作者 王慧芳 翟春涛 李玮 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第5期978-988,共11页
背景:免疫抑制会导致机体免疫功能受损,加重病情。隔药饼灸能有效调节机体免疫功能,提高机体免疫力,但其调节机制目前仍不清楚。目的:基于转录组学的生物信息学技术对隔药饼灸干预的免疫抑制模型大鼠进行测序,探究隔药饼灸调控免疫的机... 背景:免疫抑制会导致机体免疫功能受损,加重病情。隔药饼灸能有效调节机体免疫功能,提高机体免疫力,但其调节机制目前仍不清楚。目的:基于转录组学的生物信息学技术对隔药饼灸干预的免疫抑制模型大鼠进行测序,探究隔药饼灸调控免疫的机制。方法:将24只SD大鼠随机分为空白组、模型组和隔药饼灸组,每组8只,模型组与隔药饼灸组采用腹腔注射环磷酰胺制备免疫抑制模型,35 mg/kg,连续3 d,造模结束后空白组与模型组不做干预,隔药饼灸组在大鼠中脘、神阙、关元及足三里穴位进行艾炷与药饼结合的隔药饼灸干预,连续10 d,1次/d,干预结束后次日取材。取各组大鼠外周血进行白细胞数量检测;采用Illumina测序平台进行RNA-seq,筛选差异基因,结合GO与KEGG数据库,对差异基因进行生物信息学相关分析。结果与结论:①与空白组比较,模型组白细胞数量显著减少(P<0.001)。②RNA-seq共筛选出模型组与空白组间差异基因3026个,其中1565个上调、1461个下调,隔药饼灸组与模型组间差异基因535个,其中280个上调、255个下调。③韦恩图分析获得模型组与空白组159个下调基因经隔药饼灸干预后上调,蛋白互作网络分析获得Oasl,Oas2,Isg15,Herc6,Mx2,Helz2,Mx1,Syk,Hspa1a及Ret等10个核心靶点;④GO与KEGG分析隔药饼灸调节机体的机制有免疫应答途径、病毒相关、血管新生和自身免疫系统等通路。⑤上述结果证实,实验筛选出隔药饼灸干预免疫抑制与Oasl,Oas2,Isg15,Herc6,Mx2,Helz2及Mx1靶点有明显关联,并且在免疫应答、病毒相关及血管新生等通路中发挥调控作用。 展开更多
关键词 免疫抑制 隔药饼灸 转录组测序 寡腺苷酸合成酶样蛋白 寡腺苷酸合成酶2 干扰素诱导基因15 E3泛素蛋白连接酶家族成员6 抗黏病毒蛋白2 锌指解旋酶2 抗黏病毒蛋白1
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ALDH9A1、ALDH2蛋白在脑膜瘤的表达情况及临床意义 被引量:1
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作者 闫海波 朱峰 李德香 《国际神经病学神经外科学杂志》 2018年第4期379-382,共4页
目的观察脑膜瘤患者醛脱氢酶9家族成员A1(member of the aldehyde dehydrogenase 9 family A1,ALDH9 A1)、乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase,ALDH2)蛋白表达情况,并分析其临床意义。方法选取2015年8月-2017年5月在我院接受治疗的60... 目的观察脑膜瘤患者醛脱氢酶9家族成员A1(member of the aldehyde dehydrogenase 9 family A1,ALDH9 A1)、乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase,ALDH2)蛋白表达情况,并分析其临床意义。方法选取2015年8月-2017年5月在我院接受治疗的60例脑膜瘤患者为观察组,选取同期在我院接受治疗的脑外伤患者60例作为对照组,观察两组ALDH9 A1、ALDH2蛋白表达情况,比较两组血管内皮生长因子(VEGF-A)、基质金属蛋白酶(MMP-9)、胰岛素样生长因子-2(IGF-Ⅱ)及其受体(IGF-ⅡR)水平的差异,分析脑膜瘤患者ALDH9 A1、ALDH2蛋白表达情况与VEGF-A、MMP-9、IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR水平的相关性。结果观察组患者的ALDH9 A1阳性和ALDH2阳性表达率均高于对照组(χ2值=70.533、86.724,P<0.001);观察组患者的VEGF-A和MMP-9蛋白表达水平均高于对照组(t=-16.866、-15.162,P<0.001);观察组患者的IGF-Ⅱ阳性和IGF-ⅡR阳性表达率均高于对照组(χ2值=101.538、112.258,P<0.001);脑膜瘤患者的ALDH9 A1、ALDH2阳性表达率与VEGF-A、MMP-9水平和IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR阳性表达率正相关(r=0.612、0.598、0.605、0.627、0.608、0.612、0.634、0.587,P<0.05)。结论脑膜瘤患者的ALDH9 A1、ALDH2蛋白阳性表达率较高,且与EGF-A、MMP-9水平和IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR阳性表达率明显正相关。 展开更多
关键词 脑膜瘤 血管内皮生长因子 醛脱氢酶9家族成员 乙醛脱氢酶
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溶质载体家族6成员1通过调节PI3K/Akt信号通路磷酸化促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭 被引量:2
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作者 吉磊 徐洋 唐楠 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期759-766,共8页
目的探讨溶质载体家族6成员1(SLC6A1)对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法下载并综合分析数据集GSE125989和GSE100534,筛选差异基因;通过STRING数据库和Cytoscape 3.6.1软件构建差异基因的蛋白相互作用网络,并筛选hub基因;通... 目的探讨溶质载体家族6成员1(SLC6A1)对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法下载并综合分析数据集GSE125989和GSE100534,筛选差异基因;通过STRING数据库和Cytoscape 3.6.1软件构建差异基因的蛋白相互作用网络,并筛选hub基因;通过Ualcan和GEPIA数据库检测hub基因SLC6A1在乳腺癌中的表达及其对预后的影响;转染SLC6A1-siRNA干扰乳腺癌细胞MDA-MB-231中SLC6A1的表达;细胞划痕实验和Transwell实验检测乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的变化;基因集富集分析和Western blotting检测SLC6A1在乳腺癌中发挥作用的机制;采用SC79激活Akt通路并检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果共筛选出92个乳腺癌原位癌与转移瘤的差异基因,并确定Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、SLC6A1等20个hub基因;SLC6A1在乳腺癌组织中高表达(P<0.001),且与患者预后相关(P=0.01);SLC6A1表达被干扰后,乳腺癌细胞迁移和侵袭能力显著下降(P<0.05);SLC6A1表达降低可抑制PI3K/Akt信号通路的磷酸化(P<0.05);激活PI3K/Akt通路后SLC6A1-siRNA对乳腺癌细胞迁移和侵袭的抑制作用消失(P<0.05)。结论SLC6A1通过调节PI3K/Akt信号通路促进乳腺癌的侵袭和转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 溶质载体家族6成员1 侵袭 转移 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B 免疫印迹法
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Effects of ADH1C, ALDH2, and CYP2A6 Polymorphisms on Individual Risk of Tobacco-Related Lung Cancer in Male Japanese Smokers
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作者 Makiko Shimizu Yuki Ishii +3 位作者 Maho Okubo Hideo Kunitoh Tetsuya Kamataki Hiroshi Yamazaki 《Journal of Cancer Therapy》 2013年第8期29-35,共7页
Recent genome-wide association studies have identified several lung cancer susceptibility loci. We previously carried out a replication study in male Japanese smokers that focused on chromosome 5p15 (telomerase revers... Recent genome-wide association studies have identified several lung cancer susceptibility loci. We previously carried out a replication study in male Japanese smokers that focused on chromosome 5p15 (telomerase reverse transcriptase) and 3q28 (tumor protein p63) (Shimizu et al., Journal of Cancer Therapy, Vol. 2, No. 5, 2011, pp. 690-696). The current study was performed to confirm the association of traditional susceptibility loci [i.e., alcohol dehydrogenase 1C (ADH1C) and aldehyde dehydrogenase 2 (ALDH2)] in 1039 male Japanese smokers (573 lung cancer patients and 466 healthy control subjects) who were previously enrolled in a study to investigate the low odds ratio for lung cancer risk associated with functionally impaired and deletion polymorphisms in cytochrome P450 2A6 (CYP2A6). The minor allele frequency of rs671 in ALDH2 (0.304) was significantly higher in lung cancer cases than in controls (0.226), with an odds ratio of 1.42 [95% confidence interval (CI) of 1.12 - 1.80, p = 0.0033]. No significant association of rs698 in ADH1C with lung cancer risk was found in this population of male Japanese smokers. For light smokers categorized according to the 50th percentile Brinkman index value among the control subjects (620 daily cigarettes × years) and for the CYP2A6*1 wild-type non-carrier sub-population, significantly high odds ratios of 1.98 and 1.68 (95% CI of 1.28 - 3.06, p = 0.0022, and 1.07 - 2.66, p = 0.025), respectively, were observed for rs671 in ALDH2. The present results support the association of ALDH2 loci with lung cancers and suggest a specific effect of ALDH2 loci resulting in a higher risk of lung cancer in light smokers. CYP2A6 polymorphisms, including copy number polymorphisms, may lower the risk of heavy tobacco use-related lung cancer. 展开更多
关键词 Alcohol dehydrogenase 1C aldehyde dehydrogenase 2 CYTOCHROME P450 2A6 Lung Cancer TOBACCO
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HCV核心蛋白调控miR-486-5p/AKR1B10促进肝癌细胞生长的实验研究
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作者 冯丽萍 张辉洁 +1 位作者 欧雯婷 余盈 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期2955-2959,共5页
目的:探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCVc)对肝癌HepG2细胞增殖凋亡和miR-486-5p以及醛酮还原家族1B10(AKR1B10)蛋白表达的影响。方法:以重组腺病毒Ad-GFP-HCVc感染HepG2细胞,采用RT-PCR和Western blot检测HepG2细胞HCVc表达,MTT法和流式细... 目的:探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCVc)对肝癌HepG2细胞增殖凋亡和miR-486-5p以及醛酮还原家族1B10(AKR1B10)蛋白表达的影响。方法:以重组腺病毒Ad-GFP-HCVc感染HepG2细胞,采用RT-PCR和Western blot检测HepG2细胞HCVc表达,MTT法和流式细胞术分别检测HepG2细胞增殖和凋亡情况,qRT-PCR检测HepG2细胞中miR-486-5p表达,Western blot检测AKR1B10蛋白表达;以miR-486-5p抑制剂转染HepG2细胞,qRT-PCR和Western blot分别检测HepG2细胞中miR-486-5p和AKR1B10蛋白表达;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-486-5p和AKR1B10的靶向关系。结果:Ad-GFP-HCVc感染后,HepG2细胞中HCVc表达升高;与阴性对照组相比,HCVc组细胞增殖活力和AKR1B10蛋白表达明显升高,而细胞凋亡率和miR-486-5p表达明显降低(P<0.05);与anti-miR-NC组相比,转染miR-486-5p抑制剂的HepG2细胞miR-486-5p表达明显降低,而AKR1B10蛋白表达明显升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-486-5p可与AKR1B10靶向结合。结论:HCVc可能通过下调miR-486-5p表达引起其靶基因AKR1B10表达升高,促进HepG2细胞异常生长。 展开更多
关键词 肝癌 丙型肝炎病毒核心蛋白 微小RNA-486-5p 醛酮还原家族1B10
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茯苓酸对人胰腺癌PANC-1细胞迁移、侵袭和上皮间质转化的抑制作用 被引量:4
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作者 李锐 谭晓冬 胡耀元 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期315-323,共9页
目的:探讨茯苓酸(PA)通过上调活化转录因子3(ATF3)和热休克蛋白家族A成员6(HSPA6)表达对胰腺癌PANC-1细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的作用,并阐明其可能的作用机制。方法:胰腺癌PANC-1细胞分为空白对照组和不同浓度(2、5、10、20... 目的:探讨茯苓酸(PA)通过上调活化转录因子3(ATF3)和热休克蛋白家族A成员6(HSPA6)表达对胰腺癌PANC-1细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的作用,并阐明其可能的作用机制。方法:胰腺癌PANC-1细胞分为空白对照组和不同浓度(2、5、10、20、30、40和50μmol·L^(-1))PA处理组,采用CCK-8法检测各组PANC-1细胞的细胞活性。不同浓度(0、10、30和50μmol·L^(-1))PA作用于PANC-1细胞,采用Transwell小室实验检测PANC-1细胞迁移和侵袭能力,Western blotting法检测PANC-1细胞中EMT相关蛋白表达水平。将10只BALB/c nude裸鼠随机分为对照组和PA组,每组5只,裸鼠皮下注射PANC-1细胞,待肿瘤体积达到60 mm3时,PA组裸鼠腹腔注射25 mg·kg^(-1)PA,对照组裸鼠注射等量生理盐水,测量肿瘤体积和瘤质量,免疫组织化学法检测各组裸鼠移植瘤组织中Ki-67表达情况。通过GEO2R软件分析GSE64111数据集中PA处理及未处理胰腺癌细胞的差异表达基因。不同浓度(0和30μmol·L^(-1))PA作用于PANC-1细胞,采用Western blotting法检测PANC-1细胞中HSPA6和ATF3蛋白表达水平。将30μmol·L^(-1)PA处理的PANC-1细胞分为si-NC组和si-ATF3组,分别转染对照siRNA和ATF3siRNA,采用Western blotting法检测各组细胞中HSPA6和ATF3蛋白及EMT相关蛋白表达水平,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果:CCK-8法,与空白对照组比较,不同浓度PA处理组PANC-1细胞的细胞活性呈浓度依赖性降低(P<0.05)。Transwell小室实验,与空白对照组比较,不同浓度PA处理组PANC-1细胞迁移能力和侵袭能力呈浓度依赖性降低(P<0.05)。Western blotting法,与空白对照组比较,不同浓度PA组PANC-1细胞中上皮钙黏素蛋白表达水平升高(P<0.05),神经钙黏素和波形蛋白表达水平降低(P<0.05)。裸鼠成瘤实验,与对照组比较,PA组裸鼠移植瘤体积和瘤质量明显降低(P<0.05);免疫组织化学,与对照组比较,PA组裸鼠移植瘤Ki-67染色较浅。GEO2R软件分析和Western blotting法,与空白对照组比较,PA处理组PANC-1细胞中HSPA6和ATF3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。Western blotting法,与si-NC组比较,si-ATF3组PANC-1细胞中HSPA6、ATF3和上皮钙黏素蛋白表达水平明显降低(P<0.05),神经钙黏素和波形蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。Transwell小室实验,与si-NC组比较,si-ATF3组PANC-1细胞迁移和侵袭能力明显增加(P<0.05)。结论:PA通过上调HSPA6和ATF3表达抑制胰腺癌细胞迁移、侵袭和EMT,从而发挥抗胰腺癌作用。 展开更多
关键词 茯苓酸 胰腺肿瘤 PANC-1细胞 上皮间质转化 细胞迁移 细胞侵袭 活化转录因子3 热休克蛋白家族A成员6
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miR-221-5p通过靶向调控ALDH1A2对胃癌细胞生物学行为的影响 被引量:1
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作者 杨涛勇 钱昆 +1 位作者 朱丹 蒋先学 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2023年第1期69-79,共11页
目的 探讨miR-221-5p与醛脱氢酶1家族成员A2(ALDH1A2)的靶向关系及其对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 收集2020年7月至2022年7月于岳池县人民医院接受根治性胃癌切除术的50例胃癌患者的胃癌组织及其癌旁正... 目的 探讨miR-221-5p与醛脱氢酶1家族成员A2(ALDH1A2)的靶向关系及其对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 收集2020年7月至2022年7月于岳池县人民医院接受根治性胃癌切除术的50例胃癌患者的胃癌组织及其癌旁正常组织标本,体外培养的细胞株包括人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和人胃癌细胞系BGC-803、AGS、SGC-7901、BGC-823、HGC-27。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织和细胞中miR-221-5p、ALDH1A2 mRNA的表达,Pearson相关分析胃癌组织中二者的相关性,分析miR-221-5p表达与患者临床病理参数的关系;生物信息学预测和双荧光素酶实验验证miR-221-5p对ALDH1A2的靶向调控作用;将HGC-27细胞分为对照组、抑制物-NC组、miR-221-5p抑制物组、模拟物NC组、miR-221-5p模拟物组、miR-221-5p模拟物+pc DNA3.1组和miR-221-5p模拟物+pc DNA3.1-ALDH1A2组,转染相应的质粒;分别采用MTT法、克隆形成实验、Transwell小室实验、划痕实验、流式细胞术检测细胞的增殖、侵袭、迁移、凋亡及细胞周期分布情况;蛋白质印迹法分析细胞中EMT相关蛋白表达情况。结果 miR-221-5p在胃癌组织和细胞中显著高表达,ALDH1A2 mRNA表达显著下调,二者在胃癌组织中呈明显负相关(P<0.05);miR-221-5p表达与胃癌患者的TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有明显相关性(P<0.05);miR-221-5p靶向抑制ALDH1A2表达;与anti-miR-NC组相比,anti-miR-221-5p组细胞的OD值、划痕愈合率、N-cadherin、Vimentin蛋白、miR-221-5p表达水平、S期细胞比例明显下降,E-cadherin、α-catenin、ALDH1A2蛋白表达水平、G0/G1期细胞比例明显升高,单克隆形成、侵袭数目明显减少(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-221-5p组细胞获得与上述相反的结果;上调ALDH1A2表达能够逆转miR-221-5p对HGC-27细胞恶性生物学行为的影响。结论 miR-221-5p过表达可能通过靶向下调ALDH1A2表达促进胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT和细胞周期进程,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 miR-221-5p 醛脱氢酶1家族成员A2 上皮间质转化
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醛脱氢酶18家族成员A1在食管癌细胞中结合的靶标及测序分析
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作者 王永康 余玮 +1 位作者 克力木·阿不都热依木 买买提·依斯热依力 《华西医学》 CAS 2024年第8期1188-1194,共7页
目的研究醛脱氢酶18家族成员A1(aldehyde dehydrogenase 18 family member A1,ALDH18A1)作为一种RNA结合蛋白在食管癌细胞(KYSE150细胞)中结合RNA的分子特征及对肿瘤生长的影响。方法通过体外培养人食管鳞癌细胞(KYSE150细胞)。同时,采... 目的研究醛脱氢酶18家族成员A1(aldehyde dehydrogenase 18 family member A1,ALDH18A1)作为一种RNA结合蛋白在食管癌细胞(KYSE150细胞)中结合RNA的分子特征及对肿瘤生长的影响。方法通过体外培养人食管鳞癌细胞(KYSE150细胞)。同时,采用RNA免疫共沉淀技术研究细胞内RNA与蛋白结合情况,利用目标蛋白的抗体将相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,分离纯化捕获的RNA。分析ALDH18A1结合RNA的分子特征,并且对ALDH18A1结合靶基因进行京都基因与基因组百科全书聚类分析。结果蛋白质免疫印迹实验显示目的蛋白被抗体较好富集。ALDH18A1具有广泛的RNA结合活性,结合显著富集在编码区、内含子和5’非翻译区。ALDH18A1主要结合在RNA的UGUAAUC基序。聚类分析结果表明,ALDH18A1结合的RNA分子主要参与了在对焦点黏附、癌症的中心碳代谢、细胞周期、剪接体、RNA运输和泛素介导的蛋白水解等。结论ALDH18A1能结合RNA分子,可在食管癌相关基因的表达过程以及相关的生物学过程过程中发挥作用。 展开更多
关键词 食管癌细胞 醛脱氢酶18家族成员a1 RNA结合蛋白 RNA免疫共沉淀
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ALDH8A1在胃癌组织中的表达及其临床意义
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作者 赵萌 夏勇生 +4 位作者 王子良 王俊豪 葛思堂 左芦根 陈德利 《中华全科医学》 2024年第7期1129-1132,1255,共5页
目的探究重组表达醛脱氢酶8A1(ALDH8A1)在胃癌组织中的表达情况及与临床病理参数的关系,并分析其对患者远期预后的影响。方法纳入2012年3月—2018年4月在蚌埠医科大学第一附属医院接受根治术治疗的109例胃癌患者,采用免疫组化法分析ALDH... 目的探究重组表达醛脱氢酶8A1(ALDH8A1)在胃癌组织中的表达情况及与临床病理参数的关系,并分析其对患者远期预后的影响。方法纳入2012年3月—2018年4月在蚌埠医科大学第一附属医院接受根治术治疗的109例胃癌患者,采用免疫组化法分析ALDH8A1在胃癌及癌旁组织的表达情况,并运用统计学方法分析其与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier曲线分析ALDH8A1的表达对胃癌患者术后5年生存率的影响。结果ALDH8A1在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.001)。CEA≥5μg/L、CA19-9≥37 kU/L、癌细胞类型为腺癌、T3~4期及N2~3期患者ALDH8A1表达水平更高(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析及多因素分析显示ALDH8A1高表达(HR=2.674,95%CI:1.293~5.533,P=0.008)可能会增加胃癌患者术后的死亡率。ROC曲线表明以2.555为截点值,ALDH8A1对胃癌患者预后具有较高的预判价值(灵敏度为68.97%,特异度为86.27%)。GO和KEGG富集分析显示ALDH8A1与细胞减数分裂、DNA结合和细胞周期等信号通路有关。结论ALDH 8 A 1在胃癌组织中高表达并促进胃癌的恶性进展,与预后不良相关。 展开更多
关键词 胃癌 重组表达醛脱氢酶8a1 临床病理特征 预后
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上皮性卵巢癌中ALDH1和ABCG2的表达及其与微血管形成的关系 被引量:6
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作者 俞岚 宋文庆 +2 位作者 周蕾 武世伍 王丹娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1807-1814,共8页
目的:本文旨在探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)蛋白表达及微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系。方法:收集198例EOC术后标本和60例卵巢良性上皮性... 目的:本文旨在探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)蛋白表达及微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系。方法:收集198例EOC术后标本和60例卵巢良性上皮性肿瘤标本,应用免疫组织化学法检测EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中ALDH1、ABCG2及CD105蛋白(微血管标志物)的表达情况。结果:在EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中,ALDH1和ABCG2的阳性表达率分别为64.1%、61.6%和8.3%、6.7%;MVD分别为22.6±9.7和5.03±3.35,差异均有统计学显著性(P<0.05);ALDH1和ABCG2的表达与EOC的组织学分化、FIGO分期、腹腔器官及淋巴结转移有关(P<0.05),MVD与EOC的组织学分化、FIGO分期、腹腔器官及淋巴结转移和腹水形成有关(P<0.05);MVD分别与ALDH1和ABCG2的表达呈正相关(P<0.01),同时,ALDH1和ABCG2的表达亦呈正相关(P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析表明,ALDH1和ABCG2的过表达以及MVD的增加均与患者的生存率有关,ALDH1和ABCG2表达阳性及MVD≥23的患者生存率明显低于ALDH1和ABCG2表达阴性及MVD<23的患者(P<0.05)。多因素分析显示FIGO分期、ALDH1表达、ABCG2表达和MVD是影响EOC根治术后患者预后的独立因素(P<0.05)。结论:EOC组织中ALDH1和ABCG2过表达以及MVD与肿瘤的分化程度、转移和预后等因素相关,这些指标的联合检测可能作为对EOC的进展及患者预后判断的重要指标。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 乙醛脱氢酶1 腺苷三磷酸结合盒转运体G2 微血管密度 预后
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乳腺癌预后生物标志物研究进展 被引量:9
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作者 韩璐 宋丰举 陈可欣 《天津医药》 CAS 2016年第4期404-407,共4页
乳腺癌是世界范围内女性发病率最高的恶性肿瘤,也是导致女性癌症相关死亡的最主要原因。近些年乳腺癌患者数量呈逐年增加趋势,严重威胁女性的生命健康和生活质量。因此,乳腺癌预后的研究对乳腺癌患者意义深远。随着分子生物学的发展,一... 乳腺癌是世界范围内女性发病率最高的恶性肿瘤,也是导致女性癌症相关死亡的最主要原因。近些年乳腺癌患者数量呈逐年增加趋势,严重威胁女性的生命健康和生活质量。因此,乳腺癌预后的研究对乳腺癌患者意义深远。随着分子生物学的发展,一些分子生物学标志物被发现与乳腺癌患者预后有关,这使得更准确、有效地评估乳腺癌患者的预后成为可能。本文旨在对乳腺癌预后生物标志物的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 预后 生物学标记 综述 MIRNA-21 miRNA-210 CXCR4 ALDH1a1 BCL2 BRCa1/BRCA2
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ALDH1和ABCG2在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 刘艳 白晶 李爱军 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期206-209,共4页
目的:检测肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)在不同程度宫颈病变组织中的表达情况。方法:应用免疫组化SP法检测76例宫颈鳞癌、52例宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)、37例慢性宫颈炎患者的石蜡组织... 目的:检测肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)在不同程度宫颈病变组织中的表达情况。方法:应用免疫组化SP法检测76例宫颈鳞癌、52例宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)、37例慢性宫颈炎患者的石蜡组织中ALDH1和ABCG2的表达情况,并进行比较分析。结果:1ALDH1和ABCG2在慢性宫颈炎、HSIL、宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为5.41%(2/37)和8.11%(3/37)、23.08%(12/52)和28.85%(15/52)、53.95%(41/76)和61.84%(47/76),两者在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率明显高于HSIL组织、慢性宫颈炎组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。2ALDH1在宫颈鳞癌中表达水平与肿瘤分化程度、是否存在淋巴结转移有关(P<0.05),ABCG2在宫颈鳞癌中表达水平与宫颈癌的临床分期、肿瘤细胞的分化程度及是否有淋巴结转移有关(P<0.05)。3宫颈鳞癌组织中ALDH1和ABCG2表达水平水平呈正相关(r=0.535,P<0.05)。结论:ALDH1和ABCG2在宫颈鳞癌的表达升高,可能在宫颈鳞癌的发生、发展、转移中起作用。ALDH1和ABCG2在宫颈鳞癌的发展过程中可能起协同作用。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 乙醛脱氢酶1 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2 肿瘤干细胞
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胶质瘤细胞维甲酸代谢调控机制及其对细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 张继君 谢思明 +4 位作者 林琛莅 翁泽平 杜展 王超 钟雪云 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期59-64,共6页
目的:探讨胶质瘤细胞中的维甲酸合成调控机制,以及维甲酸对人脑胶质瘤细胞SWO-Z2的增殖抑制作用及可能的机制。方法:运用小分子RNA干扰Krüppel样转录因子9(KLF9);Real-time PCR和Westernblotting检测KLF9基因RNAi沉默效率。KLF9基... 目的:探讨胶质瘤细胞中的维甲酸合成调控机制,以及维甲酸对人脑胶质瘤细胞SWO-Z2的增殖抑制作用及可能的机制。方法:运用小分子RNA干扰Krüppel样转录因子9(KLF9);Real-time PCR和Westernblotting检测KLF9基因RNAi沉默效率。KLF9基因干扰后,运用Western blotting检测醛脱氢酶1家族成员A1(AL-DH1A1)蛋白表达的变化。应用CCK-8法从3种类型维甲酸药物(13-顺维甲酸、9-顺维甲酸和全反式维甲酸分别简称13-cis RA、9-cis RA和ATRA)中筛选出对SWO-Z2细胞活性抑制作用最强的药物。Western blotting检测不同浓度ATRA作用SWO-Z2细胞后增殖相关蛋白cyclin D1、Bcl-2、cleaved PARP以及胶质瘤分化标记物GFAP的表达情况。Real-time PCR检测SWO-Z2细胞的维甲酸受体表达情况。结果:小分子RNA干扰KLF9基因后,成功下调KLF9表达,引起ALDH1A1 mRNA和蛋白表达都下降。3种类型维甲酸中ATRA对SWO-Z2细胞的增殖活性抑制作用最强。ATRA作用SWO-Z2细胞72 h后cleaved PARP蛋白激活,cyclin D1和Bcl-2表达水平下降,而GFAP表达没有改变。SWO-Z2细胞维甲酸受体(RARs)表达降低。结论:KLF9作为ALDH1A1基因的上游调控基因,通过正调控ALDH1A1基因的表达促进胶质瘤细胞中的维甲酸合成;ATRA处理SWO-Z2细胞后未能促进胶质瘤分化而是明显抑制肿瘤细胞增殖能力,可能是由于胶质瘤细胞内缺乏维甲酸受体所致。 展开更多
关键词 Krüpple样转录因子9 全反式维甲酸 受体 维甲酸 醛脱氢酶1家族成员a1 细胞分化
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高分辨率熔解曲线技术在筛查琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症致病基因突变中的应用 被引量:1
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作者 董昭樱 张新杰 +5 位作者 支秀芳 范文轩 张玉琴 舒剑波 蔡春泉 李东 《生物医学工程与临床》 CAS 2022年第1期81-85,共5页
目的对4例琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症(SSADHD)患儿家系进行基因突变分析,在明确突变的基础上建立针对醛脱氢酶5家族成员A1基因(ALDH5A1)中常见致病基因突变位点c.1529C> T(p.S510F)的高分辨率熔解(HRM)曲线快速筛查方法。方法先证者4例S... 目的对4例琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症(SSADHD)患儿家系进行基因突变分析,在明确突变的基础上建立针对醛脱氢酶5家族成员A1基因(ALDH5A1)中常见致病基因突变位点c.1529C> T(p.S510F)的高分辨率熔解(HRM)曲线快速筛查方法。方法先证者4例SSADHD患儿年龄(5.3±2.2)个月,其中男性3例,女性1例。商品化试剂盒提取4例先证者及其亲属外周血基因组DNA;采用一代测序技术对患者家系的ALDH5A1进行基因突变分析;应用HRM曲线技术随机筛查80例患儿ALDH5A1上c.1529C> T位点突变。结果先证者均有致病基因突变c.1529C> T位点,其中2例为该位点纯合突变,2例杂合携带并伴有其他致病位点的杂合突变。先证者及其家属的HRM分析结果与测序结果一致。随机检测的80例患儿,年龄为(7.5±3.9)岁,其中男性48例,女性32例,均不携带该基因突变。结论推测c.1529C> T位点突变可能是津冀地区SSADHD患儿中ALDH5A1的常见致病基因突变位点,但其在人群中携带频率很低;利用HRM曲线技术可实现对该位点的快速筛查。 展开更多
关键词 高分辨率熔解曲线 琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症 醛脱氢酶5家族成员a1基因(ALDH5a1) 儿童
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中国西南地区新生儿高胆红素血症基因多态性研究 被引量:7
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作者 刘玲 蒋榆辉 +3 位作者 聂潘荣 曾丽梅 段改原 李宇晨 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期672-678,共7页
目的探讨尿苷二磷酸葡萄糖醛基转移酶1A1(UGT1A1)、有机阴离子转运体1B1(SLCO1B1)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因多态性与中国西南地区新生儿高胆红素血症的易感关联性。方法选取2016年9月至2019年12月籍贯为云南省、贵州省、四川省... 目的探讨尿苷二磷酸葡萄糖醛基转移酶1A1(UGT1A1)、有机阴离子转运体1B1(SLCO1B1)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因多态性与中国西南地区新生儿高胆红素血症的易感关联性。方法选取2016年9月至2019年12月籍贯为云南省、贵州省、四川省的新生儿高胆红素血症患儿190例为病例组,同时随机选取200例同期住院的无黄疸新生儿为对照组。提取外周血DNA,采用Sequenom芯片进行17个SNP位点分型检测。比较两组间基因型与等位基因频率分布差异。结果病例组190例,男98例、女92例,平均胎龄(38.7±1.2)周。对照组200例,男116例、女84例,平均胎龄(38.9±1.3)周。病例组UGT1A1基因rs873478、rs34946978和rs4148323位点等位基因频率均高于对照组,病例组SLCO1B1基因rs72559748位点等位基因频率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2例男性高胆红素血症患儿检出G6PD基因rs72554664变异,检出率为1.05%。病例组和对照组之间风险等位基因个数分布差异有统计学意义(P<0.05),病例组风险等位基因≥2个的比例较高。结论UGT1A1基因rs873478、rs34946978和rs4148323多态性与中国西南地区新生儿高胆红素血症发生风险增加有关。SLCO1B1基因多态性与该地区新生儿高胆红素血症发生无显著关联。G6PD酶活性缺乏可能不是该地区新生儿高胆红素血症的主要风险因素。 展开更多
关键词 尿苷二磷酸葡萄糖醛基转移酶1a1 有机阴离子转运体1B1 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 高胆红素血症 新生儿
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乳腺癌组织中ALDH1、CXCR4及ABCG2与其分子亚型的关系 被引量:2
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作者 许立国 李惠翔 《肿瘤基础与临床》 2013年第5期387-389,共3页
目的探讨乳腺癌组织中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、CXCR4及三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达情况,并分析三者与乳腺癌分子亚型的关系。方法采用免疫组化S-P法检测90例乳腺癌组织中ALDH1、CXCR4、ABCG2以及ER、PR、HER-2的表达... 目的探讨乳腺癌组织中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、CXCR4及三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达情况,并分析三者与乳腺癌分子亚型的关系。方法采用免疫组化S-P法检测90例乳腺癌组织中ALDH1、CXCR4、ABCG2以及ER、PR、HER-2的表达情况,根据后三者的表达情况将乳腺癌分为Luminal A型(35例,38.9%)、Luminal B型(16例,17.8%)、HER-2过表达型(22例,24.4%)和Basal-like型(17例,18.9%)4个亚型,并分析三者与分子亚型的关系。结果 90例乳腺癌组织中,ALDH1、CXCR4、ABCG2的阳性表达率分别为32.2%、60.0%、32.2%。不同亚型乳腺癌组织中ALDH1、CXCR4及ABCG2的表达比较差异有统计学意义(χ2=20.157,P<0.001;χ2=12.088,P=0.007;χ2=18.760,P<0.001)。结论不同亚型乳腺癌组织的ALDH1、CXCR4及ABCG2表达具有差异性,三者检测有助于乳腺癌分子亚型的预后评估。 展开更多
关键词 乳腺癌 乙醛脱氢酶1 CXCR4 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2
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