薤白中两种新甾体皂甙成分

从中药薤白(Allium macrostemon Bunge)鳞茎中分得两种流的甾体皂甙,薤白甙甲(macrostemonoside A,1)和薤白甙丁(macrostemonoside D,2),通过光谱(IR,MS,~1HNMR,^(12)CNMR,~1H-~1H COSY和NOESY等)分析和衍生化研究,分别确定为:tigogenin-3-O-β-D-glucopyranosyl(1→2)[β-D-glucopyranosyl(1→3)]-β-D-glucopyranosyl(1→4)-β-D-galactopyranoside(1)和tigotenin-3-O-β-D-glucopyranosyl(1→2)[β-D-glucopyranosyl(1→3)(6-O-acetyl-β-D-glucopyranosyl)](1→4)-β-D-galactopyranoside(2)。

薤白中两种新呋甾皂甙的结构

自中药薤白(Allium macrostemon Bunge)鳞茎中分得三种甾体皂甙。经过化学降解和光谱(UV、IR,MS,~1H-NMR,^(13)C-NMR和FAB-MS)分析,鉴定其结构分别为(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖-5α-呋甾-20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)]-β-D-吡喃葡萄精基(1→4)-β-D-吡喃半乳糖甙(Ⅰ),(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5β-呋甾-20(22)-烯-3β,26-二醇-3-P-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖甙(Ⅱ)和异菝契皂甙元-3-O-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖甙(Ⅵ)。Ⅰ和Ⅱ为新的呋甾皂甙,分别命名为薤白甙戊和莲白甙己,初步药理实验测试二青均有较强的抑制ADP诱导的人血小板聚集作用。

响应面优化薤白皂苷提取工艺及抑菌活性的研究

研究超声波辅助乙醇提取薤白皂苷的最优工艺条件,并对其抑菌活性进行研究。以干燥后的薤白为原料,在单因素实验的基础上,选取固液比、超声功率、提取时间为自变量,皂苷提取率为响应值,根据响应面BoxBehnken试验设计原理,采用三因素三水平的分析方法模拟得到二次多项回归方程。同时采用抑菌圈法测定不同浓度薤白皂苷的抑菌活性。研究发现回归模型具有显著性,方程拟合较好,可对薤白皂苷提取率进行预测:即固液比1∶50,提取温度64℃,超声功率500 W,在此条件下薤白皂苷的提取率可达4.86%。研究并发现薤白皂苷对供试微生物都有一定的抑制效果,抑菌效果大小顺序为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、黑曲霉和桔青霉。

小根蒜甾体皂苷类成分的分离鉴定及抗癌活性

目的对小根蒜中甾体皂苷类成分进行分离和结构鉴定,并对得到的化合物进行体外抗癌活性评价。方法使用大孔吸附树脂、硅胶、ODS柱色谱及制备高效液相色谱等方法,通过化合物的理化性质及各种光谱技术鉴定化合物的结构。采用MTT法测定化合物体外抗癌活性。结果从小根蒜60%(φ)乙醇提取物中分离得到8个甾体皂苷类化合物,分别鉴定为薤白皂苷B(1)、薤白皂苷C(2)、薤白皂苷E(3)、(22S)胆甾-5-烯-1-β,3-β-,16β,22羟基1氧-α-L-鼠李吡喃糖基16-氧-β-D-葡萄吡喃糖苷(4)、(25R)26氧βD葡萄吡喃糖基22羟基呋甾5(6)烯3β,26二醇3氧βD葡萄吡喃糖基(1→2)[βD葡萄吡喃糖基(1→3)]-β-D-葡萄吡喃糖基(1→4)-β-D-半乳吡喃糖苷(5)、薤白皂苷F(6)、薤白皂苷G(7)、(25R)26氧-β-D-葡萄吡喃糖基22羟基-5-β-呋甾-3β,26-二醇-3-氧-β-D-葡萄吡喃糖基(1→2)-β-D-半乳吡喃糖苷(8)。化合物2、5、8在25μg·mL-1的质量浓度下可以明显地抑制SF268和NCIH460肿瘤细胞的生长。结论化合物8为从本属植物中首次分离得到,化合物4、5为首次从中药小根蒜中分离得到,化合物2、5、8有明显的体外抗癌作用。

薤白总皂苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响

目的观察薤白总皂苷对宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的薤白总皂苷(25、50、100、250、500、1000μg/ml)于不同作用时间(24、48、72 h)处理宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT法检测不同浓度的薤白总皂苷在不同作用时间下对HeLa细胞增殖率的影响;用100和200μg/ml的薤白总皂苷处理宫颈癌HeLa细胞48 h后,Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,JC-1染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase试剂盒检测HeLa细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性,荧光定量PCR测定Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果薤白总皂苷对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间一剂量依赖性;薤白总皂苷(100和200μ/ml)处理能显著降低HeLa细胞线粒体膜电位,抑制HeILa细胞增殖,促进其凋亡(P<0.05,P<0.01);上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05,P<0.01)。结论薤白总皂苷有显著的抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能与其降低HeLa细胞线粒体膜电位,上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性有关。

薤白皂苷对冠心病模型大鼠心肌细胞凋亡及炎性因子、NF-κB表达的影响

目的观察薤白皂苷对冠心病大鼠心肌细胞凋亡及炎性因子、核转录因子κB(NF-κB)表达的影响。方法将50只大鼠分为正常组、模型组、薤白皂苷低剂量组、薤白皂苷中剂量组和薤白皂苷高剂量组,每组10只。分别检测各组大鼠血清炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平和血浆NF-κB浓度;采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测各组心肌细胞凋亡率;采用苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠心肌组织的病理学变化;采用蛋白质印记法检测各组大鼠心肌组织NF-κB蛋白表达。结果与正常组比较,模型组血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平和NF-κB浓度均明显增加(P<0.05);与模型组比较,薤白皂苷低剂量组、薤白皂苷中剂量组和薤白皂苷高剂量组血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平和NF-κB浓度均明显降低(P<0.05),且呈逐渐递减趋势(P<0.05)。与正常组比较,模型组心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05);薤白皂苷低剂量组、薤白皂苷中剂量组和薤白皂苷高剂量组心肌细胞凋亡率均明显低于模型组(P<0.05),且呈逐渐递减趋势(P<0.05)。HE染色结果显示,正常组大鼠心肌组织正常,模型组大鼠心肌细胞明显肥大增厚,细胞浆呈浓染、增大,细胞间距增大,单位面积内心肌细胞数较正常组明显减少,血管壁增厚,血管周围有较多胶质沉淀,出现大量的炎症细胞浸润。且改善程度呈剂量依赖性,薤白皂苷高剂量组>薤白皂苷中剂量组>薤白皂苷低剂量组。与正常组比较,模型组大鼠心肌组织中NF-κB蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,薤白皂苷低剂量组、薤白皂苷中剂量组和薤白皂苷高剂量组大鼠心肌细胞中NF-κB蛋白表达明显降低(P<0.05),且呈逐渐递减趋势(P<0.05)。结论薤白皂苷可有效抑制冠心病大鼠心肌细胞凋亡,减缓炎症反应,同时抑制NF-κB蛋白的表达。

大孔树脂纯化薤白总皂苷的研究

目的:研究薤白中总皂苷纯化工艺。方法:采用大孔吸附树脂对薤白总皂苷进行吸附纯化,以总皂苷的收率、质量分数为考察指标综合评价。结果:薤白总皂苷纯化工艺为提取液上D101大孔树脂柱,吸附3h,以水和5%乙醇洗至无色,再以60%乙醇洗脱,60%乙醇部分为皂苷部位。结论:确定了薤白中皂苷部位的提取纯化工艺,总皂苷含量达到55%。

薤白皂苷对血小板聚集及血小板-中性粒细胞间相互作用的影响

目的探讨薤白皂苷对血小板聚集及血小板-中性粒细胞间相互作用的影响。方法分别于在体和离体环境下观察SD大鼠血小板聚集功能,采用玫瑰花环试验测定血小板与中性粒细胞的黏附能力,检测细胞溶质钙离子的浓度。结果薤白皂苷离体环境下呈浓度依赖性抑制花生四烯酸(AA)、腺苷二磷酸(ADP)或血小板活化因子(PAF)诱导的血小板聚集;薤白皂苷在体环境下呈浓度依赖性抑制PAF、ADP及AA诱导的血小板聚集,5 mg/kg薤白皂苷明显抑制PAF、AA和ADP诱导的血小板聚集;薤白皂苷可降低洗涤血小板内钙离子浓度;薤白皂苷可降低中性粒细胞与凝血酶激活的血小板间的黏附,并抑制中性粒细胞上清液诱导的血小板聚集,其50%抑制浓度分别为2.7、9.6μmol/L。结论薤白皂苷体外和体内均可抑制血小板聚焦,抑制血小板-中性粒细胞间的相互作用。

HPLC测定薤白提取物中呋甾皂苷Ⅰ的含量

目的：建立薤白提取物中呋甾皂苷Ⅰ的高效液相含量测定法.方法：薤白提取物经过甲醇回流后,滤液浓缩,定容,以甲醇-水（69：31）为流动相,柱温30℃,以HPLC-RID检测其中呋甾皂苷Ⅰ的含量.结果：线性范围5～100μg,r=0.999 8,平均回收率101.1%,RSD 1.6%.结论：本法简单,快捷,重复性良好,可用于薤白提取物的质量控制.

薤白皂苷对ADP 诱导血小板源性细胞外囊泡炎症反应的影响

目的:探讨薤白皂苷对ADP诱导血小板源性细胞外囊泡炎症反应的影响。方法:筛选人群入组,抽取其外周血进行离心分离提取血小板,洗涤血小板,并进行以下分组:①阿司匹林组;②正常对照组;③模型组;④薤白皂苷低浓度组;⑤薤白皂苷高浓度组;除正常对照组外上述各组经相应预处理后由ADP诱导激活炎症反应。通过高速离心提取血小板源性细胞外囊泡;同时将上述血小板源性细胞外囊泡与内皮细胞共培养;NTA法鉴定血小板源性细胞外囊泡;Western blot法、ELISA法、qPCR法检测血小板源性细胞外囊泡及内皮细胞CD40L、VCAM-1、ICAM-1等细胞因子以及p-JNK、p-P38、p-NF-κB、IκB-α等炎症相关通路蛋白的表达。结果:与模型组比较,薤白皂苷能下调血小板源性细胞外囊泡及内皮细胞中CD40L、VCAM-1、ICAM-1及p-JNK、p-P38、p-NF-κB等表达,上调IκB-α表达(P<0.05)。结论:薤白皂苷能抑制ADP诱导血小板源性细胞外囊泡炎症反应,并通过血小板源性细胞外囊泡抑制内皮细胞的炎症反应,其机制可能与CD40L/JNK/P38/NF-κB炎症相关信号通路有关。

薤白皂苷对冠心病寒痰阻滞证患者血小板聚集率的影响及机制研究

目的:研究薤白皂苷对冠心病寒痰阻滞证患者血小板聚集率及表面受体的影响,初步分析薤白皂苷的作用机制。方法:取冠心病寒痰阻滞证患者静脉血分离富含血小板血浆,按实验分组分别加入薤白皂苷等不同浓度受试药物,计算血小板聚集抑制率,流式细胞术检测ADP诱导活化血小板P-选择素(CD62P)、GPIIb-IIIa表达情况及对P2Y1和P2Y12受体的作用。结果:冠心病寒痰阻滞证薤白皂苷中、高浓度抑制ADP诱导的血小板聚集显著高于生理盐水对照的血小板聚集;4μmol/L的薤白皂苷显著降低活化血小板CD62p的表达率;4μmol/L的薤白皂苷下GPIIb/IIIa的表达率低于活化后表达率;低、中、高浓度的薤白皂苷分别联合P2Y1、P2Y12括抗剂对ADP诱导的血小板聚集率均显著高于ADP诱导的血小板聚集率。结论:薤白皂苷对于冠心病寒痰阻滞证患者ADP诱导的血小板聚集有更好的抑制作用,其可能作用于P2Y1和P2Y12,通过降低胞浆内巧离子浓度和升高CAMP含量抑制血小板聚集的效果。

野蒜的活性成分及其药理作用机制

野蒜为野生葱属植物,具有药食两用性。既富有营养物质,又具有通阳散结,行气导滞之功效,为食疗佳品。目前,研究热点在于其活性成分的结构,药理作用及作用机制,以开发新药,本文对这些热点进行综述。

薤白皂苷对冠心病大鼠血小板聚集及凝血功能的影响

目的:研究薤白皂苷对冠心病大鼠血小板聚集和凝血功能的影响。方法:以高脂饲料喂养及注射脑垂体后叶素建立冠心病大鼠模型,将模型大鼠随机分为薤白皂苷3个剂量组和阿司匹林组、空白对照组共5组,分别使用168、337、674 mg·kg^-1薤白皂苷和阿司匹林、生理盐水进行干预。采集大鼠动脉血,制备富血小板血浆检测血小板聚集率,同时检测凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(Fib)含量。结果:离体试验中,中、高剂量薤白皂苷组血小板聚集率低于阿司匹林组(P <0. 01或P <0. 05)。体内试验中,高剂量薤白皂苷组血小板聚集率与阿司匹林组差异无统计学意义(P> 0. 05)。不同剂量的薤白皂苷及阿司匹林均能延长大鼠TT、PT、APTT。高剂量的薤白皂苷对大鼠APTT的延迟作用与阿司匹林组差异无统计学意义(P> 0. 05)。不同剂量的薤白皂苷及阿司匹林均明显降低大鼠血浆Fib水平,高剂量薤白皂苷组大鼠血浆Fib水平与阿司匹林组差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:薤白皂苷具有抑制冠心病模型大鼠血小板聚集作用,同时能延长大鼠动脉血的TT、PT、APTT,降低血浆Fib含量。

薤白的炒制工艺研究

目的通过测定薤白中的浸出物、总皂苷含量以得到薤白的最佳炒制工艺。方法以浸出物、总皂苷含量为指标,采用正交试验优化炒制条件以进行测定。结果在测定薤白总皂苷含量时,炒制程度、炒制时间和泼水次数对结果的影响无显著性差异,各因素对总皂苷含量影响顺序为炒制时间>炒制程度>泼水次数;炒制程度对浸出物含量影响有显著性差异。结论薤白最佳炒制工艺为:在大火下炒制4 min,泼水2次(每50 g薤白泼水1次为1 ml)。