中性粒细胞膜碱性磷酸酶对革兰阴性菌和阳性菌血流感染的诊断价值

目的探讨中性粒细胞膜碱性磷酸酶(alkaline phosphatase on the surface membrane of neutrophils,mNAP)对革兰阴性菌(GNB)和革兰阳性菌(GPB)血流感染(bloodstream infection,BSI)的临床诊断价值。方法收集2022年1月至2023年12月东海县人民医院诊断为BSI的患者418例作为研究对象,根据血培养阳性细菌革兰染色结果,进一步分为GNB感染患者329例和GPB感染患者89例。另选择同期住院的全身炎症反应综合征患者(SIRS)35例作为疾病对照组。收集3组患者的临床资料及常规实验室检查结果,并采集3组患者的静脉血标本,采用流式细胞仪检测各组mNAP的表达水平。采用ROC曲线评估mNAP对GNB和GPB发生BSI的鉴别诊断效能。结果GPB、GNB感染组和SIRS组mNAP的表达水平分别为9588(5677,11343)AB/C,16616(11853,22035)AB/C和5738(2613,9178)AB/C,3组间差异有统计学意义(H=43.95,P<0.0001);进一步行组间两两比较发现,GNB感染组显著高于GPB感染组(U=203.0,P<0.0001)和SIRS组(U=445.0,P<0.0001),且GPB感染组显著高于SIRS组(U=583.0,P<0.0001)。ROC曲线评估mNAP对GNB发生BSI的AUC ROC为0.91(95%CI:0.85~0.96),当cut-off值为10820 AB/C时,其敏感性为80.00%,特异性为88.57%;ROC曲线评估mNAP对GPB发生BSI的AUC ROC为0.69(95%CI:0.55~0.83),当cut-off值为10859 AB/C时,其敏感性为33.00%,特异性为88.13%。结论mNAP对GNB发生BSI的鉴别诊断效能明显高于GPB,或可成为区分GNB和GPB发生BSI的新型生物学标志物。

外周血中性粒细胞膜碱性磷酸酶在预测全身炎症反应综合征患者血液细菌感染中的价值

目的探讨中性粒细胞膜碱性磷酸酶（m NAP）在预测全身炎症反应综合征（SIRS）患者血液细菌感染中的价值。方法采用前瞻性研究方法,对进行血培养的SIRS患者149例（血培养阳性组59例,血培养阴性组90例）,用流式细胞仪检测患者外周血m NAP,乳胶增强散射免疫比浊法和电化学发光法分别测定C反应蛋白（CRP）和降钙素原（PCT）水平,比较各组间差异及指标间的相关性。应用ROC曲线评价m NAP、PCT和CRP预测SIRS患者血液细菌感染的价值。结果血培养阳性SIRS组外周血m NAP、PCT和CRP水平中位数（四分位数）分别为13 683（9 825,18 605）AB/c、5.680（1.300,18.390）ng/m L和139.00（65.60,201.00）mg/L,均明显高于血培养阴性SIRS组7 297（4 600,10 363）AB/c、0.432（0.115,1.645）ng/m L、75.25（36.90,125.25）mg/L,差异均有统计学意义（P〈0.01）。m NAP、PCT和CRP预测SIRS血液细菌感染的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.806、0.797和0.692,敏感性分别为66.1%、76.3%和61.0%,特异性分别为83.3%、74.4%和70.0%,阳性预测值（PPV）分别为72.2%、66.2%和58.1%,阴性预测值（NPV）分别为78.9%、79.8%和73.3%,m NAP和PCT联合检测时AUC为0.841（95%CI：0.774~0.908）,敏感性和特异性分别为79.7%和78.9%。血培养阳性组m NAP水平与PCT呈显著正相关（r=0.509,P〈0.01）。结论 m NAP联合PCT检测对预测SIRS患者血液细菌感染具有较高的敏感性和特异性,有较好的临床应用前景。

外周血中性粒细胞膜碱性磷酸酶诊断再生障碍性贫血的价值

目的探讨用流式细胞术检测再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）患者外周血中性粒细胞膜碱性磷酸酶（m NAP）变化的临床意义。方法病例对照研究。收集2014年8月至2015年12月连云港市第一人民医院收治的初诊全血细胞减少患者198例,其中明确诊断为AA者52例,对照组为非AA导致的全血细胞减少患者146例和体检健康者100例,用流式细胞术检测m NAP,ROC曲线评价其对AA的诊断效能。结果 AA、非AA疾病对照组及健康人对照组m NAP检测结果[M（P25-P75）]分别为13 931（11 128,21 605）、1 875（1 119,3 119）、1 831（1 371,2 411）AB/c,AA组m NAP表达水平明显高于非AA疾病对照组及健康人对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）,而非AA组与健康人对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。m NAP诊断AA的ROC曲线下面积为0.95,在最佳切点为6 388AB/c时,诊断AA的敏感性为90.90%（95%CI 0.83-0.96）,特异性为96.10%（95%CI 0.86-0.99）。结论检测外周血m NAP值对AA的鉴别诊断可能具有重要的辅助价值。

金黄色葡萄球菌血流感染患儿近期预后影响因素及mNAP、Presepsin、TREM-1的预后预测价值

目的探讨金黄色葡萄球菌血流感染患儿的近期预后影响因素及中性粒细胞膜碱性磷酸酶(mNAP)、可溶性白细胞分化抗原14亚型(Presepsin)、髓样细胞触发受体-1(TREM-1)的预后预测价值。方法收集2018年1月—2019年12月金黄色葡萄球菌血流感染106例作为感染组,根据患儿治疗30 d的生存情况,将其分为死亡组(n=11)、生存组(n=95)。将同期接受体检的健康儿童100例作为正常对照组。对比感染组与正常对照组血清mNAP、Presepsin、TREM-1水平,以及不同预后金黄色葡萄球菌血流感染患儿临床资料的差异,同时分析影响金黄色葡萄球菌血流感染患儿近期预后的独立危险因素及血清mNAP、Presepsin、TREM-1对预后的预测价值。结果感染组血清mNAP、Presepsin、TREM-1水平高于正常对照组(P<0.05)。死亡组与生存组白细胞、淋巴细胞、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、mNAP、Presepsin、TREM-1水平及急性生理与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分比较差异有统计学意义(P<0.01)。白细胞、淋巴细胞、APACHEⅡ评分、CRP、PCT、mNAP、Presepsin、TREM-1水平较高均是影响金黄色葡萄球菌血流感染患儿近期死亡的独立危险因素(P<0.05)。血清mNAP、Presepsin、TREM-1预测金黄色葡萄球菌血流感染患儿近期死亡的曲线下面积分别为0.822、0.744、0.794。结论mNAP、Presepsin、TREM-1水平较高是影响金黄色葡萄球菌血流感染患儿近期死亡的独立危险因素,三者对患儿近期死亡具有早期预测价值。

mNAP表达在全身炎症反应综合征患者血流细菌感染诊断中的应用价值

目的研究中性粒细胞膜碱性磷酸酶(mNAP)表达在全身炎症反应综合征(SIRS)患者血流细菌感染诊断中的应用价值。方法 138例SIRS患者依据血培养结果分组:SIRS血培养阳性组55例(其中革兰氏阴性菌感染39例,革兰氏阳性菌感染16例)、SIRS血培养阴性组83例(局部感染41例,非感染42例)。应用流式细胞技术定量检测mNAP,散射免疫比浊法测定C-反应蛋白(CRP),电化学发光法测定降钙素原(PCT);比较mNAP与CRP、PCT的相关性,并分析它们对SIRS患者血流细菌感染的预测价值。结果 SIRS血培养阳性组mNAP、CRP、PCT均显著高于SIRS血培养阴性组(Z=10.133、4.555、9.130,P<0.05),对血流感染的诊断特异性和敏感性分别是97.1%和96.0%,阴性、阳性预测率分别是94.1%和97.9%,均明显高于CRP和PCT。革兰氏阴性菌感染患者mNAP水平明显高于革兰氏阳性菌感染患者(Z=3.279,P<0.05)。结论采用流式细胞技术定量测定mNAP是可行的,并首次将其应用于SIRS患者的血流细菌感染的预测,灵敏度高、特异性好,临床应用前景广阔。

NAP、NLR及CD64在肿瘤化疗合并细菌感染患者早期诊断的意义

目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)及中性粒细胞表面(CD64)在肿瘤化疗合并细菌感染患者早期诊断的意义。方法选取2016年1月-2018年12月我院收治的200例肿瘤化疗后合并感染患者进行回顾性分析。应用流式细胞仪检测中性粒细胞表面CD64指数,全自动五分类细胞分析仪测定中性粒细胞与淋巴细胞比值,测定人NAP。结果真菌组、细菌组和病毒组患者体内NAP、NLR及CD64水平比较,细菌组患者NAP、NLR及CD64水平最高,真菌组、细菌组和病毒组患者体内NAP、NLR及CD64阳性检出的单独检出率明显低于三指标的联合检测率,差异具有统计学意义(均P<0.05)。真菌组、细菌组和病毒组患者体内NAP、NLR及CD64的联合检出率、灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值明显高于各指标的单独检出。结论NAP、NLR及CD64联合诊断在肿瘤化疗合并细菌感染患者的早期诊断中具有重要意义,特异性强,灵敏度高。

流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶方法的建立

目的 建立流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶（mNAP）表达.方法 方法学建立.采集研究对象乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝静脉血,应用PE标记抗碱性磷酸酶单克隆抗体,建立流式细胞术检测外周血mNAP表达方法.运用BD公司QuantiBRITETM PE于流式细胞术评估每个细胞结合的抗体数（AB/c）,间接反映待测细胞mNAP的表达量.观察肝素、乙二胺四乙酸二钾、柠檬酸钠3种抗凝剂、标本放置温度、时间以及血浆中碱性磷酸酶对结果的影响,评价方法精密度.用所建方法检测481名健康人群外周血mNAP表达水平,对数据进行正态性检验,确立临床参考区间.检测84例重症感染和局部感染患者和39例病毒感染患者外周血mNAP表达水平.结果 标本检测前,应用磷酸盐缓冲液洗涤可以有效消除血浆中碱性磷酸酶（ALP）干扰.3种不同抗凝剂采集的标本对mNAP检测结果无影响.标本放置室温或4℃12 h内对检测结果无影响.精密度实验结果,批内变异系数（CV） 2.01％ ～3.33％,平均CV 2.67％;批间CV 5.80％ ～6.00％,平均CV5.90％.健康成年人无论男女,mNAP表达水平均呈非正态分布.男、女中位数（P25,P75）分别为1 758（1 378 ～2 310） AB/c、1 897（1 369 ～3 249） AB/c,性别之间差异无统计学意义（U=27 140,P=0.243 8）.以2.5％ ～97.5％位数作为临床参考区间,结果为920.5 ～3 493.0 AB/c.细菌感染患者外周血中mNAP表达水平13 532（9 756 ～ 16 869） AB/c高于病毒感染患者1 143（536～2 012）AB/c以及健康对照人群1 879（1 399 ～2 497） AB/c（H=221.5,P＜0.01）.结论 应用QuantiBRITETM PE试剂盒来标准化流式细胞仪的设置,可定量分析待测样品荧光强度,进而获得细胞所含荧光素分子数,并计算出每个细胞表达的抗原位点或抗原分子数目,从而达到定量检测的目的.应用流式细胞术检测外周血中mNAP,操作简便、快速、结果准确,mNAP表达对于鉴别细菌、病毒感染具有重要的临床价值.

mNAP在细菌感染鉴别诊断中应用价值

目的探讨中性粒细胞膜碱性磷酸酶(mNAP)在细菌、病毒感染鉴别诊断中价值。方法选择2019年6月-2020年6月连云港市第一医院住院经明确诊断的细菌感染患者124例,病毒感染患者48例,非感染患者40例(对照组)为研究对象。采用荧光标记流式细胞术检测mNAP,免疫散射比浊法检测CRP,通过ROC曲线评价mNAP、CRP诊断效能。结果细菌感染患者mNAP、CRP水平高于病毒感染患者和对照组(P<0.01);病毒感染患者m NAP水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),而CRP水平高于对照组(P<0.01);mNAP、CRP诊断细菌感染AUC分别为0.980、0.970,诊断的敏感性分别为95.98%、94.87%;特异性分别为96.51%、74.23%。结论 mNAP在对细菌感染诊断特异性明显高于CRP,对细菌、病毒感染鉴别诊断具有一定参考价值。