去甲基化酶ALKBH5在肺腺癌组织中的表达及其与细胞增殖的关系

目的:探讨N6-甲基腺苷化修饰(N6-methyladenosine,m6A)去甲基化酶Alk B同源蛋白5(Alk B homologue 5,ALKBH5)在肺腺癌组织中的表达及其临床意义,并探讨靶向抑制ALKBH5的表达对肺腺癌细胞增殖的影响。方法:应用免疫组织化学法检测88例肺腺癌组织及其对应的癌旁组织中ALKBH5的表达,分析ALKBH5表达与肺腺癌患者临床特征间的关系及其在预后判断中的价值。将ALKBH5-siRNA转染至肺腺癌H1650、H1975和HCC827细胞后,应用克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力,蛋白质印迹法检测Ki-67和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果:ALKBH5在肺腺癌组织中的高表达率(44.3%,39/88)高于相应的癌旁组织(20.5%,18/88,P=0.001),并且ALKBH5的表达与肺腺癌患者的临床分期有关(P<0.01);ALKBH5高表达的肺腺癌患者预后较差(P=0.009),ALKBH5表达水平是肺腺癌患者预后的独立影响因子(P=0.038)。ALKBH5-siRNA转染后,肺腺癌H1650、H1975和HCC827细胞的克隆形成能力均显著减弱(P值均<0.05),Ki-67和PCNA蛋白的表达水平均显著降低(P值均<0.01)。结论:ALKBH5的表达与肺腺癌的恶性进展密切相关,沉默ALKBH5的表达具有抑制肺腺癌细胞克隆形成的作用。因此,ALKBH5是治疗肺腺癌的潜在靶点。

铜绿假单胞菌NY3及其突变株好氧降解四溴双酚A特性研究

为明确铜绿假单胞菌NY3 2个烷羟化酶基因alk B1和alk B2基因在该菌代谢四溴双酚A中的作用,研究了野生NY3菌及其突变菌株(NB1D、NB2D及NB12DD)对四溴双酚A好氧降解特性.研究表明,NY3、NB1D、NB2D及NB12DD菌株均能以四溴双酚A为单一碳源和能源进行生长,并对四溴双酚A进行一定程度上的降解.NY3菌中alk B1基因和alk B2基因的缺失对NY3菌株在四溴双酚A中的生长有抑制作用,而且alk B1基因和alk B2基因在NY3菌降解四溴双酚A中起一定的作用,但不完全,说明NY3菌中还存在其他影响四溴双酚A降解的基因.缺失alk B2基因的突变株NB2D在高浓度的四溴双酚A溶液中降解转化率最少,说明alk B2基因的缺失,对NY3菌降解高浓度四溴双酚A碳源更重要.加入同一易降解共代谢碳源,野生株NY3菌及其各突变株生长特性无明显差异,然而,因共存碳源种类不同,同一菌株细胞生长量、对四溴双酚A降解及其脱溴效率等特性差别明显.加最佳共代谢碳源乳酸钠的体系内,突变株NB2D存在下易积累中间产物3,3',5-三溴双酚A和2-溴-4(异丙基-溴苯)-苯酚等直接脱溴产物,说明alk B1基因可能为NY3菌株代谢四溴双酚A脱溴时的关键基因.