大蒜素及前药对人食管癌细胞Eca9706的增殖抑制及其凋亡基因表达的影响

目的研究大蒜素和它的前药(蒜氨酸+蒜氨酸酶)对食管癌细胞Eca 9706的增殖抑制及对凋亡基因表达的影响。方法用大蒜素和大蒜素前药处理食管癌细胞Eca 9706,采用MTT法检测癌细胞的增殖抑制作用,实时定量RT-PCR检测凋亡基因的表达。结果大蒜素及其前药对食管癌细胞增殖抑制呈现时间和剂量相关性,大蒜素前药的抑制效果优于大蒜素。实时定量RT-PCR表明大蒜素和它的前药上调了癌细胞bax和caspase-3 mRNA的表达,下调survivin、突变型p53和bcl-2 mRNA的表达。结论大蒜素及其前药抑制食管癌细胞增殖和诱导凋亡可能是通过线粒体通路实现。

大蒜素前药对食管癌细胞Eca9706增殖及凋亡基因表达的影响分析

目的研究分析大蒜素前药对食管癌细胞Eca9706的增殖及对凋亡基因表达的影响。方法不同浓度的大蒜素前药分为A1组(10μg/mL)、A2组(20μg/mL)、A3组(40μg/mL)、A4组(生理盐水,0μg/mL)共4组,分别作用于食管癌细胞Eca9706,在培养1、2、3 d后,用MTT比色法(噻唑蓝)检测细胞增殖情况,实时荧光定量(RT-PCR法)检测4组细胞p53基因在mRNA水平表达情况。结果大蒜素前药对食管癌细胞Eca9706的增值抑制的最佳浓度为20μg/mL,最佳抑制时间为2 d,其对食管癌细胞Eca9706基因水平的抑制呈剂量依赖性。结论大蒜素前药可以有效抑制食管癌细胞Eca9706的增值,通过对凋亡相关基因的调控可以控制食管癌细胞增殖,从而达到消除肿瘤细胞的目的。

大蒜素及其前药对食管癌细胞生长的影响

通过大蒜素及大蒜素前药处理食管癌Eca9706细胞,观察细胞形态,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性和DNA降解。结果表明,癌细胞变圆、变小,活细胞数目减少,脱壁细胞和细胞碎片增多。DNA-Ladder试验结果显示,出现了DNA梯状条带,表明DNA分子发生降解。大蒜素及其前药处理的Eca9706细胞LDH活性显著高于对照组,随处理浓度增加和时间延长,LDH活性依次升高,表现出时间和剂量的依赖性。大蒜素前药处理Eca9706细胞的LDH活性明显高于大蒜素,表明大蒜素前药对细胞膜的损伤程度较大。

HPLC法测定大鼠血液中H_2S的含量

目的建立测定大鼠血液中H_2S含量的高效液相色谱法（HPLC法）。方法采用HPLC法,以乙腈-0.3%三乙胺=31：69（磷酸调pH=2.07）为流动相,检测波长为664 nm。将大蒜辣素（Allicin）加入大鼠血细胞中,37℃孵育10 min后,测定Allicin进入血细胞后释放的H_2S含量。结果HPLC法专属性符合要求,H_2S的线性范围为0.8~80μmol/L,定量限和检测限分别为0.8μmol/L和0.4μmol/L。将大蒜辣素加入大鼠血细胞中孵育后有H_2S产生,测得大蒜辣素产生的H_2S含量为3.23μmol/L。结论 HPLC法可用于生物样品中H_2S的含量测定,检测限满足内源性H2S测定要求。H2S是大蒜辣素在血细胞中孵育后的产物,大蒜辣素有望成为H_2S的供体。