反相高效液相色谱法快速测定婴儿配方乳粉中的维生素A酯类化合物

目的:开发一种快速测定婴儿配方乳粉中维生素A酯类含量的反相高效液相色谱法。方法:直接使用二氯甲烷和甲醇体积比为2.5:1的混合溶剂对样品进行提取,在30℃的条件下采用等度洗脱,流动相采用体积比为80:20的甲醇-三氯甲烷溶剂,流动相流速1.0mL/min;色谱柱温度30℃,检测波长325nm。结果:维生素A醋酸酯和维生素A棕榈酸酯的回收率分别为100.1%和102.8%,多次测定结果的相对偏差分别为1.18%和0.96%,检出限分别为3.1ng和4.3ng。结论:本方法操作简单、精密度、回收率和灵敏度高,适用于婴幼儿配方乳粉中的维生素A酯类的检测。

孕期边缘性维生素A缺乏对新生大鼠VA营养及LRAT的影响

目的:探讨孕期边缘性维生素A缺乏(Marginalvitamin Adeficiency,MVAD)对胎鼠维生素A(VitaminA,VA)营养及VA储存关键酶:卵磷脂视黄醇酰基转移酶(Lecithin retinol acyltransferase,LRAT)的影响。方法:16只健康成年雌性Wistar大鼠(260～300g)随机分为正常对照(Control)组和MVAD组,每组8只,成功制备上述模型后,与正常雄性Wistar大鼠合笼。收集孕鼠和胎鼠血清、肝脏组织。采用高效液相色谱法测定VA含量;分别采用RT-PCR和Western blot技术检测肝脏LRAT在mRNA水平和蛋白水平上的变化。结果:MVAD组孕鼠,胎鼠血清VA,肝脏VA明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001);同时,相对于Control组,MVAD组LRATmRNA和蛋白水平明显下调(P<0.001)。结论:孕期MVAD,胎鼠的血清维生素A水平明显下降,不能满足肝脏VA储存。血清VA水平不能很好地反映机体VA营养的真实水平,肝脏VA含量更能准确反映机体VA含量。LRAT在维生素A储存过程中起着关键作用。

环孢素A联合维生素A棕榈酸酯治疗睑板腺功能障碍相关干眼的疗效观察

目的评价0.05%环孢素A联合维生素A棕榈酸酯治疗睑板腺功能障碍(MGD)相关干眼的疗效。方法单中心、前瞻性、随机平行对照试验。纳入2022年7至11月在首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心确诊为MGD相关干眼患者,采用随机数字表法随机分为CsA+VA组(0.05%环孢素A滴眼液双眼点药,每日2次;维生素A棕榈酸酯眼用凝胶双眼点药,每日3次)、CsA+HA组(0.05%环孢素A滴眼液双眼点药,每日2次;0.1%玻璃酸钠滴眼液双眼点药,每日3次)、HA组(0.1%玻璃酸钠滴眼液双眼点药,每日3次)3个组治疗12周,分别记录并比较治疗前(基线)以及治疗后第4、8、12周的眼表疾病指数(OSDI)、泪河高度、荧光素泪膜破裂时间、SchirmerⅠ试验结果(无麻醉)、泪膜脂质层厚度、睑板腺形态、睑板腺分泌物排出能力和性状评分、角膜荧光素染色评分。采用单因素方差分析、单因素重复测量方差分析、两因素重复测量方差分析、Bonferroni检验等进行统计学分析。结果共收集120例(120只眼)符合标准的MGD相关干眼患者,失访10例(10只眼),最终纳入研究患者110例(110只眼),年龄为22~73岁,男性22例(22只眼),女性88例(88只眼);其中CsA+VA组38例(38只眼),CsA+HA组36例(36只眼),HA组36例(36只眼)。3个组OSDI、泪河高度、荧光素泪膜破裂时间和睑板腺分泌物性状评分治疗后均有明显改善,其中治疗第12周,CsA+VA组[25.45±15.11,(0.30±0.13)mm,(3.72±1.40)s,(5.03±2.52)分]和CsA+HA组[26.98±16.89,(0.27±0.10)mm,(4.34±1.76)s,(5.11±2.39)分]与HA组[24.57±11.26,(0.24±0.06)mm,(3.18±1.11)s,(9.11±3.34)分]相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);CsA+VA组的泪膜脂质层厚度[(72.61±23.65)nm]明显高于CsA+HA组[(68.39±26.66)nm](P<0.05)。在CsA+VA组中,睑板腺分泌物性状和排出能力重度异常者[治疗第12周,(6.28±2.59)和(5.89±2.77)分]、中度异常者[治疗第12周,(4.27±2.02)和(4.64±2.02)分]和轻度异常者[治疗第12周,(2.80±0.84)和(2.60±0.55)分]的睑板腺分泌物性状评分和排出能力评分比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论0.05%环孢素A联合维生素A棕榈酸酯可明显改善MGD相关干眼患者的症状和体征,尤其可明显改善泪膜脂质层厚度和重度患者的睑板腺分泌物性状和排出能力。

非水反相色谱-飞行时间质谱法对鱼肝油中维生素A酯的分离与鉴定

目的:建立非水反相色谱-飞行时间质谱法对鱼肝油中维生素A酯组分进行分离鉴定。方法:选择C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-异丙醇(8∶2)为流动相,对鱼肝油中的维生素A酯组分进行分离,并结合对照品比对与电喷雾正离子化/飞行时间质谱法进行结构鉴定。结果:在本试验研究的3种样品中,不同鳕鱼肝油样品可分别检测到维生素A醋酸酯与维生素A棕榈酸酯。金枪鱼肝油样品中共鉴定了15种维生素A酯,以维生素A油酸酯、棕榈酸酯、棕榈油酸酯、二十碳五烯酸(EPA)酯与二十二碳六烯酸(DHA)酯相对含量较高。结论:本文应用的方法能有效地分离鉴定鱼肝油中维生素A酯组分,可为鱼肝油质量检测提供参考。

C30-HPLC-PDA-TOF/MS对鱼肝油中维生素A酯顺反异构体的分离与鉴定

目的:建立高效液相色谱/飞行时间质谱法对鱼肝油中不同维生素A酯的顺反异构体进行分离鉴定。方法:选择YMC C30色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲基叔丁基醚-甲醇-水为流动相梯度洗脱,对鱼肝油中各种维生素A酯进行分离,结合电喷雾正离子化/飞行时间质谱法进行结构推断。并通过对照品比对等方法,对分离得到的顺反异构体做构型鉴定。结果:在本试验研究的2种样品中,鳕鱼肝油胶囊中主要含有全反式与13-顺式维生素A棕榈酸酯,鲨鱼肝油中主要含有全反式与13-顺式维生素A油酸酯、棕榈酸酯与硬脂酸酯,以及全反式花生烯酸酯与十七烷酸酯。结论:本方法能有效地分离鉴定鱼肝油中的多种全反式与13-顺式维生素A酯,可为鱼肝油质量控制提供参考依据。